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公开(公告)号:CN116672443B
公开(公告)日:2024-11-29
申请号:CN202310647769.1
申请日:2023-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 郝荣增 , 朱紫祥 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 毛箬青 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
IPC: A61K39/12 , A61K39/385 , A61K9/14 , A61K47/34 , A61K47/32 , A61K47/36 , A61K47/10 , A61K47/42 , A61K47/02 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟组合疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒抗原P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合,其中至少一种抗原与纳米颗粒载体形成含有所述抗原或其抗原表位的纳米颗粒;所述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合能够刺激机体产生较强的免疫反应;其次本发明制备了包含上述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合的疫苗,所述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险,突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题。
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公开(公告)号:CN116747296A
公开(公告)日:2023-09-15
申请号:CN202310605961.4
申请日:2023-05-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 朱紫祥 , 毛箬青 , 郝荣增 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种十一组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、E165R蛋白、C129R蛋白、P72蛋白、X蛋白、Y蛋白、A蛋白和B蛋白组成的非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合,所述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合能够诱导机体产生较强的免疫反应;其次本发明制备了包含上述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合的十一组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗,所述亚单位疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险,突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题,证明了非洲猪瘟亚单位疫苗研究方案的可行性。
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公开(公告)号:CN116445486A
公开(公告)日:2023-07-18
申请号:CN202310322418.3
申请日:2023-03-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/12 , C12N7/00 , C12N5/10 , A61K39/135 , A61K38/17 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12R1/91 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及KLHL34敲除细胞系的构建及作为小RNA病毒科病毒疫苗生产细胞系的应用。本发明首先发现,抑制宿主细胞中KLHL34基因表达能促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制;其次,本发明提供了一种特异性靶向KLHL34的sgRNA,所述sgRNA能够特异性靶向KLHL34基因,结合CRISPR‑Cas9技术实现了KLHL34基因的敲除,获得的单克隆细胞系能够显著促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制,提高FMDV疫苗的生产量和抗原产量,可作为小核糖核酸病毒科病毒疫苗尤其是FMDV疫苗的生产细胞系,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN113637709B
公开(公告)日:2023-01-17
申请号:CN202110933585.2
申请日:2021-08-14
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/90 , C12N5/10 , C12N15/12 , C12N15/113 , A61K31/7105 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 首先,本发明发现通过抑制或沉默宿主KIF5B基因,能够抑制口蹄疫病毒的复制,可作为靶点用于制备或筛选抑制口蹄疫病毒复制的药物;其次,以KIF5B为靶点,本发明设计了siRNA,所述siRNA能够抑制口蹄疫病毒复制,可用于制备抑制口蹄疫病毒复制的药物;同时,本发明提供了特异性靶向KIF5B的sgRNA,所述sgRNA能够靶向KIF5B基因,并结合CRISPR‑Cas9技术,实现了宿主细胞中KIF5B基因的完全敲除,获得的单克隆细胞系对口蹄疫病毒具有抗性表型,能够显著抑制口蹄疫病毒在细胞内的复制,也为进一步研究KIF5B基因在细胞内调控病原微生物复制的分子机制提供研究工具和材料。
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公开(公告)号:CN115340609A
