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公开(公告)号:CN116589538B
公开(公告)日:2023-12-05
申请号:CN202310373357.3
申请日:2023-04-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 朱紫祥 , 毛箬青 , 郝荣增 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
IPC: C07K14/01 , C07K19/00 , A61K39/12 , A61K39/295 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合,所述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合能够产生较强的免疫反应;其次本发明制备了包含上述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合的七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗,所述七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险,突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题,证明了非洲猪瘟亚单位疫苗研究方案的可行性。
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公开(公告)号:CN113896771B
公开(公告)日:2023-10-27
申请号:CN202111307559.5
申请日:2020-08-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一类促进猪机体产生非洲猪瘟病毒抗原特异性免疫应答的多肽及其应用,属于生物医药技术领域;所述多肽包括第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽中的一种或几种;所述第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽的氨基酸序列分别如SEQ IDNO.1~SEQ ID NO.5所示。本发明的多肽能够显著促进ASFV致敏免疫细胞增殖,并且能够通过促进猪单核巨噬细胞及B、T淋巴细胞分泌IFN‑γ促进猪机体产生ASFV抗原特异性免疫应答。免疫动物后,能显著促进猪机体免疫应答。本发明所述多肽或者由多肽聚合得到的多肽聚合物能够用于制备非洲猪瘟病毒的亚单位疫苗。
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公开(公告)号:CN116672443A8
公开(公告)日:2023-09-29
申请号:CN202310647769.1
申请日:2023-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 郝荣增 , 朱紫祥 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 毛箬青 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
IPC: A61K39/12 , A61K39/385 , A61K9/14 , A61K47/34 , A61K47/32 , A61K47/36 , A61K47/10 , A61K47/42 , A61K47/02 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟组合疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒抗原P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合,其中至少一种抗原与纳米颗粒载体形成含有所述抗原或其抗原表位的纳米颗粒;所述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合能够刺激机体产生较强的免疫反应;其次本发明制备了包含上述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合的疫苗,所述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险,突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题。
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公开(公告)号:CN116785419A
公开(公告)日:2023-09-22
申请号:CN202310607714.8
申请日:2023-05-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 朱紫祥 , 毛箬青 , 郝荣增 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物技术领域。首先提供了一种由非洲猪瘟病毒P34、P30、P54、A104R、E165R、C129R、P72、X、Y、P8、P15、K205R、K78R、MGF 110‑5L‑6L、L60L、MGF 110‑4L、MGF 110‑7L、I215L、P14、P35、E248R、A238L、EP153R蛋白组成的抗原蛋白组合,所述抗原蛋白组合能够诱导机体产生较强的免疫反应;其次本发明制备了包含上述抗原蛋白组合的二十三组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗,所述亚单位疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险,突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题。
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公开(公告)号:CN114807062B
公开(公告)日:2023-09-05
申请号:CN202210240926.2
