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公开(公告)号：CN113278066A
公开(公告)日：2021-08-20
申请号：CN202110573254.2
申请日：2021-05-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , C12N15/85 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种全猪源非洲猪瘟病毒单克隆抗体及其制备的方法和应用。所述单克隆抗体包括重链恒定区、重链可变区、轻链恒定区和轻链可变区，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:5所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:6所示。本发明的特异性针对非洲猪瘟病毒的全猪源单克隆抗体，保留了轻链、重链可变区的天然配对，具有基因多样性好、全猪源、抗体亲和力好、特异性强等优势，可在真核表达系统中进行高效表达。本发明为开发非洲猪瘟病毒诊断试剂盒提供了新型原材料，也为研制全猪源单克隆抗体的预防与治疗性药物提供了新的技术支持。
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公开(公告)号：CN112062817A
公开(公告)日：2020-12-11
申请号：CN202010631605.6
申请日：2020-07-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/085 , C07K14/09 , C12N15/41 , C12N15/42 , A61K39/125 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于病毒免疫学领域，尤其是涉及Lpro蛋白的新用途以及FMDV L基因缺失突变毒株的应用。本发明发现Lpro以剂量依赖的方式阻碍了JAK‑STAT信号转导。同时发现了Lpro的新功能，即通过与STATs的特定区域相互作用并以溶酶体依赖方式降解在细胞内JAK‑STAT途径的胞内组分，而不是通过Lpro经典的蛋白酶活性来作用于JAK‑STAT信号传导。FMDV的Lpro的蛋白酶活性中心位点是参与溶酶体降解途径的关键位点。Lpro的蛋白酶活性中心位点是其自身K48泛素化的关键位点。本发明为RNA病毒科的病毒如口蹄疫的防控和疫苗设计提供了新的靶点和理论支持。
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公开(公告)号：CN111925994A
公开(公告)日：2020-11-13
申请号：CN202010631604.1
申请日：2020-07-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于预防兽医领域，具体涉及一种DP71L基因缺失的重组非洲猪瘟病毒及其制备方法和应用。本发明发现了非洲猪瘟病毒DP71L蛋白能够抑制cGAS+MITA或MITA诱导的IFNβ的活性，本发明还提供一种DP71L基因缺失的重组非洲猪瘟病毒，该重组非洲猪瘟病毒是将非洲猪瘟病毒的DP71L基因缺失后得到的。将本发明构建的基因缺失非洲猪瘟病毒感染细胞，与野生毒株比较显示，毒力减弱；将本发明构建的基因缺失非洲猪瘟病毒免疫猪后，无死亡等临床症状，血液病毒含量在感染后期显著降低，存活率均为100％，表明该重组病毒充分致弱，作为疫苗是非常安全的。因此可以将上述DP71L基因缺失的重组非洲猪瘟病毒在制备非洲猪瘟疫苗中进行应用，具有相应的社会价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111925994B
公开(公告)日：2023-05-26
申请号：CN202010631604.1
申请日：2020-07-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于预防兽医领域，具体涉及一种DP71L基因缺失的重组非洲猪瘟病毒及其制备方法和应用。本发明发现了非洲猪瘟病毒DP71L蛋白能够抑制cGAS+MITA或MITA诱导的IFNβ的活性，本发明还提供一种DP71L基因缺失的重组非洲猪瘟病毒，该重组非洲猪瘟病毒是将非洲猪瘟病毒的DP71L基因缺失后得到的。将本发明构建的基因缺失非洲猪瘟病毒感染细胞，与野生毒株比较显示，毒力减弱；将本发明构建的基因缺失非洲猪瘟病毒免疫猪后，无死亡等临床症状，血液病毒含量在感染后期显著降低，存活率均为100％，表明该重组病毒充分致弱，作为疫苗是非常安全的。因此可以将上述DP71L基因缺失的重组非洲猪瘟病毒在制备非洲猪瘟疫苗中进行应用，具有相应的社会价值。
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公开(公告)号：CN112522444A
公开(公告)日：2021-03-19
申请号：CN202011529612.1
申请日：2020-12-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒LAMP‑CRISPR检测用组合物、检测试剂盒和检测方法，该组合物包括LAMP扩增引物、crRNA和ssDNA荧光报告探针。该试剂盒包括上述组合物，还包括用于LAMP扩增的LAMP反应缓冲液、Bst DNA聚合酶和p72质粒模板，以及用于CRISPR Cas12a检测体系的LbCas12a、RNase抑制剂、CRISPR反应缓冲液。本发明采用LAMP方法与CRISPR相结合的技术，可高效、精准并且不需借助大型仪器达到检测结果可视化的目的，为ASFV的快速诊断提供了新的技术支持。本发明建立的LAMP‑CRISPR对ASFV抗原分子的检测具有较高的灵敏度，能够检测到单拷贝即7×100copies/μL的质粒浓度。
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公开(公告)号：CN113278066B
公开(公告)日：2021-12-14
申请号：CN202110573254.2
申请日：2021-05-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , C12N15/85 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种全猪源非洲猪瘟病毒单克隆抗体及其制备的方法和应用。所述单克隆抗体包括重链恒定区、重链可变区、轻链恒定区和轻链可变区，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:5所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:6所示。本发明的特异性针对非洲猪瘟病毒的全猪源单克隆抗体，保留了轻链、重链可变区的天然配对，具有基因多样性好、全猪源、抗体亲和力好、特异性强等优势，可在真核表达系统中进行高效表达。本发明为开发非洲猪瘟病毒诊断试剂盒提供了新型原材料，也为研制全猪源单克隆抗体的预防与治疗性药物提供了新的技术支持。
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公开(公告)号：CN113092753A
公开(公告)日：2021-07-09
申请号：CN202110364113.X
申请日：2021-04-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种用于全程监测非洲猪瘟病毒抗体的胶体金双联检测试纸条及其制备方法，所述试纸条包括PVC底板，所述的PVC底板上从左到右依次设置有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫，所述硝酸纤维素膜上设有检测线和质控线，所述结合垫包被胶体金标记的ASFV p30蛋白和ASFV p72蛋白，所述检测线包被ASFV p72和ASFV p30蛋白，所述质控线C包被抗ASFV p30蛋白单克隆抗体和/或抗ASFV p72蛋白单克隆抗体；本发明通过优化结合垫的制备，实现了非洲猪瘟病毒抗体的全程监控，相比于单个的p30或p72试纸条可以更加准确的获悉机体的感染时期，同时结合其特异性好、灵敏性较高，有望成为非洲猪瘟抗体的现场或者实验室检测的技术手段，为非洲猪瘟的精确、快速诊断提供一种新思路。
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公开(公告)号：CN111796105A
公开(公告)日：2020-10-20
申请号：CN202010750289.4
申请日：2020-07-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/96 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/535
Abstract: 本发明属于免疫检测分析技术领域，具体涉及一种非洲猪瘟病毒磁微粒化学发光抗体检测试剂盒及其应用，该试剂盒以ASFV P30重组蛋白为磁微粒偶联物，以化学发光标记物标记的羊抗猪IgG为检测抗体。具体由偶联有ASFV P30重组蛋白的磁微粒混悬液、试剂R、定标品、质控品、样品稀释液、洗涤液及发光液组成，所述试剂R为稀释后的化学发光标记物标记的羊抗猪IgG抗体工作液。本发明试剂盒以磁微粒化学发光法为检测技术，同时结合碱性磷酸酶标记技术，具有特异性高、灵敏性好、重复性优、稳定性强等特点，可广泛应用于基层ASFV检测。
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