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公开(公告)号:CN114924069B
公开(公告)日:2025-04-08
申请号:CN202210524481.0
申请日:2022-05-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , C12Q1/6804 , C12Q1/70 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于单域抗体9‑4‑2免疫磁珠的直扩检测山羊痘病毒的试剂盒及其应用。所述试剂盒包括SEQIDNO.1所示的山羊痘病毒单域抗体9‑4‑2通过链霉亲和素‑生物素与磁珠进行偶联得到的单域抗体9‑4‑2免疫磁珠。本发明使用切胶纯化的单域抗体9‑4‑2蛋白与磁珠进行偶联获得免疫磁珠,免疫磁珠富集山羊痘病毒后,无需提取基因组RNA,可直接对其进行扩增。本发明的提出克服了山羊痘病毒由于形成夹皮时间久,不容易在病毒复制高峰期发现,采集病料病毒含量低微,所以检出率低,容易漏检等现象;以及提取基因组DNA时费时、费财、费力,操作时污染环境等一系列难题,而且高效、灵敏、特异、稳定、实用,本发明的提出为山羊痘病毒病的检测提供了一种高效的技术手段。
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公开(公告)号:CN118852447B
公开(公告)日:2025-03-21
申请号:CN202410996016.6
申请日:2024-07-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种鼠源抗猪IgA的单链抗体及应用,所述的单链抗体包括重链可变区和轻链可变区,所述的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,所述的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示,将鼠源抗体可变区的基因序列与所制备的单链抗体的基因序列进行了比对分析,结果表明所述的单链抗体的基因序列与鼠源抗体可变区的基因序列基本一致,证明所构建的抗体基因序列是正确的,所述的单链抗体填补了目前市场上抗猪源IgA单链抗体的空白,为猪源IgA抗体的早期诊断与防控提供新的材料,为尽快控制猪腹泻疾病的疫情传播提供了新的技术支持。
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公开(公告)号:CN118852447A
公开(公告)日:2024-10-29
申请号:CN202410996016.6
申请日:2024-07-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种鼠源抗猪IgA的单链抗体及应用,所述的单链抗体包括重链可变区和轻链可变区,所述的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,所述的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示,将鼠源抗体可变区的基因序列与所制备的单链抗体的基因序列进行了比对分析,结果表明所述的单链抗体的基因序列与鼠源抗体可变区的基因序列基本一致,证明所构建的抗体基因序列是正确的,所述的单链抗体填补了目前市场上抗猪源IgA单链抗体的空白,为猪源IgA抗体的早期诊断与防控提供新的材料,为尽快控制猪腹泻疾病的疫情传播提供了新的技术支持。
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公开(公告)号:CN117964745A
公开(公告)日:2024-05-03
申请号:CN202410170825.1
申请日:2024-02-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N33/535
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种抗猪圆环病毒2型Cap蛋白的特异性单克隆抗体及应用,单克隆抗体重链可变区的CDR包括氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的CDR1、氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的CDR2和氨基酸序列如SEQ ID No.3所示的CDR3;单克隆抗体轻链可变区CDR包括氨基酸序列如SEQ ID No.4所示的CDR1、氨基酸序列如SEQ ID No.5所示的CDR2和氨基酸序列如SEQ ID No.6所示的CDR3;并建立了蛋白含量测定的夹心ELISA方法,具有操作简单,灵敏性好、特异性高、应用广泛,可以高通量测定多个样品,检测多种类型PCV2疫苗有效抗原Cap蛋白含量,缩短疫苗检验时间。
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公开(公告)号:CN116589538B
公开(公告)日:2023-12-05
申请号:CN202310373357.3
申请日:2023-04-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 朱紫祥 , 毛箬青 , 郝荣增 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
IPC: C07K14/01 , C07K19/00 , A61K39/12 , A61K39/295 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合,所述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合能够产生较强的免疫反应;其次本发明制备了包含上述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合的七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗,所述七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险,突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题,证明了非洲猪瘟亚单位疫苗研究方案的可行性。
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公开(公告)号:CN115948466B
公开(公告)日:2023-11-14
申请号:CN202310019982.8
