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公开(公告)号：CN118995812A
公开(公告)日：2024-11-22
申请号：CN202410938031.5
申请日：2024-07-12
Applicant: 中国农业大学 , 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/42 , C12N15/113 , C12N9/22 , A61K31/713 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了敲除ZHX3基因在抑制口蹄疫病毒复制中的应用，涉及基因工程技术领域。本发明还公开了敲除ZHX3基因的试剂或药物在制备口蹄疫病毒抑制药物中的应用。本发明发现通过基因编辑技术敲除ZHX3基因后，获得的ZHX3基因敲除细胞系经FMDV攻毒后，细胞内FMDV病毒RNA拷贝数较野生型IBRS‑2细胞显著降低，表明ZHX3基因敲除细胞系具有FMDV抗性表型，能够有效抑制FMDV病毒的复制，为预防或抑制FMDV感染提供了一种可行策略。
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公开(公告)号：CN118086229A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202410329522.X
申请日：2024-03-21
Applicant: 兰州大学 , 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及一种猪繁殖与呼吸综合征复制缺陷型病毒株、制备方法及应用，所述的复制缺陷型病毒株将亲本猪繁殖与呼吸综合征病毒全基因组感染性克隆的ORF3基因第346‑543位核苷酸缺失得到，所述的复制缺陷型病毒株在稳定表达猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF3基因编码的GP3蛋白的细胞系中正常连续复制，在MARC‑145、CRL2843‑CD163和PAMs等不表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP3蛋白的其他PRRSV易感细胞系中仅进行单轮感染，有望成为一种安全有效的活病毒疫苗株，解决PRRSV灭活疫苗免疫效果差和弱毒疫苗存在持续带毒、间歇排毒和毒力返强的潜在危害，对于PRRSV防控具有重要意义。
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公开(公告)号：CN116589538B
公开(公告)日：2023-12-05
申请号：CN202310373357.3
申请日：2023-04-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 朱紫祥 , 毛箬青 , 郝荣增 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
IPC: C07K14/01 , C07K19/00 , A61K39/12 , A61K39/295 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合，所述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合能够产生较强的免疫反应；其次本发明制备了包含上述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合的七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗，所述七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率，无生物安全风险，突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题，证明了非洲猪瘟亚单位疫苗研究方案的可行性。
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公开(公告)号：CN115948466B
公开(公告)日：2023-11-14
申请号：CN202310019982.8
申请日：2023-01-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/85 , C12N7/00 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12N15/113 , C12N5/10 , C12N15/12 , C12R1/93 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及Tollip敲除细胞系的构建及作为小RNA病毒科病毒疫苗生产细胞系的应用。本发明首先发现，抑制宿主细胞中Tollip基因表达能促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制；其次，本发明提供了一种特异性靶向Tollip的sgRNA，所述sgRNA能够特异性靶向Tollip基因，结合CRISPR‑Cas9技术实现了Tollip基因的敲除，获得的单克隆细胞系能够显著促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制，提高FMDV疫苗的生产量和抗原表达量，可作为小核糖核酸病毒科病毒疫苗尤其是FMDV疫苗的生产细胞系，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN116948003A
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202310933866.7
申请日：2023-07-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/47 , C12N15/113 , A61K45/00 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12N5/10 , C12N7/00 , C12N15/85 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及EIF2B4敲除细胞系的构建及作为小RNA病毒科病毒疫苗生产细胞系的应用。首先，本发明发现过表达宿主EIF2B4基因，能够抑制FMDV的复制，可作为靶点用于设计和筛选抑制FMDV复制的药物；其次，抑制或沉默宿主EIF2B4基因获得的宿主细胞能够促进FMDV病毒的复制，可作为FMDV病毒或病毒疫苗的生产细胞系；基于此，本发明设计了一种特异性靶向EIF2B4基因基因的sgRNA，结合CRISPR/Cas9技术实现了EIF2B4基因的敲除，获得的单克隆细胞系能够显著促进FMDV在细胞内的复制，为研究EIF2B4基因的分子机制提供了工具和材料，具有广阔的前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116672443A8
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202310647769.1
