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公开(公告)号:CN113215109B
公开(公告)日:2022-02-18
申请号:CN202110450549.0
申请日:2021-04-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 李丹 , 党文 , 张克山 , 刘华南 , 申超超 , 冯涛 , 李攀 , 齐晓兰 , 张敬 , 刘迎琦 , 田宏 , 茹毅 , 杨帆 , 曹伟军 , 何继军 , 刘志杰 , 张伟 , 郭建宏 , 殷宏 , 孙研 , 刘湘涛
IPC: C12N7/00 , C12N15/34 , A61K39/187 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种免疫抑制基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒及疫苗。本发明首先发现了ASFV MGF‑110‑9L基因和ASFV MGF‑505‑7R基因具有较强的免疫抑制效果,在非洲猪瘟病毒上敲除上述基因能够减弱非洲猪瘟病毒的毒力,是制备减毒猪瘟疫苗的新靶标基因;采用基因工程手段在非洲猪瘟亲本毒株ASFV CN/GS/2018中联合缺失ASFV G‑ACD‑00190基因、ASFV MGF‑110‑9L基因、ASFV G‑ACD‑00210基因和ASFV MGF‑505‑7R基因编码蛋白的功能,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株;所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪健康,且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒(100HAD50剂量)提供100%免疫保护,可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN113151310B
公开(公告)日:2022-02-18
申请号:CN202110176679.X
申请日:2021-02-09
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种可用作疫苗的基因缺失减毒非洲猪瘟病毒株及其构建方法,该病毒株是亲本非洲猪瘟病毒ASFV CN/GS/2018分离株的基因缺失弱毒株。本发明发现了DP71L基因是对猪致病性致弱的新靶标基因,并发现联合丧失MGF360‑18R基因、DP71L基因和DP96R基因编码蛋白的功能,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株;所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株高剂量(104HAD50)免疫猪后,对猪完全致弱,免疫猪健康,不发病,与免疫猪同居猪核酸也呈阴性,不水平传播,具有较好安全性;且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株的攻毒提供100%免疫保护,可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN114015660A
公开(公告)日:2022-02-08
申请号:CN202111334156.X
申请日:2021-11-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 冯涛 , 马昭 , 刘华南 , 李攀 , 石正旺 , 申超超 , 吴盼雪 , 齐晓兰 , 张克山 , 李丹 , 党文 , 杨波 , 王琦 , 曹丽艳 , 朱紫祥 , 田宏 , 郭建宏 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及缺失十个基因的减毒非洲猪瘟病毒株及作为疫苗的应用。本发明在ASFV CN/GS 2018病毒中联合缺失了I177L、MGF 360(9L、10L、11L、12L、13L、14L)、MGF 505(1R、2R、3R)基因,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株;所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪健康,且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒提供100%免疫保护,可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN113215109A
公开(公告)日:2021-08-06
申请号:CN202110450549.0
申请日:2021-04-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 李丹 , 党文 , 张克山 , 刘华南 , 申超超 , 冯涛 , 李攀 , 齐晓兰 , 张敬 , 刘迎琦 , 田宏 , 茹毅 , 杨帆 , 曹伟军 , 何继军 , 刘志杰 , 张伟 , 郭建宏 , 殷宏 , 孙研 , 刘湘涛
IPC: C12N7/00 , C12N15/34 , A61K39/187 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种免疫抑制基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒及疫苗。本发明首先发现了ASFV MGF‑110‑9L基因和ASFV MGF‑505‑7R基因具有较强的免疫抑制效果,在非洲猪瘟病毒上敲除上述基因能够减弱非洲猪瘟病毒的毒力,是制备减毒猪瘟疫苗的新靶标基因;采用基因工程手段在非洲猪瘟亲本毒株ASFV CN/GS/2018中联合缺失ASFV G‑ACD‑00190基因、ASFV MGF‑110‑9L基因、ASFV G‑ACD‑00210基因和ASFV MGF‑505‑7R基因编码蛋白的功能,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株;所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪健康,且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒(100HAD50剂量)提供100%免疫保护,可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN113151354A
公开(公告)日:2021-07-23
申请号:CN202110300094.4
申请日:2021-03-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种用于在病毒或细胞基因组上条件性敲除目的基因的条件性敲除片段、质粒及条件性敲除目的基因的方法,所述条件性敲除片段包括目的基因左同源重组臂LA、筛选标记物基因表达元件、lac阻遏子基因表达元件、lac操纵子基因表达元件、目的基因右同源重组臂RA;同时构建了含有所述条件性敲除片段的质粒;并提供了一种运用上述质粒进行目的基因条件性敲除的方法。相对于现有技术,本发明仅通过一个条件敲除片段或含有条件敲除的质粒就实现了目的基因的条件性敲除,具有操作流程简单,敲除效率高,筛选过程便捷等优势。
