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公开(公告)号：CN112791084A
公开(公告)日：2021-05-14
申请号：CN202110291059.0
申请日：2021-03-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K31/4155 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于非洲猪瘟治疗技术领域，具体涉及ML‑60218用于预防或治疗非洲猪瘟的新用途。本发明意外发现，ML‑60218能够显著抑制非洲猪瘟病毒蛋白p30的表达，阻止病毒入侵宿主细胞，可用于抑制ASFV的早期感染；并且ML‑60218能够显著抑制非洲猪瘟病毒的复制，降低非洲猪瘟病毒感染后的病毒滴度，可作为非洲猪瘟病毒的抑制剂，用于预防或治疗非洲猪瘟。
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公开(公告)号：CN112522444A
公开(公告)日：2021-03-19
申请号：CN202011529612.1
申请日：2020-12-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒LAMP‑CRISPR检测用组合物、检测试剂盒和检测方法，该组合物包括LAMP扩增引物、crRNA和ssDNA荧光报告探针。该试剂盒包括上述组合物，还包括用于LAMP扩增的LAMP反应缓冲液、Bst DNA聚合酶和p72质粒模板，以及用于CRISPR Cas12a检测体系的LbCas12a、RNase抑制剂、CRISPR反应缓冲液。本发明采用LAMP方法与CRISPR相结合的技术，可高效、精准并且不需借助大型仪器达到检测结果可视化的目的，为ASFV的快速诊断提供了新的技术支持。本发明建立的LAMP‑CRISPR对ASFV抗原分子的检测具有较高的灵敏度，能够检测到单拷贝即7×100copies/μL的质粒浓度。
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公开(公告)号：CN112076314A
公开(公告)日：2020-12-15
申请号：CN202011020241.4
申请日：2020-09-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 茹毅 , 刘华南 , 张贵财 , 杨帆 , 李丹 , 郭建宏 , 何继军 , 张娇燕 , 李亚军 , 马坤 , 伍春平 , 郝荣增 , 卢炳州 , 田宏 , 朱紫祥 , 张克山 , 曹伟军 , 刘永杰 , 靳野 , 马旭升 , 党文
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域，具体涉及一种A型口蹄疫亚单位疫苗及其制备方法和应用。本发明以我国2013年A型口蹄疫病毒流行株(A/GDMM/2013)的三种结构蛋白VP0、VP3和VP1的氨基酸序列为基础进行优化设计，并借助小泛素样融合蛋白(SUMO)，筛选出单个质粒在大肠杆菌中同时高效、均一、可溶性表达这三种结构蛋白，且三种病毒结构蛋白成功在体外自组装；最终获得的目标蛋白约占菌体总蛋白30％以上，纯化后目标蛋白产量最高可达150mg/L。用本发明方法制备的口蹄疫疫苗，对我国A型口蹄疫流行毒具有良好的保护作用，疫苗最小全保护免疫剂量可低至20μg/头份。
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公开(公告)号：CN111996203A
公开(公告)日：2020-11-27
申请号：CN202010212917.3
申请日：2020-03-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 宁建刚 , 马坤 , 郝荣增 , 张伟 , 郑敏 , 魏婷 , 蒋保余 , 田宏 , 张克山 , 党文 , 马旭升 , 李丹 , 茹毅 , 何继军 , 郭建宏 , 刘湘涛
IPC: C12N15/41 , C12N15/42 , C12N7/01 , C12N15/85 , A61K39/125 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供一种重组O型口蹄疫病毒表位基因的塞内卡重组病毒、重组疫苗及其制备方法和应用，涉及基因工程技术领域。本发明获得SVV/FJ/001株全长cDNA，并对其5'UTR进行缺失及突变改造，同时在SVA cDNA中融合进串联的O型FMDV的重组表位基因，构建得到重组口蹄疫抗原表位的塞内卡重组病毒，该重组病毒能够表达融合进的口蹄疫B细胞表位和T细胞表位，且表达产物具有良好的反应原性，重组病毒的致病性显著降低甚至对猪无致病性，显著提高了毒株的生物安全性；制备的灭活疫苗具有良好的免疫原性，在有效激发SVA中和抗体的同时还能产生针对FMDV的特异性抗体，可用于塞内卡病毒及一种或多种非塞内卡病毒的防控。
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公开(公告)号：CN111621526A
公开(公告)日：2020-09-04
申请号：CN202010522276.1
申请日：2020-06-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/90 , C12N15/85 , C12N5/10 , A01K67/027 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种TOB1基因敲除单克隆细胞系的构建方法和应用。本发明发现在猪肾上皮细胞系IBRS-2中通过基因编辑技术敲除TOB1基因能够获得了一种抑制FMDV复制的单克隆细胞系细胞TOB1-KOs；细胞系TOB1-KOs经FMDV攻毒后，检测不到病毒核酸和蛋白，表明在IBRS-2中敲除TOB1基因获得的单克隆细胞系TOB1-KOs对具有FMDV抗性表型，能够完全抑制FMDV的复制，为未来预防或抑制FMDV感染提供一种可行策略。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110042083B
