公开(公告)号：CN110724690A

公开(公告)日：2020-01-24

申请号：CN201910825712.X

申请日：2019-09-03

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 李彦敏 ,  普拉贾帕蒂·米拉 ,  窦永喜 ,  朱学亮 ,  张志东 ,  赵帅阳 ,  秦晓东

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/70 ,  C07K14/705 ,  C07K1/22

Abstract: 本发明公开了一种山羊SLAM基因的克隆与原核表达方法，具体涉及小反刍兽疫病毒(PPRV)检测技术领域，具体方法如下：S1、获得山羊SLAM基因和氨基酸序列，设计特异性引物，通过RT-PCR方法获得SLAM基因片段；S2、将扩增的SLAM基因片段克隆到PET SUMO载体中，构建阳性重组质粒PET SUMO-SLAM；S3、将阳性重组质粒PET SUMO-SLAM转化到感受态Rosetta细胞中；S4、将转化的细胞在LB培养基平板中培养；S5、将含有构建的质粒的新转化的大肠杆菌的单菌落在LB液体培养基中培养；S6、IPTG诱导融合蛋白的表达，然后通过SDS PAGE分析。本发明为PPRV抗原检测提供一种捕获蛋白，用于开发PPRV抗原检测试剂盒，从而用于检测PPRV病毒，使得检测方法具有更好的特异性和灵敏性。