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公开(公告)号:CN112063634A
公开(公告)日:2020-12-11
申请号:CN202010368676.1
申请日:2020-05-01
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种天然免疫抑制基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒株及应用。本发明发现ASFV MGF‑505‑7R能够抑制干扰素的产生;在非洲猪瘟原始毒株中缺失ASFV MGF‑505‑7R基因,获得了一株安全性较好的减毒非洲猪瘟病毒株,为未来成功制备非洲猪瘟疫苗提供了理论依据和实践参考。更进一步,研究人员可以通过同时敲除ASFV MGF‑505‑7R及已公开的一种或几种毒力基因(例如CD2V、MGF360‑12L、MGF360‑13L、MGF360‑14L、MGF360‑505R等),最终制备出安全有效的非洲猪瘟疫苗候选株。
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公开(公告)号:CN112063592A
公开(公告)日:2020-12-11
申请号:CN202010662107.8
申请日:2020-07-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 李丹 , 党文 , 张克山 , 刘华南 , 申超超 , 冯涛 , 李攀 , 齐晓兰 , 张敬 , 刘迎琦 , 田宏 , 茹毅 , 杨帆 , 曹伟军 , 何继军 , 刘志杰 , 张伟 , 郭建宏 , 殷宏 , 孙研 , 刘湘涛
IPC: C12N7/00 , C12N15/34 , A61K39/187 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种免疫抑制基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒及疫苗。本发明首先发现了ASFV MGF‑110‑9L基因和ASFV MGF‑505‑7R基因具有较强的免疫抑制效果,在非洲猪瘟病毒上敲除上述基因能够减弱非洲猪瘟病毒的毒力,是制备减毒猪瘟疫苗的新靶标基因;采用基因工程手段在非洲猪瘟亲本毒株ASFV CN/GS/2018中联合缺失ASFV G‑ACD‑00190基因、ASFV MGF‑110‑9L基因、ASFV G‑ACD‑00210基因和ASFV MGF‑505‑7R基因编码蛋白的功能,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株;所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪健康,且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒(100HAD50剂量)提供100%免疫保护,可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN111748563A
公开(公告)日:2020-10-09
申请号:CN202010661680.7
申请日:2020-07-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种可用作疫苗的基因缺失减毒非洲猪瘟病毒株及其构建方法,该病毒株是亲本非洲猪瘟病毒ASFV CN/GS/2018分离株的基因缺失弱毒株。本发明发现了DP71L基因是对猪致病性致弱的新靶标基因,并发现联合丧失MGF360-18R基因、DP71L基因和DP96R基因编码蛋白的功能,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株;所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株高剂量(104HAD50)免疫猪后,对猪完全致弱,免疫猪健康,不发病,与免疫猪同居猪核酸也呈阴性,不水平传播,具有较好安全性;且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株的攻毒提供100%免疫保护,可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN116286686A
公开(公告)日:2023-06-23
申请号:CN202310299205.3
申请日:2023-03-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种双基因缺失减毒非洲猪瘟病毒株的构建及其作为疫苗的应用。本发明在ASFV CN/GS 2018病毒中联合缺失MGF505‑7R和I267L基因,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株减毒非洲猪瘟疫苗株;所述减毒非洲猪瘟疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪100%存活,且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒提供免疫保护,可作为安全有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN114107228B
公开(公告)日:2023-06-13
申请号:CN202111335696.X
申请日:2021-11-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 冯涛 , 李攀 , 刘华南 , 石正旺 , 马昭 , 申超超 , 齐晓兰 , 吴盼雪 , 张克山 , 李丹 , 党文 , 杨波 , 王琦 , 曹丽艳 , 朱紫祥 , 田宏 , 郭建宏 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种缺失十二个基因的减毒非洲猪瘟病毒株及作为疫苗的应用。本发明在ASFV CN/GS 2018病毒中联合缺失G‑ACD‑00190、MGF 110‑9L、G‑ACD‑00210、MGF 360(9L、10L、11L、12L、13L、14L)、MGF 505(1R、2R、3R)基因,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株减毒非洲猪瘟疫苗株;所述减毒非洲猪瘟疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪健康、免疫后在猪血液内检测不到病毒的存在,且能够对ASFVCN/GS/2018强毒株攻毒提供100%免疫保护,可作为安全有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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