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公开(公告)号：CN114924069A
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN202210524481.0
申请日：2022-05-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , C12Q1/6804 , C12Q1/70 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于单域抗体9‑4‑2免疫磁珠的直扩检测山羊痘病毒的试剂盒及其应用。所述试剂盒包括SEQIDNO.1所示的山羊痘病毒单域抗体9‑4‑2通过链霉亲和素‑生物素与磁珠进行偶联得到的单域抗体9‑4‑2免疫磁珠。本发明使用切胶纯化的单域抗体9‑4‑2蛋白与磁珠进行偶联获得免疫磁珠，免疫磁珠富集山羊痘病毒后，无需提取基因组RNA，可直接对其进行扩增。本发明的提出克服了山羊痘病毒由于形成夹皮时间久，不容易在病毒复制高峰期发现，采集病料病毒含量低微，所以检出率低，容易漏检等现象；以及提取基因组DNA时费时、费财、费力，操作时污染环境等一系列难题，而且高效、灵敏、特异、稳定、实用，本发明的提出为山羊痘病毒病的检测提供了一种高效的技术手段。
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公开(公告)号：CN114924069B
公开(公告)日：2025-04-08
申请号：CN202210524481.0
申请日：2022-05-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , C12Q1/6804 , C12Q1/70 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于单域抗体9‑4‑2免疫磁珠的直扩检测山羊痘病毒的试剂盒及其应用。所述试剂盒包括SEQIDNO.1所示的山羊痘病毒单域抗体9‑4‑2通过链霉亲和素‑生物素与磁珠进行偶联得到的单域抗体9‑4‑2免疫磁珠。本发明使用切胶纯化的单域抗体9‑4‑2蛋白与磁珠进行偶联获得免疫磁珠，免疫磁珠富集山羊痘病毒后，无需提取基因组RNA，可直接对其进行扩增。本发明的提出克服了山羊痘病毒由于形成夹皮时间久，不容易在病毒复制高峰期发现，采集病料病毒含量低微，所以检出率低，容易漏检等现象；以及提取基因组DNA时费时、费财、费力，操作时污染环境等一系列难题，而且高效、灵敏、特异、稳定、实用，本发明的提出为山羊痘病毒病的检测提供了一种高效的技术手段。
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公开(公告)号：CN116840475A
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202310784386.9
申请日：2023-06-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/535
Abstract: 本发明涉及夹心阻断ELISA试剂在制备口蹄疫病毒抗体检测试剂盒中的应用，属于生物技术领域，本发明将阴阳性血清及被检血清直接在已包被捕获抗体的ELISA板上稀释后紧接着加入酶标抗体，最后加入病毒抗原，同时设置病毒抗原对照，被检血清及阴阳性血清中口蹄疫型特异抗体阻断病毒抗原参与酶标单抗与ELISA板上的捕获抗体的双抗夹心ELISA反应的进行，判定参照液相阻断ELISA，以病毒抗原对照孔OD值平均值的50%作为病毒抗原被50%阻断的临界值，成功建立阻断夹心ELISA方法，也称为液相阻断ELISA一步法，可用于定性、定量检测口蹄疫抗体，为口蹄疫疫苗免疫抗体监测、疫苗免疫效果评估等方面提供新的技术支持。
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公开(公告)号：CN116574848A
公开(公告)日：2023-08-11
申请号：CN202310732068.8
申请日：2023-06-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q1/6806 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于LAMP‑CRISPRCas12a检测猪圆环2型病毒的引物及检测方法，包括以下操作步骤：(1)组织样品的处理；(2)病毒DNA的提取；(3)引物设计；(4)PCR产物回收及纯化；(5)标准质粒的构建；(6)重组质粒鉴定；(7)质粒DNA小量抽提；(8)LAMP引物筛选及扩增；(9)猪圆环病毒2型LAMP‑CRISPR‑Cas12a检测体系建立；本发明在CRISPR技术的基础上与LAMP技术相结合，建立了PCV2的快速检测方法，该方法敏感性高、特异性高、操作简单、检测时间短、结果分析简单、抗干扰性强、不需要复杂仪器设备。这种低价、高度敏感和特异性强、便携式和可视化的方法将是现场PCV2检测的替代方法，这可能有助于及时监测和快速制定控制PCV2的策略。
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公开(公告)号：CN114921589A
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN202210524501.4
申请日：2022-05-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6806 , C12Q1/686 , C07K16/08 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于单域抗体9‑4‑1免疫磁珠的直扩检测山羊痘病毒的试剂盒及其应用。所述试剂盒包括SEQ ID NO.1所示的山羊痘病毒单域抗体9‑4‑1通过链霉亲和素‑生物素与磁珠进行偶联得到的单域抗体9‑4‑1免疫磁珠。本发明使用切胶纯化的单域抗体9‑4‑1蛋白与磁珠进行偶联获得免疫磁珠，免疫磁珠富集山羊痘病毒后，无需提取基因组RNA，可直接对其进行扩增。本发明的提出克服了山羊痘病毒由于形成夹皮时间久，不容易在病毒复制高峰期发现，采集病料病毒含量低微，所以检出率低，容易漏检等现象；以及提取基因组DNA时费时、费财、费力，操作时污染环境等一系列难题，而且高效、灵敏、特异、稳定、实用，本发明的提出为山羊痘病毒病的检测提供了一种高效的技术手段。
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公开(公告)号：CN114959113A
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN202210524500.X
申请日：2022-05-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6804 , C07K16/10
Abstract: 本发明公开了一种基于单域抗体9‑4‑1免疫磁珠的直扩检测小反刍兽疫病毒的试剂盒及其应用。所述试剂盒包括SEQIDNO.1所示的小反刍兽疫病毒单域抗体9‑4‑1通过链霉亲和素‑生物素与磁珠进行偶联得到的单域抗体9‑4‑1免疫磁珠。本发明使用切胶纯化的单域抗体9‑4‑1蛋白与磁珠进行偶联获得免疫磁珠，免疫磁珠富集小反刍兽疫病毒后，无需提取基因组RNA，可直接对其进行扩增。本发明的提出克服了由于病毒含量低微，检出率低，容易漏检等问题；以及提取基因组RNA时费时、费财、费力，操作时污染环境等一系列难题，通过直接扩增富集产物不但节约时间、节省资源，而且高效、灵敏、特异、稳定，本发明的提出为小反刍兽疫病毒抗原的检测提供了一种高效的技术手段。
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