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公开(公告)号:CN116589538B
公开(公告)日:2023-12-05
申请号:CN202310373357.3
申请日:2023-04-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 朱紫祥 , 毛箬青 , 郝荣增 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
IPC: C07K14/01 , C07K19/00 , A61K39/12 , A61K39/295 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合,所述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合能够产生较强的免疫反应;其次本发明制备了包含上述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合的七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗,所述七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险,突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题,证明了非洲猪瘟亚单位疫苗研究方案的可行性。
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公开(公告)号:CN116672443A8
公开(公告)日:2023-09-29
申请号:CN202310647769.1
申请日:2023-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 郝荣增 , 朱紫祥 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 毛箬青 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
IPC: A61K39/12 , A61K39/385 , A61K9/14 , A61K47/34 , A61K47/32 , A61K47/36 , A61K47/10 , A61K47/42 , A61K47/02 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟组合疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒抗原P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合,其中至少一种抗原与纳米颗粒载体形成含有所述抗原或其抗原表位的纳米颗粒;所述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合能够刺激机体产生较强的免疫反应;其次本发明制备了包含上述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合的疫苗,所述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险,突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题。
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公开(公告)号:CN116785419A
公开(公告)日:2023-09-22
申请号:CN202310607714.8
申请日:2023-05-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 朱紫祥 , 毛箬青 , 郝荣增 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物技术领域。首先提供了一种由非洲猪瘟病毒P34、P30、P54、A104R、E165R、C129R、P72、X、Y、P8、P15、K205R、K78R、MGF 110‑5L‑6L、L60L、MGF 110‑4L、MGF 110‑7L、I215L、P14、P35、E248R、A238L、EP153R蛋白组成的抗原蛋白组合,所述抗原蛋白组合能够诱导机体产生较强的免疫反应;其次本发明制备了包含上述抗原蛋白组合的二十三组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗,所述亚单位疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险,突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题。
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公开(公告)号:CN114853912B
公开(公告)日:2023-06-13
申请号:CN202210571495.8
申请日:2022-05-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种牛病毒性腹泻病毒E2‑E0融合蛋白、制备方法及应用。本发明首先提供了一种将牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白与牛病毒性腹泻病毒E2蛋白融合,不仅能够促进E0蛋白的表达,而且不影响E0蛋白的免疫原性,可用于牛病毒性腹泻亚单位疫苗的制备;在上述牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白的基础上,本发明发现,将牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白的160‑162位氨基酸由IAA突变为GGG,能够使E2‑E0融合蛋白的表达量进一步提升18%以上,且不影响其免疫原性。
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公开(公告)号:CN114316035B
公开(公告)日:2023-05-26
申请号:CN202210010319.7