申请日:2023-01-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/85 , C12N7/00 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12N15/113 , C12N5/10 , C12N15/12 , C12R1/93 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及Tollip敲除细胞系的构建及作为小RNA病毒科病毒疫苗生产细胞系的应用。本发明首先发现,抑制宿主细胞中Tollip基因表达能促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制;其次,本发明提供了一种特异性靶向Tollip的sgRNA,所述sgRNA能够特异性靶向Tollip基因,结合CRISPR‑Cas9技术实现了Tollip基因的敲除,获得的单克隆细胞系能够显著促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制,提高FMDV疫苗的生产量和抗原表达量,可作为小核糖核酸病毒科病毒疫苗尤其是FMDV疫苗的生产细胞系,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN116672443A8
公开(公告)日:2023-09-29
申请号:CN202310647769.1
申请日:2023-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 郝荣增 , 朱紫祥 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 毛箬青 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
IPC: A61K39/12 , A61K39/385 , A61K9/14 , A61K47/34 , A61K47/32 , A61K47/36 , A61K47/10 , A61K47/42 , A61K47/02 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟组合疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒抗原P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合,其中至少一种抗原与纳米颗粒载体形成含有所述抗原或其抗原表位的纳米颗粒;所述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合能够刺激机体产生较强的免疫反应;其次本发明制备了包含上述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合的疫苗,所述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险,突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题。
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公开(公告)号:CN116785419A
公开(公告)日:2023-09-22
申请号:CN202310607714.8
申请日:2023-05-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 朱紫祥 , 毛箬青 , 郝荣增 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物技术领域。首先提供了一种由非洲猪瘟病毒P34、P30、P54、A104R、E165R、C129R、P72、X、Y、P8、P15、K205R、K78R、MGF 110‑5L‑6L、L60L、MGF 110‑4L、MGF 110‑7L、I215L、P14、P35、E248R、A238L、EP153R蛋白组成的抗原蛋白组合,所述抗原蛋白组合能够诱导机体产生较强的免疫反应;其次本发明制备了包含上述抗原蛋白组合的二十三组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗,所述亚单位疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险,突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题。
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公开(公告)号:CN114807062B
公开(公告)日:2023-09-05
申请号:CN202210240926.2
申请日:2022-03-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种非洲猪瘟病毒I73R基因条件性缺失毒株的构建及其作为疫苗的应用。本发明在基因Ⅱ型非洲猪瘟(African swine fever,ASF)亲本毒株ASFV CN/GS/2018中条件性敲除I73R基因构建了ASFV I73R基因条件性缺失毒株(vI73Ri);所述vI73Ri是一株安全性高的减毒ASF候选疫苗株,对猪完全致弱、免疫猪无典型ASF临床症状、免疫后在猪血液内检测到非常低的病毒,且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒提供100%免疫保护,可作为安全和有效的防控ASF疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN116444652B
公开(公告)日:2023-08-29
申请号:CN202310039309.0
申请日:2023-01-12
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种抗非洲猪瘟病毒特异性单链抗体的制备方法。包括以下步骤:S1:提取猪淋巴细胞总RNA并合成cDNA,并以所述cDNA为模板,扩增组装ScFv的基因Vκ/Vλ‑linker‑VH;S2:通过同源重组反应将ScFv的基因插入到噬菌粒中,转化感受态细胞,培养、分离纯化噬菌体,获得VH‑Vκ与VH‑Vλ免疫库;S3:筛选免疫库中的特异性抗体,获得目标ScFv;S4:对S3筛选到的目标ScFv进行ELISA鉴定,获得噬菌体阳性单克隆;S5:对S4的噬菌体阳性单克隆进行表达、验证。本发明通过构建噬菌体抗体库,筛选出了具有生物活性强、结合抗原能力强的抗ASFV单链抗体。
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