申请日:2022-03-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种非洲猪瘟病毒I73R基因条件性缺失毒株的构建及其作为疫苗的应用。本发明在基因Ⅱ型非洲猪瘟(African swine fever,ASF)亲本毒株ASFV CN/GS/2018中条件性敲除I73R基因构建了ASFV I73R基因条件性缺失毒株(vI73Ri);所述vI73Ri是一株安全性高的减毒ASF候选疫苗株,对猪完全致弱、免疫猪无典型ASF临床症状、免疫后在猪血液内检测到非常低的病毒,且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒提供100%免疫保护,可作为安全和有效的防控ASF疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN113845568B
公开(公告)日:2023-08-18
申请号:CN202111363404.3
申请日:2020-08-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一类促进猪机体产生广谱获得性免疫应答的多肽及其应用,属于生物医药技术领域;所述多肽包括第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽中的一种或几种;所述第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.5所示。本发明的多肽能够高水平促进健康猪机体的单核巨噬细胞增殖,显著促进健康猪机体的CD8+T细胞及B细胞分泌IFN‑γ从而增强猪机体产生广谱获得性免疫应答,能够作为猪病疫苗的有效组分或者疫苗免疫增强剂。
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公开(公告)号:CN114410587A
公开(公告)日:2022-04-29
申请号:CN202210029737.0
申请日:2022-01-12
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/10 , C12N15/34 , C12N15/867 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及非洲猪瘟病毒技术领域,具体涉及一种提高非洲猪瘟病毒非靶细胞MA‑104细胞系感染滴度的方法。将非洲猪瘟病毒的D1133L基因片段插入慢病毒载体中,得到重组慢病毒载体,然后将重组慢病毒转染MA104细胞系,得到稳定表达D1133L基因的MA‑104细胞系MA‑104/D1133L,利用该细胞系接种非洲猪瘟病毒,可大大提高非洲猪瘟病毒滴度。感染ASFV后的MA‑104/D1133L可以多次收毒。本发明得到的MA‑104/D1133L细胞株与野生型MA‑104相比,ASFV病毒滴度显著提高。
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公开(公告)号:CN111849979B
公开(公告)日:2022-02-08
申请号:CN202010576529.3
申请日:2020-06-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及一种靶向敲除RPSA基因的sgRNA及RPSA基因敲除细胞系的构建方法。本发明设计了一种特异性靶向RPSA基因的sgRNA;所述的sgRNA能够特异性靶向RPSA基因,应用CRISPR‑Cas9技术实现了对宿主细胞中RPSA基因的完全敲除,敲除效率高;本发明还提供了一种通过CRISPR‑Cas9技术将所述sgRNA转染于宿主细胞,构建RPSA基因敲除细胞系的方法;敲除宿主细胞中RPSA基因不仅能够促进FMDV病毒的复制,可用于提高FMDV疫苗的生产量和抗原表达量;而且还意外的发现,敲除宿主细胞中RPSA基因能够显著抑制塞内卡谷病毒在细胞内的复制;为进一步研究RPSA基因在细胞内调控病原微生物复制的分子机制提供研究工具和材料。
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公开(公告)号:CN108486069B
公开(公告)日:2021-10-26
申请号:CN201810570334.0
申请日:2018-06-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒(PEDV)低含量样品的病毒分离方法,还公开了用于猪流行性腹泻病毒富集和分离的免疫纳米磁珠,该免疫纳米磁珠具有磁性的Fe2O3核心和偶联有PEDV膜蛋白特异性单域抗体的表面。传统方法从多重感染和低PEDV含量样品中分离病毒,需要病毒纯化和长时间盲传,分离效率低,限制了PEDV的研究工作。本发明利用纳米磁珠和PEDV特异性单域抗体制备了免疫纳米磁珠,能够有效捕获和富集粪便、组织等多种样品中的PEDV。样品经处理后利用免疫纳米磁珠进行病毒捕获和富集,将结合病毒的免疫纳米磁珠直接接种到Vero细胞,即可实现对病毒分离。本发明制备的免疫纳米磁珠和PEDV分离方法,适用于临床复杂和低病毒含量样品中PEDV的快速、有效分离。
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公开(公告)号:CN113416768A
公开(公告)日:2021-09-21
申请号:CN202110761133.0
申请日:2021-07-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/6851 , C12N15/113 , C12N15/55 , C12N5/10 , A61K48/00 , A61K31/713 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于生物基因工程技术领域,具体涉及一种PRKRA基因作为靶点在抑制小反刍兽疫病毒复制中的应用。本发明首先发现通过抑制或沉默宿主PRKRA基因,能够抑制小反刍兽疫病毒的复制,可作为靶点用于制备抑制小反刍兽疫病毒复制的药物;其次,以PRKRA基因为靶点,本发明设计了小干扰RNA,所述小干扰RNA能够干扰小反刍兽疫病毒复制,可用于制备抑制小反刍兽疫病毒的复制的药物;并且,本发明提供了一种特异性靶向PRKRA基因的sgRNA,所述的sgRNA能够特异性靶向PRKRA基因,结合CRISPR‑Cas9技术实现了PRKRA基因的完全敲除,获得的单克隆细胞系PRKRA‑KOs对PPRV具有抗性表型,能够显著抑制PPRV在细胞内的复制,为进一步研究PRKRA基因在细胞内调控病原微生物复制的分子机制提供研究工具和材料。
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