公开(公告)日：2020-08-28
申请号：CN201910249993.9
申请日：2019-03-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N7/00 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及稳定表达MAP3K8蛋白的BHK‑21细胞株及其构建和应用。该细胞株命名为BHK‑21/MAP3K8，保藏编号为CCTCC NO:C2018261。细胞株制备：目的基因MAP3K8合成，重组慢病毒载体Lv‑MAP3K8构建，包装表达MAP3K8的慢病毒，慢病毒感染BHK‑21细胞，经筛选、培养和鉴定获得稳定表达MAP3K8蛋白的BHK‑21细胞株。和BHK‑21相比较，BHK‑21/MAP3K8细胞株更有利于FMDV或SVV复制，更适合FMDV或SVV疫苗的研制和生产，同时为研究MAP3K8的基因功能提供了可靠材料。
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公开(公告)号：CN108912226B
公开(公告)日：2020-06-09
申请号：CN201810844879.6
申请日：2018-07-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/08 , C07K1/34 , G01N33/535 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种基于双峰驼抗山羊痘病毒VHH‑4‑2及用途，属于生物技术领域。包含抗山羊痘病毒VHH‑4‑2，VHH‑4‑2的筛选、表达、纯化、功能化标记以及活性验证，山羊痘病毒的浓缩、纯化，试剂盒各项指标的优化等。本发明使用了功能化标记的VHH‑4‑2，避免了一抗、二抗以及抗抗体等步骤，提高了灵敏性、稳定性，缩短了时间，节约了资源。突破了传统Elisa方法费时、费力等缺陷。本发明的提出为建立敏感山羊痘病毒的临床诊断方法，研究病毒的感染机理奠定基础；也为本发明研制出具有完全自主知识产权的山羊痘病毒抗体固相竞争Elisa试剂盒提供了关键标识物；另外，利用山羊痘弱毒苗经细胞扩大培养、浓缩、纯化后作为包被抗原，提高了灵敏度。
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公开(公告)号：CN109628478B
公开(公告)日：2019-10-08
申请号：CN201910007390.8
申请日：2019-01-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及稳定表达CD63‑GFP的PK‑15细胞株及其构建和应用，所述细胞株的保藏编号为：CCTCC NO:C2018253。构建方法包括以下步骤：目的基因合成、目的基因和慢病毒载体双酶切、重组质粒构建和鉴定、转染293T细胞、感染PK‑15细胞、细胞株筛选验证。采用本发明方法构建的稳定表达CD63‑GFP的PK‑15细胞株可用于细胞内、外的外泌体含量评估。利用本发明构建的稳定表达CD63‑GFP融合蛋白的PK‑15细胞株，可用荧光观察绿色荧光蛋白或通过流式细胞仪方便地评估外泌体的分泌量。该细胞株的建立为研究外泌体在病毒感染PK‑15细胞时的应用提供了可靠材料。
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公开(公告)号：CN110129288A
公开(公告)日：2019-08-16
申请号：CN201910401904.8
申请日：2019-05-14
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物医药领域，具体涉及TBK1作为E3泛素连接酶的新用途。本发明发现TBK1(TANK结合激酶1)具有泛素化功能，不仅能够在体外发生泛素化，而且能在体内发生泛素化，是一种新的E3泛素连接酶；本发明也发现了TBK1能够降解包括口蹄疫病毒(FMDV)、肠道病毒(EV71)、脑心肌炎病毒(EMCV)以及塞内卡病毒(SVV)在内的小核糖核酸病毒科病毒的结构蛋白VP3，尤其能够特异性地降解FMDV的结构蛋白VP3，可用于制备降解口蹄疫病毒蛋白相关药物，阻止口蹄疫病毒蛋白组装相关药物以及预防或治疗口蹄疫病毒感染相关药物。
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公开(公告)号：CN110129272A
公开(公告)日：2019-08-16
申请号：CN201910249994.3
申请日：2019-03-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N7/00 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及稳定表达MAP3K8蛋白的PK-15细胞株及其构建和应用。该细胞株命名为PK-15/MAP3K8，保藏编号为CCTCC NO:C2018262。该细胞株的制备包括以下步骤：目的基因MAP3K8的合成，重组慢病毒载体Lv-MAP3K8的构建，包装表达MAP3K8的慢病毒，慢病毒感染PK-15细胞，筛选培养和鉴定获得稳定表达MAP3K8蛋白的PK-15细胞株。和野生型PK-15细胞相比较，利用PK-15细胞大量表达MAP3K8可以显著抑制FMDV或SVV的复制。该细胞株的建立为研究猪源细胞中MAP3K8基因功能及其背后的分子机制提供了生物材料。
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