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公开(公告)号:CN113151310B
公开(公告)日:2022-02-18
申请号:CN202110176679.X
申请日:2021-02-09
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种可用作疫苗的基因缺失减毒非洲猪瘟病毒株及其构建方法,该病毒株是亲本非洲猪瘟病毒ASFV CN/GS/2018分离株的基因缺失弱毒株。本发明发现了DP71L基因是对猪致病性致弱的新靶标基因,并发现联合丧失MGF360‑18R基因、DP71L基因和DP96R基因编码蛋白的功能,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株;所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株高剂量(104HAD50)免疫猪后,对猪完全致弱,免疫猪健康,不发病,与免疫猪同居猪核酸也呈阴性,不水平传播,具有较好安全性;且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株的攻毒提供100%免疫保护,可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN114015660A
公开(公告)日:2022-02-08
申请号:CN202111334156.X
申请日:2021-11-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 冯涛 , 马昭 , 刘华南 , 李攀 , 石正旺 , 申超超 , 吴盼雪 , 齐晓兰 , 张克山 , 李丹 , 党文 , 杨波 , 王琦 , 曹丽艳 , 朱紫祥 , 田宏 , 郭建宏 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及缺失十个基因的减毒非洲猪瘟病毒株及作为疫苗的应用。本发明在ASFV CN/GS 2018病毒中联合缺失了I177L、MGF 360(9L、10L、11L、12L、13L、14L)、MGF 505(1R、2R、3R)基因,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株;所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪健康,且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒提供100%免疫保护,可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN116286686A
公开(公告)日:2023-06-23
申请号:CN202310299205.3
申请日:2023-03-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种双基因缺失减毒非洲猪瘟病毒株的构建及其作为疫苗的应用。本发明在ASFV CN/GS 2018病毒中联合缺失MGF505‑7R和I267L基因,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株减毒非洲猪瘟疫苗株;所述减毒非洲猪瘟疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪100%存活,且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒提供免疫保护,可作为安全有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN114107228B
公开(公告)日:2023-06-13
申请号:CN202111335696.X
申请日:2021-11-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 冯涛 , 李攀 , 刘华南 , 石正旺 , 马昭 , 申超超 , 齐晓兰 , 吴盼雪 , 张克山 , 李丹 , 党文 , 杨波 , 王琦 , 曹丽艳 , 朱紫祥 , 田宏 , 郭建宏 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种缺失十二个基因的减毒非洲猪瘟病毒株及作为疫苗的应用。本发明在ASFV CN/GS 2018病毒中联合缺失G‑ACD‑00190、MGF 110‑9L、G‑ACD‑00210、MGF 360(9L、10L、11L、12L、13L、14L)、MGF 505(1R、2R、3R)基因,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株减毒非洲猪瘟疫苗株;所述减毒非洲猪瘟疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪健康、免疫后在猪血液内检测不到病毒的存在,且能够对ASFVCN/GS/2018强毒株攻毒提供100%免疫保护,可作为安全有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN114015660B
公开(公告)日:2023-05-05
申请号:CN202111334156.X
申请日:2021-11-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 冯涛 , 马昭 , 刘华南 , 李攀 , 石正旺 , 申超超 , 吴盼雪 , 齐晓兰 , 张克山 , 李丹 , 党文 , 杨波 , 王琦 , 曹丽艳 , 朱紫祥 , 田宏 , 郭建宏 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及缺失十个基因的减毒非洲猪瘟病毒株及作为疫苗的应用。本发明在ASFV CN/GS 2018病毒中联合缺失了I177L、MGF 360(9L、10L、11L、12L、13L、14L)、MGF 505(1R、2R、3R)基因,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株;所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪健康,且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒提供100%免疫保护,可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN113416768B
