公开(公告)号：CN116840475A

公开(公告)日：2023-10-03

申请号：CN202310784386.9

申请日：2023-06-29

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 周广青 ,  常惠芸 ,  刘伟 ,  龚真莉 ,  祁淑芸 ,  邵军军 ,  吕律 ,  郭慧琛 ,  高闪电 ,  何继军

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/543 ,  G01N33/535

Abstract: 本发明涉及夹心阻断ELISA试剂在制备口蹄疫病毒抗体检测试剂盒中的应用，属于生物技术领域，本发明将阴阳性血清及被检血清直接在已包被捕获抗体的ELISA板上稀释后紧接着加入酶标抗体，最后加入病毒抗原，同时设置病毒抗原对照，被检血清及阴阳性血清中口蹄疫型特异抗体阻断病毒抗原参与酶标单抗与ELISA板上的捕获抗体的双抗夹心ELISA反应的进行，判定参照液相阻断ELISA，以病毒抗原对照孔OD值平均值的50%作为病毒抗原被50%阻断的临界值，成功建立阻断夹心ELISA方法，也称为液相阻断ELISA一步法，可用于定性、定量检测口蹄疫抗体，为口蹄疫疫苗免疫抗体监测、疫苗免疫效果评估等方面提供新的技术支持。

公开(公告)号：CN104357444A

公开(公告)日：2015-02-18

申请号：CN201410539364.7

申请日：2014-10-13

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 刘艳红 ,  尚佑军 ,  孙德惠 ,  刘湘涛 ,  殷宏 ,  龚真莉 ,  祁淑芸 ,  李勇

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/86 ,  C12N5/071

Abstract: 本发明提供了使牛trim5α基因沉默的干扰方法，siRNA序列，siRNA人慢病毒表达载体，复制缺陷型人慢病毒，人慢病毒感染的MDBK细胞。本发明的RNAi和siRNA慢病毒表达载体有效的干扰牛trim5α基因的表达，显著提高人慢病毒载体在牛肾传代细胞MDBK中的基因表达。本发明为牛病毒病相关基因功能和转基因牛培育的研究提供新的技术支持。

公开(公告)号：CN112881710B

公开(公告)日：2022-04-22

申请号：CN202110154139.1

申请日：2021-02-04

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 周广青 ,  马军武 ,  邵军军 ,  常惠芸 ,  龚真莉 ,  郭建宏 ,  祁淑芸 ,  李苗苗 ,  何继军

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明涉及一种用于检测口蹄疫病毒抗体的抑制ELISA方法及应用，属于生物技术技术领域，本发明利用将阴阳性血清及被检血清直接在已包被捕获抗体的ELISA板上稀释后紧接着加入等量的稀释至工作浓度的病毒抗原，同时设置至少4孔病毒抗原对照（预先加入等体积的血清稀释液），被检血清及阴阳性血清中口蹄疫型特异抗体抑制病毒抗原与ELISA板上的捕获抗体结合，判定参照液相阻断ELISA方法，以病毒抗原对照孔OD值平均值的50%作为病毒抗原被50%抑制的临界值，成功地建立起了抑制ELISA方法，可用于检测口蹄疫抗体。

公开(公告)号：CN112881710A

公开(公告)日：2021-06-01

申请号：CN202110154139.1

申请日：2021-02-04

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 周广青 ,  马军武 ,  邵军军 ,  常惠芸 ,  龚真莉 ,  郭建宏 ,  祁淑芸 ,  李苗苗 ,  何继军

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明涉及一种用于检测口蹄疫病毒抗体的抑制ELISA方法及应用，属于生物技术技术领域，本发明利用将阴阳性血清及被检血清直接在已包被捕获抗体的ELISA板上稀释后紧接着加入等量的稀释至工作浓度的病毒抗原，同时设置至少4孔病毒抗原对照（预先加入等体积的血清稀释液），被检血清及阴阳性血清中口蹄疫型特异抗体抑制病毒抗原与ELISA板上的捕获抗体结合，判定参照液相阻断ELISA方法，以病毒抗原对照孔OD值平均值的50%作为病毒抗原被50%抑制的临界值，成功地建立起了抑制ELISA方法，可用于检测口蹄疫抗体。

公开(公告)号：CN113189332A

公开(公告)日：2021-07-30

申请号：CN202110420339.7

申请日：2021-04-19

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 周广青 ,  马军武 ,  邵军军 ,  常惠芸 ,  龚真莉 ,  祁淑芸 ,  马米灵 ,  李苗苗 ,  何继军 ,  郭建宏

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/58 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明涉及一种口蹄疫病毒液相阻断BSA‑ELISA抗体检测试剂盒及应用，属于生物技术领域，本发明通过口蹄疫病毒抗原的浓缩冻干工艺处理抗原；通过豚抗IgG‑生物素与HRP‑SA相结合建立新的酶联免疫吸附试验方法，同时操作方式进行了改良。解决了口蹄疫病毒液相阻断ELISA抗体检测试剂盒的操作繁琐、步骤多、用时长、稳定性差、易出错、猪血清样品容易发生倒置现象，生产批量小等难题。使得试剂盒操作便捷化、时间缩减化、生产批量化，保持了经典方法的敏感性、特异性，提高了运输及保存的稳定性、延长了试剂盒的有效期，为该方法用于口蹄疫免疫抗体监测、疫苗免疫效果评估、流行病学调查、免疫指导等持续提供技术支持。