申请日：2023-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 郝荣增 , 朱紫祥 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 毛箬青 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
IPC: A61K39/12 , A61K39/385 , A61K9/14 , A61K47/34 , A61K47/32 , A61K47/36 , A61K47/10 , A61K47/42 , A61K47/02 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟组合疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒抗原P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合，其中至少一种抗原与纳米颗粒载体形成含有所述抗原或其抗原表位的纳米颗粒；所述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合能够刺激机体产生较强的免疫反应；其次本发明制备了包含上述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合的疫苗，所述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率，无生物安全风险，突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题。
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公开(公告)号：CN116785419A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202310607714.8
申请日：2023-05-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 朱紫祥 , 毛箬青 , 郝荣增 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物技术领域。首先提供了一种由非洲猪瘟病毒P34、P30、P54、A104R、E165R、C129R、P72、X、Y、P8、P15、K205R、K78R、MGF 110‑5L‑6L、L60L、MGF 110‑4L、MGF 110‑7L、I215L、P14、P35、E248R、A238L、EP153R蛋白组成的抗原蛋白组合，所述抗原蛋白组合能够诱导机体产生较强的免疫反应；其次本发明制备了包含上述抗原蛋白组合的二十三组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗，所述亚单位疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率，无生物安全风险，突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题。
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公开(公告)号：CN116355905A
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN202310323610.4
申请日：2023-03-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 兰州大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N5/10 , C07K14/47 , C12N7/00 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12R1/93 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及一种促进小RNA病毒科病毒复制的BHK‑21细胞系、构建方法及应用。本发明提供了一种特异性靶向KLHL34的sgRNA，所述sgRNA能够特异性靶向KLHL34基因，结合CRISPR‑Cas9技术在BHK‑21细胞系中实现了KLHL34基因的敲除，获得的单克隆细胞系能够显著促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制，提高FMDV疫苗的生产量和抗原产量，可作为小核糖核酸病毒科病毒疫苗尤其是FMDV疫苗的生产细胞系，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN114316035B
公开(公告)日：2023-05-26
申请号：CN202210010319.7
申请日：2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 杨洋 , 秦晓东 , 茹毅 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种通用型的口蹄疫病毒结构蛋白抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒146s为免疫原，免疫Balb/c小鼠，经细胞融合，筛选获得两株高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系，并获得了两种鼠单克隆抗体m33和m77。免疫印迹和间接免疫荧光试验表明所述单克隆抗体m33和m77对O型不同谱系病毒和A型谱系不同病毒均具有广谱反应性。m33和m77抗体特异性结合在FMDV结构蛋白中的型间保守抗原表位，相较于现有抗体，显著提高了检测结果的灵敏度和特异性，适用于O型和A型FMDV感染或灭活疫苗免疫后结构蛋白抗体的检测，是一种FMD非免疫动物群体感染状况监测的新方法。
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公开(公告)号：CN114410587A
公开(公告)日：2022-04-29
申请号：CN202210029737.0
申请日：2022-01-12
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/10 , C12N15/34 , C12N15/867 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及非洲猪瘟病毒技术领域，具体涉及一种提高非洲猪瘟病毒非靶细胞MA‑104细胞系感染滴度的方法。将非洲猪瘟病毒的D1133L基因片段插入慢病毒载体中，得到重组慢病毒载体，然后将重组慢病毒转染MA104细胞系，得到稳定表达D1133L基因的MA‑104细胞系MA‑104/D1133L，利用该细胞系接种非洲猪瘟病毒，可大大提高非洲猪瘟病毒滴度。感染ASFV后的MA‑104/D1133L可以多次收毒。本发明得到的MA‑104/D1133L细胞株与野生型MA‑104相比，ASFV病毒滴度显著提高。
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