公开(公告)日:2022-11-15
申请号:CN202110516349.0
申请日:2021-05-12
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , A61K39/135 , A61K9/14 , A61P31/14 , B82Y5/00 , B82Y40/00 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域,具体涉及一种口蹄疫病毒多抗原表位融合蛋白、蛋白笼纳米颗粒及其制备方法。本发明发现,在氨基酸序列改造后的Encapsulin蛋白片段的特定位置引入口蹄疫病毒抗原表位序列(包括B细胞表位和T细胞表位)能够实现目标蛋白在大肠杆菌中高效、可溶性表达,并且能够成功自组装成蛋白笼纳米颗粒;组装的蛋白笼纳米颗粒,颗粒均一,并具有较高的耐热稳定性;所述组装的蛋白笼纳米颗粒经抗原乳化后免疫豚鼠和猪,均可刺激机体产生病毒中和性抗体,具有较好的免疫保护作用,可用于口蹄疫疫苗的制备。
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公开(公告)号:CN114134211A
公开(公告)日:2022-03-04
申请号:CN202111489506.X
申请日:2021-12-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/6851 , G01N33/573 , C12N15/113 , C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/55 , A61K45/00 , A61K31/713 , A61K31/7088 , A61K48/00 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及USP30基因作为靶点在抑制塞内卡谷病毒复制中的应用。(1)本发明发现抑制或沉默宿主USP30基因,能够抑制塞内卡谷病毒的复制,即USP30可作为靶点用于筛选抑制塞内卡谷病毒复制的药物;(2)本发明提供了干扰塞内卡谷病毒复制的小干扰RNA,能够抑制塞内卡谷病毒的复制;(3)本发明提供了一种特异性靶向USP30基因的sgRNA,结合CRISPR‑Cas9技术实现了USP30基因的完全敲除,获得的单克隆细胞系USP30‑KOs对SVA具有抗性表型,能够显著抑制SVA在细胞内的复制,为进一步研究USP30基因在细胞内调控病原微生物复制的分子机制提供研究工具和材料。
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公开(公告)号:CN113355275A
公开(公告)日:2021-09-07
申请号:CN202110656125.X
申请日:2021-06-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种羔绵羊睾丸支持细胞、睾丸支持细胞亚克隆及其分离方法和应用,其中,所述支持细胞SCST的保藏编号为CCTCC No.C2019203,将其转染SV40大T抗原基因使其永生化,然后进行压力粗筛、压力分种以及持续传代,得到细胞亚克隆SCST‑T F13,其保藏编号为CCTCC No.C202130,可用于牛结节性皮肤病、羊痘及羊口疮等病毒的分离及规模化繁殖。所述细胞亚克隆可以用含国产血清的培养基培养,降低了生产成本,适合规模化生产应用。本发明的细胞亚克隆与常规原代细胞相比,而且能够明显提高牛结节性皮肤病毒的分离率,且牛结节性皮肤病毒的致病变时间明显缩短、分离病毒的拷贝数比传统细胞提高100倍以上,可以为牛结节性皮肤病毒的规模化繁殖及病毒感染致病机制研究提供工具。
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公开(公告)号:CN113248574A
公开(公告)日:2021-08-13
申请号:CN202110515657.1
申请日:2021-05-12
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/085 , C12N15/70 , C12N15/62 , C07K1/22 , A61K39/125 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域,具体涉及一种高效表达A型塞内卡病毒结构蛋白的方法。本发明首先对编码A型塞内卡病毒三种结构蛋白VP0、VP3和VP1的基因进行原核表达密码子优化,并借助小泛素样融合蛋白,获得了在大肠杆菌中同时可溶性表达三种结构蛋白的单个质粒;其次,在大肠杆菌中转入分子伴侣质粒和上述A型塞内卡病毒结构蛋白质粒,进一步提高了A型塞内卡病毒结构蛋白的可溶性表达,并解决了目标蛋白表达量不均一的问题,获得的目标蛋白约占菌体总蛋白25%以上;由表达获得的三种结构蛋白配制获得的塞内卡病毒病亚单位疫苗,能够激发猪体产生较高水平的中和性抗体,对国内A型塞内卡流行毒具有良好的保护作用。
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公开(公告)号:CN111996201B
公开(公告)日:2021-07-13
申请号:CN202010212907.X
申请日:2020-03-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 杨帆 , 曹伟军 , 蒋保余 , 朱紫祥 , 魏婷 , 郑敏 , 田宏 , 张克山 , 张伟 , 刘永杰 , 党文 , 马旭升 , 李丹 , 茹毅 , 何继军 , 郭建宏 , 刘湘涛
IPC: C12N15/41 , C12N15/42 , C12N7/01 , C12N15/85 , A61K39/125 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供一种重组A型口蹄疫病毒VP1基因的塞内卡重组病毒、重组疫苗株及其制备方法和应用,涉及基因工程技术领域。本发明提供了塞内卡病毒重组核酸、包含所述重组核酸的塞内卡重组病毒、包含所述塞内卡重组病毒的塞内卡重组疫苗株及其制备方法和应用。本发明对SVV/FJ/001株基因缺失突变改造,在其cDNA中融合进A型FMDV的VP1基因,得到塞内卡重组病毒,该重组病毒能够表达融合进的基因,且表达产物具有良好的反应原性;获得的疫苗株抗原产能高,致病性显著降低甚至对猪无致病性,灭活疫苗免疫动物后不仅能激发SVA的免疫应答,而且能产生针对融合基因的免疫活性,可用于塞内卡病毒及一种或多种非塞内卡病毒的防控。
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