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公开(公告)号:CN119530233A
公开(公告)日:2025-02-28
申请号:CN202411725369.9
申请日:2024-11-28
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12N15/115 , C12N15/10 , G01N33/569 , G01N33/68 , C07K14/01 , C12N7/02 , A61K31/7088 , A61K47/54 , A61P31/20 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种特异性结合非洲猪瘟病毒A104R蛋白的核酸适配体及其应用。本发明利用指数富集的配体系统进化技术(SELEX),以非洲猪瘟病毒A104R蛋白为靶标,从随机核酸文库中筛选获得能够结合A104R蛋白的6条核酸适配体,所述核酸适配体的序列如SEQ ID No.1‑6所示。本发明所述的核酸适配体与非洲猪瘟病毒蛋白A104R具有较好的亲和力和反应性,且与p30蛋白没有交叉反应,具有良好的特异性,可用于非洲猪瘟病毒或A104R蛋白的检测和分析。
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公开(公告)号:CN117866910B
公开(公告)日:2025-02-14
申请号:CN202410231627.1
申请日:2024-03-01
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及一株用绿色荧光蛋白标记NS1蛋白的重组蓝舌病毒。本发明通过在野生型蓝舌病毒非结构蛋白NS1的156位和157位氨基酸之间插入增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein,eGFP)序列,构建获得了NS1重组突变蓝舌病毒BTV‑1S6‑156eGFP;所述重组蓝舌病毒与野生型蓝舌病毒相比,重组的NS1蛋白能够正确表达增强型绿色荧光蛋白,但不再形成病毒样微管结构,可用于BTV感染细胞后NS1蛋白未形成病毒样微管结构的相关研究,同时可用于BTV的病毒中和实验及病毒含量的可视化定量检测等。
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公开(公告)号:CN119039428A
公开(公告)日:2024-11-29
申请号:CN202411156911.3
申请日:2024-08-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于体外诊断技术领域,具体涉及一种抗非洲马瘟病毒VP7蛋白的鼠源重组抗体及其制备方法。本发明利用杂交瘤细胞技术筛选得到的针对非洲马瘟病毒VP7蛋白的杂交瘤细胞株2B8,将所述杂交瘤细胞株2B8用Trizol裂解后提取总RNA,利用巢式PCR方法扩增得到重链及轻链可变区序列;并将所述重链及轻链可变区序列构建到含有鼠源恒定区的载体上,成功表达获得了抗非洲马瘟病毒VP7蛋白的重组抗体;所述重组抗体能够识别大肠杆菌表达的重组VP7蛋白,且与在BHK21细胞内表达的重组VP7蛋白发生特异性反应;可利用该重组抗体建立非洲马瘟病毒竞争ELISA抗体检测方法,为有效防控非洲马瘟传入我国提供了技术基础。
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公开(公告)号:CN119039427A
公开(公告)日:2024-11-29
申请号:CN202411099375.8
申请日:2024-08-12
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一株绵羊抗蓝舌病毒的重组单个B细胞抗体。本发明利用流式单细胞分选技术在蓝舌病毒灭活疫苗免疫的绵羊外周血淋巴细胞中获得一株抗蓝舌病毒的单个B细胞抗体,通过RT‑PCR扩增获得该株抗体的轻重链可变区序列,与含有绵羊IgG抗体恒定区的表达载体构建出该抗体的两个重组轻重链表达质粒,转染293F细胞后成功表达出绵羊抗蓝舌病毒的重组单个B细胞抗体;所述单个B细胞抗体在ELISA、细胞免疫荧光实验中均能够与蓝舌病毒发生特异性反应。该发明避免了传统杂交瘤抗体制备技术中会遇到的抗体异源性、细胞凋亡和遗传不稳定的难题,为建立更加准确、灵敏的蓝舌病检测方法奠定了基础。
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公开(公告)号:CN118620070A
公开(公告)日:2024-09-10
申请号:CN202410831819.6
申请日:2024-06-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种靶向非洲猪瘟病毒的纳米抗体及其制备方法和应用。本发明提供了一种靶向非洲猪瘟病毒的纳米抗体KR‑26,所述纳米抗体KR‑26是通过噬菌体展示纳米抗体文库的构建和筛选获得,为重链抗体可变区片段,具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。本发明所述纳米抗体与非洲猪瘟病毒具有较高的亲和力,能够特异性识别和结合非洲猪瘟病毒,可用于非洲猪瘟的诊断、预防或治疗。
