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公开(公告)号：CN119574863A
公开(公告)日：2025-03-07
申请号：CN202411562087.1
申请日：2024-11-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N21/76 , G01N33/68 , G01N33/577 , C07K19/00 , C12N15/85
Abstract: 本发明公开一种用于非洲猪瘟病毒(African swine fever virus，ASFV)p30抗体检测的竞争化学发光检测试剂盒及其应用。本发明利用LgBiT与HiBiT互补结合形成荧光素酶催化底物furimazine产生化学发光的原理，将ASFVp30单抗16‑5E7E8与HiBiT进行融合表达后，利用竞争化学发光法检测血清中ASFVp30抗体。本发明的试剂盒用于检测ASFVp30抗体不仅灵敏度高、特异性好，而且操作简单、反应时间短，仅需20min就能快速有效地检测出待检血清中是否含有ASFVp30抗体，在ASFV抗体检测中具有很好的应用前景，为ASF的综合防治提供了技术手段。
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公开(公告)号：CN114344456B
公开(公告)日：2024-03-22
申请号：CN202111442006.0
申请日：2021-11-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及非洲猪瘟病毒多基因串联DNA疫苗及应用，属于生物疫苗领域。本发明将非洲猪瘟病毒已经验证的免疫保护相关抗原基因p30、p54以及未被验证的A224L进行合理串联后，插入到pVAX‑1载体上，构建得到一种非洲猪瘟病毒p30、p54和A224L串联DNA疫苗。实验证明，该重组DNA疫苗具有良好的免疫原性，在免疫的猪中诱导产生高水平的体液免疫应答以及细胞免疫应答，且抗体对ASFV具有很好的中和效果。且同时证明了拟核蛋白A224L具有诱导保护性免疫应答的能力，能够提高该重组DNA疫苗的免疫效果。
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公开(公告)号：CN114377121B
公开(公告)日：2024-02-02
申请号：CN202210024634.5
申请日：2022-01-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及含分子内佐剂的重组非洲猪瘟抗原“鸡尾酒”疫苗及其应用，属于生物技术制药领域，所述的“鸡尾酒”疫苗含有OprI‑p30‑modified p54‑TT、OprI‑p72 epitope‑pE248R的N段氨基酸序列‑TT和OprI‑CD2v的N段氨基酸序列‑pEP153R的C段氨基酸序列‑TT 3种重组非洲猪瘟病毒抗原融合蛋白。本发明提供了上述3种重组非洲猪瘟病毒抗原融合蛋白的表达和纯化方法，以及用于配制上述“鸡尾酒”疫苗的组分比例和佐剂配伍。利用本发明制备的“鸡尾酒”疫苗可激发机体产生中和抗体和特异性细胞免疫应答，可作为一种预防非洲猪瘟的亚单位疫苗。
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公开(公告)号：CN114409742A
公开(公告)日：2022-04-29
申请号：CN202111610740.3
申请日：2021-12-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及非洲猪瘟病毒p49蛋白抗原表位及其应用，属于基因工程领域，以非洲猪瘟病毒p49(pB438L)蛋白衣壳蛋白的氨基酸序列为材料，通过抗原表位数据库，预测其抗原表位并根据其氨基酸序列合成相应短肽。利用非洲猪瘟病毒感染猪阳性血清筛选能与病毒阳性血清发生特异性反应的合成肽，通过将抗原表位与GST融合表达重组蛋白、噬菌体展示多表位抗原(病毒样颗粒展示表位，VLP)，确定优势抗原表位。通过预测、免疫学筛选和鉴定，首次确定非洲猪瘟病毒p49蛋白有13个抗原表位。这些抗原表位的获得为以抗原表位为材料研发非洲猪瘟检测试剂及其试剂盒、单抗制备和安全、可鉴别诊断表位疫苗等急需战略防控产品奠定了基础。不仅将产生巨大的经济效益，而且具有重要的社会效益。
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公开(公告)号：CN111208302B
公开(公告)日：2021-04-13
申请号：CN202010037597.2
申请日：2020-01-14
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N21/76
Abstract: 本发明涉及利用多表位串联蛋白检测猪口蹄疫O型抗体的化学发光检测试剂盒，属于生物技术领域，所述试剂盒包括包被有M2抗原的化学发光板、酶标二抗、血清稀释液、20×PBST洗涤液、阳性对照血清、阴性对照血清、化学发光底物A液和B液。所述M2抗原是能区分型的多表位串联蛋白，所述多表位串联蛋白是将O型口蹄疫3个拓扑型中不同分离株的鉴别型表位串联所得；所述鉴别型表位为G‑H环的140‑154位氨基酸。本发明所述的试剂盒灵敏度高、特异性好、广谱性好、与免疫A型和Asia 1型单价苗血清无交叉反应，并且操作简单，反应时间短，在口蹄疫O型抗体检测中具有很好的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111273036A
公开(公告)日：2020-06-12
申请号：CN202010149812.8
申请日：2020-03-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/577 , G01N21/76