申请日:2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 杨洋 , 秦晓东 , 茹毅 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种通用型的口蹄疫病毒结构蛋白抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒146s为免疫原,免疫Balb/c小鼠,经细胞融合,筛选获得两株高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系,并获得了两种鼠单克隆抗体m33和m77。免疫印迹和间接免疫荧光试验表明所述单克隆抗体m33和m77对O型不同谱系病毒和A型谱系不同病毒均具有广谱反应性。m33和m77抗体特异性结合在FMDV结构蛋白中的型间保守抗原表位,相较于现有抗体,显著提高了检测结果的灵敏度和特异性,适用于O型和A型FMDV感染或灭活疫苗免疫后结构蛋白抗体的检测,是一种FMD非免疫动物群体感染状况监测的新方法。
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公开(公告)号:CN114316037A
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN202210011223.2
申请日:2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 杨洋 , 秦晓东 , 茹毅 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种O型口蹄疫病毒结构蛋白的抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒146s作为免疫原,免疫Balb/c小鼠,经细胞融合,获得一株高效分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系,并获得了一种鼠单克隆抗体m19。间接免疫荧光试验表明所述单克隆抗体m19对O型不同谱系毒株均具有很好的反应性,而不和A型不同谱系毒株反应。利用单克隆抗体m19和O型结构蛋白兔抗血清建立了O型口蹄疫病毒结构蛋白固相竞争ELISA检测试剂盒,相较于现有抗体,显著提高了检测结果的灵敏度和特异性,适用于O型口蹄疫感染或灭活疫苗免疫后结构蛋白抗体的检测,同时,也是一种监测口蹄疫非免疫地区感染情况的新方法。
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公开(公告)号:CN113509489A
公开(公告)日:2021-10-19
申请号:CN202110442796.6
申请日:2021-04-23
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K33/04 , A61P31/20 , A61K31/195
Abstract: 本发明属于非洲猪瘟治疗技术领域,具体涉及亚硒酸钠(Na2SeO3)或含有亚硒酸钠的组合物用于预防或治疗非洲猪瘟的新用途。本发明首先发现,亚硒酸钠能够抑制非洲猪瘟病毒蛋白p72的表达,抑制非洲猪瘟病毒基因拷贝数和病毒滴度,能够抑制ASFV的复制和感染,用于预防或治疗非洲猪瘟;同时,本发明发现,亚硒酸钠和EGTA的组合物能够显著抑制非洲猪瘟病毒蛋白p72的表达,抑制ASFV的复制和感染;并且所述组合物对ASFV的抑制效果显著优于单独使用亚硒酸钠和EGTA,可用于预防或治疗非洲猪瘟。
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公开(公告)号:CN105603123B
公开(公告)日:2020-01-31
申请号:CN201610049300.8
申请日:2016-01-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种快速检测猪细小病毒(PPV)的实时荧光RPA(PPV real‑time RPA)试剂盒及其用途,还公开了一种快速检测PPV的试纸条RPA(LFS RPA)试剂盒及其用途。该两种试剂盒分别包括SEQ ID NO.1及2所示的引物及各自的探针,虽然针对同一靶标序列,但引物和探针的修饰碱基和检测平台不同。实验证明本发明的两个试剂盒的敏感性均为102拷贝/反应,并均只能特异性检测PPV。分别用本发明的两个试剂盒检测PPV疑似样品,结果表明这两个试剂盒的检测结果与qPCR均具有很高的符合度。因此,本发明的两个试剂盒均能快捷、高效、灵敏的检测PPV,为PPV的鉴别诊断提供了有效技术手段。
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公开(公告)号:CN110724690A
公开(公告)日:2020-01-24
申请号:CN201910825712.X
申请日:2019-09-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/12 , C12N15/70 , C07K14/705 , C07K1/22
Abstract: 本发明公开了一种山羊SLAM基因的克隆与原核表达方法,具体涉及小反刍兽疫病毒(PPRV)检测技术领域,具体方法如下:S1、获得山羊SLAM基因和氨基酸序列,设计特异性引物,通过RT-PCR方法获得SLAM基因片段;S2、将扩增的SLAM基因片段克隆到PET SUMO载体中,构建阳性重组质粒PET SUMO-SLAM;S3、将阳性重组质粒PET SUMO-SLAM转化到感受态Rosetta细胞中;S4、将转化的细胞在LB培养基平板中培养;S5、将含有构建的质粒的新转化的大肠杆菌的单菌落在LB液体培养基中培养;S6、IPTG诱导融合蛋白的表达,然后通过SDS PAGE分析。本发明为PPRV抗原检测提供一种捕获蛋白,用于开发PPRV抗原检测试剂盒,从而用于检测PPRV病毒,使得检测方法具有更好的特异性和灵敏性。
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公开(公告)号:CN110499331A
公开(公告)日:2019-11-26
申请号:CN201910735113.9
申请日:2019-08-09
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/867 , C12N15/66 , C12N15/54
Abstract: 本发明公开了外源性人端粒酶反转录酶基因重组慢病毒颗粒的获得方法,具体涉及生物技术领域,包括以下步骤:S1、准备材料和试剂;S2、构建pLVX-puro-hTERT重组慢病毒载体;S3、表达hTERT基因重组慢病毒颗粒的获得。本发明通过携带有外源基因的慢病毒载体在慢病毒包装质粒、细胞系的辅助下,经过病毒包装成为有感染力的病毒颗粒,慢病毒载体能够将目的基因高效整合于宿主基因组,从而实现外源基因长期、稳定的表达,整个慢病毒颗粒获取操作方便,获取的慢病毒颗粒对于后期的感染细胞,使正常体细胞永生化得到保证,可获得稳定增殖的永生化细胞系,并且侵染效率高,稳定性较好。
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