公开(公告)日:2022-05-17
申请号:CN202110761133.0
申请日:2021-07-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/6851 , C12N15/113 , C12N15/55 , C12N5/10 , A61K48/00 , A61K31/713 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于生物基因工程技术领域,具体涉及一种PRKRA基因作为靶点在抑制小反刍兽疫病毒复制中的应用。本发明首先发现通过抑制或沉默宿主PRKRA基因,能够抑制小反刍兽疫病毒的复制,可作为靶点用于制备抑制小反刍兽疫病毒复制的药物;其次,以PRKRA基因为靶点,本发明设计了小干扰RNA,所述小干扰RNA能够干扰小反刍兽疫病毒复制,可用于制备抑制小反刍兽疫病毒的复制的药物;并且,本发明提供了一种特异性靶向PRKRA基因的sgRNA,所述的sgRNA能够特异性靶向PRKRA基因,结合CRISPR‑Cas9技术实现了PRKRA基因的完全敲除,获得的单克隆细胞系PRKRA‑KOs对PPRV具有抗性表型,能够显著抑制PPRV在细胞内的复制,为进一步研究PRKRA基因在细胞内调控病原微生物复制的分子机制提供研究工具和材料。
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公开(公告)号:CN112057611B
公开(公告)日:2021-04-20
申请号:CN202010932707.1
申请日:2020-09-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及非洲猪瘟病毒E120R蛋白作为免疫抑制剂的应用及免疫抑制位点敲除毒株的构建。本发明首先发现了非洲猪瘟病毒E120R蛋白能够抑制cGAS/STING和poly(dA:dT)诱导的IFN‑β的激活,抑制cGAS/STING和poly(dA:dT)诱导的IFN‑β及其下游因子ISG56和ISG15的mRNA表达,抑制cGAS/STING和poly(dA:dT)诱导的IRF3的磷酸化,具有较强的免疫抑制作用,可作为免疫抑制剂应用;其次本发明发现了非洲猪瘟病毒E120R蛋白的免疫抑制位点,并通过基因工程手段构建获得了E120R蛋白的免疫抑制位点敲除的非洲猪瘟重组病毒,所述非洲猪瘟重组病毒的天然免疫的能力显著增强,可作为重组疫苗株,能够促进早期免疫应答,诱导高水平抗体产生,提高了生物安全性,及免疫保护效力,具备良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN114107228A
公开(公告)日:2022-03-01
申请号:CN202111335696.X
申请日:2021-11-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 冯涛 , 李攀 , 刘华南 , 石正旺 , 马昭 , 申超超 , 齐晓兰 , 吴盼雪 , 张克山 , 李丹 , 党文 , 杨波 , 王琦 , 曹丽艳 , 朱紫祥 , 田宏 , 郭建宏 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种缺失十二个基因的减毒非洲猪瘟病毒株及作为疫苗的应用。本发明在ASFV CN/GS 2018病毒中联合缺失G‑ACD‑00190、MGF 110‑9L、G‑ACD‑00210、MGF 360(9L、10L、11L、12L、13L、14L)、MGF 505(1R、2R、3R)基因,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株减毒非洲猪瘟疫苗株;所述减毒非洲猪瘟疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪健康、免疫后在猪血液内检测不到病毒的存在,且能够对ASFVCN/GS/2018强毒株攻毒提供100%免疫保护,可作为安全有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN113151310A
公开(公告)日:2021-07-23
申请号:CN202110176679.X
申请日:2021-02-09
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种可用作疫苗的基因缺失减毒非洲猪瘟病毒株及其构建方法,该病毒株是亲本非洲猪瘟病毒ASFV CN/GS/2018分离株的基因缺失弱毒株。本发明发现了DP71L基因是对猪致病性致弱的新靶标基因,并发现联合丧失MGF360‑18R基因、DP71L基因和DP96R基因编码蛋白的功能,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株;所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株高剂量(104HAD50)免疫猪后,对猪完全致弱,免疫猪健康,不发病,与免疫猪同居猪核酸也呈阴性,不水平传播,具有较好安全性;且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株的攻毒提供100%免疫保护,可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN112057611A
公开(公告)日:2020-12-11
申请号:CN202010932707.1
申请日:2020-09-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及非洲猪瘟病毒E120R蛋白作为免疫抑制剂的应用及免疫抑制位点敲除毒株的构建。本发明首先发现了非洲猪瘟病毒E120R蛋白能够抑制cGAS/STING和poly(dA:dT)诱导的IFN‑β的激活,抑制cGAS/STING和poly(dA:dT)诱导的IFN‑β及其下游因子ISG56和ISG15的mRNA表达,抑制cGAS/STING和poly(dA:dT)诱导的IRF3的磷酸化,具有较强的免疫抑制作用,可作为免疫抑制剂应用;其次本发明发现了非洲猪瘟病毒E120R蛋白的免疫抑制位点,并通过基因工程手段构建获得了E120R蛋白的免疫抑制位点敲除的非洲猪瘟重组病毒,所述非洲猪瘟重组病毒的天然免疫的能力显著增强,可作为重组疫苗株,能够促进早期免疫应答,诱导高水平抗体产生,提高了生物安全性,及免疫保护效力,具备良好的应用前景。
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