Abstract: 本发明涉及检测口蹄疫非结构蛋白抗体的单抗竞争化学发光试剂盒，属于生物技术领域。所述试剂盒包括捕获3ABC抗原的化学发光板、酶标单抗（2G5-HRP+9E2-HRP）、血清稀释液、20×PBST洗涤液、阳性对照血清、阴性对照血清、化学发光液（A、B），其特征在于所述捕获3ABC抗原的化学发光板为白色可拆卸的聚苯乙烯96孔板，先包被3ABC多抗，并通过3ABC多抗捕获3ABC蛋白；所述酶标单抗为分别识别3A和3B蛋白的酶标单抗2G5-HRP和9E2-HRP的混合物。本发明所述的试剂盒敏感性高、特异性强、重复性好，仅需洗涤一次，所需检测时间短，不受动物种属限制，适用于检测猪、牛和羊等多种易感动物。
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公开(公告)号：CN107219365A
公开(公告)日：2017-09-29
申请号：CN201710389717.3
申请日：2017-05-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/68 , G01N21/76
CPC classification number: G01N33/56983 , G01N21/76 , G01N33/6893 , G01N2333/09
Abstract: 本发明涉及一种基于口蹄疫病毒3B表位蛋白的化学发光检测试剂盒，属于免疫学检测领域，所述试剂盒包括化学发光反应板、酶标抗体、血清稀释液、化学发光底物和化学发光增强剂，其中化学发光反应板混合包被口蹄疫病毒3B非结构蛋白区域中的3Bepi1和3Bepi2两种表位蛋白，两种蛋白的包被条件均为25ng/孔，编码表位蛋白的基因是经引物直接退火形成，而引物的组成包括各表位序列和限制性酶切位点。所述试剂盒的检测方法在检测待检血清时用时较短，不到15min便可检测完毕，所述试剂盒基于3B的表位蛋白制备，具有良好的免疫反应性和特异性，能够较好地区分免疫和感染的动物，准确率高达97.14%，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN119320436A
公开(公告)日：2025-01-17
申请号：CN202411474710.8
申请日：2024-10-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K14/18 , C07K19/00 , C12N15/40 , C12N15/62 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种牛病毒性腹泻病毒NS2截短蛋白及在BVDV抗体检测中的应用。本发明首先提供了一种BVDV NS2蛋白的截短蛋白，所述截短蛋白分别与谷胱甘肽S移换酶(GST)和辣根过氧化物酶(HRP)融合后可溶性表达，且与BVDV抗体阳性血清具有较好的反应原性，与BVDV抗体阴性血清不发生反应，可用于BVDV抗体检测；其次，本发明以GST与所述截短蛋白的融合蛋白为包被抗原，以HRP与所述截短蛋白的融合蛋白为检测抗原，构建了BVDV抗体检测的双抗原夹心ELISA方法，所述方法具有敏感性高、特异性好、操作简便、易于推广、成本低等技术优点，可适用用于牛群中BVDV抗体的筛查。
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公开(公告)号：CN118147026A
公开(公告)日：2024-06-07
申请号：CN202410171537.8
申请日：2024-02-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明公开了一种用于原核表达系统的自诱导培养基及其应用。所述的自诱导培养基中含有胰蛋白胨5g～20g，酵母粉5g～20g，甘油3g～9g，葡萄糖0.3g～0.9g，乳糖1～4g，KH2PO43.4g/L，Na2HPO4‑7H2O 3.35g/L，NH4Cl 2.68g/L，Na2SO40.71g/L，MgSO40.493g/L以及微量元素，所述的微量元素含有50mM FeCl3，20mM CaCl2，10mM MnCl2，10mM ZnSO4，2mM CoCl2，2mM CuCl2，2mM NiCl2，2mM Na2MoO4，2mM Na2SeO3以及2mM H3BO3。研究结果显示，所述的自诱导培养基，通过阶梯温度调控策略，能够显著提高抗原的可溶性量，同等条件下抗原产量是普通LB培养基的6倍多，生产每毫克抗原所需成本仅为普通LB培养基的20％左右，大大实现了降本增效的目的。
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公开(公告)号：CN117534734A
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202311779320.7
申请日：2023-12-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/01 , C07K19/00 , C12N15/34 , C12N15/70 , C12N1/21 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/12 , A61P31/20 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种非洲猪瘟病毒p30蛋白优势抗原表位区及其应用。本发明以大肠杆菌表达的非洲猪瘟病毒p30蛋白为免疫原，免疫小鼠，利用传统的杂交瘤技术制备了20株针对p30蛋白的单克隆抗体；通过使用一系列重叠肽和丙氨酸突变的重组蛋白鉴定出这20株单抗识别的表位，获得了一种非洲猪瘟病毒p30蛋白抗原表位区；相较于目前已经报道的p30蛋白表位肽，本申请所述的非洲猪瘟病毒p30蛋白抗原表位区与非洲猪瘟阳性血清具有较强的反应性，为p30蛋白优势抗原表位区，为非洲猪瘟检测试剂盒、非洲猪瘟新型疫苗的研发提供物质基础和技术支撑。
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