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公开(公告)号:CN118516496A
公开(公告)日:2024-08-20
申请号:CN202410430192.3
申请日:2024-04-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于生物医药领域,具体涉及一种分子信标荧光定量PCR检测非洲猪瘟病毒方法。本发明根据非洲猪瘟病毒(ASFV)的B646L基因的保守特异性区域,设计了特异性的引物和分子信标探针,结合实时荧光定量PCR的方法进行非洲猪瘟病毒B646L基因的检测。该方法特异性强、重复性好、灵敏度高,临床样品检测与国家标准qPCR检测方法结果一致,显示最低检出量为2.945×100copies·μL‑1,为非洲猪瘟病毒检测增添了一种假阳性率低且快速有效的方法。
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公开(公告)号:CN118222459A
公开(公告)日:2024-06-21
申请号:CN202410557351.6
申请日:2024-05-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12N1/20 , A61K35/747 , A61P1/00 , A61P1/04 , A61P31/04 , A23L33/135 , C12R1/25
Abstract: 本发明属于微生物技术领域,具体涉及一株具有高效抑菌和抗炎作用的植物乳杆菌及其应用。本发明提供了一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)F1m,所述植物乳杆菌F1m保藏编号为CGMCC NO.29344。该菌株从青海省传统发酵的牦牛酸奶中分离得到,对酸和胆盐环境有较好的耐受能力,对上皮细胞Caco‑2具有较高的黏附性,可显著抑制金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和大肠杆菌等常见病原菌的生长。植物乳杆菌F1m灌胃结肠炎小鼠可以显著改善DSS诱导的结肠炎症状,降低炎症反应并修复损伤的肠道屏障。该菌株的开发不仅挖掘了牦牛酸奶中的优质种质资源,还为人和动物的健康提供了一定的保障。
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公开(公告)号:CN116769021A
公开(公告)日:2023-09-19
申请号:CN202310969810.7
申请日:2023-08-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于免疫学和体外诊断技术领域,具体涉及一种针对非洲马瘟病毒VP7蛋白的单克隆抗体及制备方法。本发明通过将重组表达的非洲马瘟病毒VP7蛋白免疫BALB/c小鼠,筛选获得一种针对非洲马瘟病毒VP7蛋白的单克隆抗体,并通过反转录PCR技术成功获得了编码该株抗体重链及轻链可变区的核苷酸序列。所述单克隆抗体与重组表达的VP7蛋白具有良好的亲和反应能力。利用该单克隆抗体建立了非洲马瘟病毒竞争ELISA抗体检测方法,为有效防控非洲马瘟传入我国提供了技术基础。
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公开(公告)号:CN116375849A
公开(公告)日:2023-07-04
申请号:CN202310296789.9
申请日:2023-03-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/08 , G01N21/76 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明提供了一种基于p30蛋白单域抗体的非洲猪瘟病毒管式化学发光免疫分析检测试剂盒及其应用,属于体外诊断产品技术领域。本发明提供的试剂盒包括磁微粒混悬液、酶标抗体、稀释液、校准品、质控品、浓缩洗涤液和发光底物。本发明所述试剂盒使用双抗体夹心法检测猪全血、血清、组织处理液中非洲猪瘟病毒抗原含量,配套全自动化学发光免疫分析仪,能实现全自动化、快速、高通量、封闭检测等特点,适合田间大量样本中非洲猪瘟病毒的筛查。
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公开(公告)号:CN113087790B
公开(公告)日:2023-01-17
申请号:CN202110561435.3
申请日:2021-05-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物医学或生物制药技术领域,具体涉及一种抗非洲猪瘟P72蛋白单域抗体及应用。首先,本发明提供了一种抗非洲猪瘟P72蛋白单域抗体,所述单域抗体能够与天然抗原很好的反应,且能够显著抑制非洲猪瘟病毒P72蛋白的表达,进而实现对非洲猪瘟病毒的复制的抑制,具有显著的抗非洲猪瘟病毒的功效;其次,本发明提供了一种表达所述抗非洲猪瘟P72蛋白单域抗体的重组载体,所述重组载体经诱导纯化后能够获得抗非洲猪瘟P72蛋白单域抗体。
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