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公开(公告)号：CN103091270B
公开(公告)日：2015-09-09
申请号：CN201310055748.7
申请日：2013-01-17
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N21/31 , G01N33/569 , G01N33/544 , G01N33/535
Abstract: 本发明公开了一种亚洲Ⅰ型口蹄疫146S抗原定量ELISA检测方法，包括以下步骤：1）储备亚洲Ⅰ型口蹄疫标准对照抗原；2）纯化定量亚洲Ⅰ型口蹄疫标准对照抗原146S；3）建立亚洲Ⅰ型口蹄疫间接夹心ELISA方法；4）绘制标准对照抗原标准曲线；5）计算被检样品146S抗原含量；6）检测敏感性和特异性。并提供了应用此检测方法的试剂盒。本发明的有益效果为：本发明提供的一种亚洲Ⅰ型口蹄疫146S抗原定量ELISA检测方法在测定口蹄疫抗原的含量时，既能计算出抗原含量，又能对抗原进行分型，以其原理制备的试剂盒，敏感、特异、操作简单、省时省力、稳定性好、适合于批量检测，且能区分血清型。
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公开(公告)号：CN103091270A
公开(公告)日：2013-05-08
申请号：CN201310055748.7
申请日：2013-01-17
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N21/31 , G01N33/569 , G01N33/544 , G01N33/535
Abstract: 本发明公开了一种亚洲Ⅰ型口蹄疫146S抗原定量ELISA检测方法，包括以下步骤：1）储备亚洲Ⅰ型口蹄疫标准对照抗原；2）纯化定量亚洲Ⅰ型口蹄疫标准对照抗原146S；3）建立亚洲Ⅰ型口蹄疫间接夹心ELISA方法；4）绘制标准对照抗原标准曲线；5）计算被检样品146S抗原含量；6）检测敏感性和特异性。并提供了应用此检测方法的试剂盒。本发明的有益效果为：本发明提供的一种亚洲Ⅰ型口蹄疫146S抗原定量ELISA检测方法在测定口蹄疫抗原的含量时，既能计算出抗原含量，又能对抗原进行分型，以其原理制备的试剂盒，敏感、特异、操作简单、省时省力、稳定性好、适合于批量检测，且能区分血清型。
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公开(公告)号：CN101067627A
公开(公告)日：2007-11-07
申请号：CN200710126176.1
申请日：2007-06-14
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开一种用于检测Asia1型口蹄疫病毒抗原的快速诊断试纸条及制备方法。本发明是将口蹄疫病毒的单抗加入胶体金溶液中，将胶体金标记单抗的混合溶液用多孔纤维材料浸润，在硝酸纤维膜上设定出检测线和对照线位置喷上另一株口蹄疫病毒单抗和兔抗鼠抗体形成检测线和对照线，再将干燥后的硝酸纤维膜贴于不透水材料上，将浸润有金标混合溶液的多孔纤维材料和另一个多孔纤维材料分别贴于不透水材料上并使两者位于硝酸纤维膜的两端，在多孔纤维材料另的一端设置多孔吸水材料，制成诊断试纸条。
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公开(公告)号：CN117362401A
公开(公告)日：2024-01-09
申请号：CN202311255079.8
申请日：2023-09-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种牛病毒性腹泻病毒N蛋白及其作为自我切割蛋白在制备基因工程蛋白中的应用。本发明首先意外发现了一种具有自我切割蛋白活性的牛病毒性腹泻病毒N蛋白，所述牛病毒性腹泻病毒N蛋白在大肠杆菌中可高效自我切割，其编码基因可作为原核表达载体元件，在常用启动子载体中可高效表达，与目的蛋白融合可实现可溶性表达，且在表达过程中同时实现切割，产生具有真实N端氨基酸的活性目的蛋白；同时可利用凝胶过滤色谱或目的蛋下游的标签纯化上游标签去杂的策略，最终获得具有真实N端氨基酸的活性目的蛋白。
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公开(公告)号：CN117761315A
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202311775983.1
申请日：2023-12-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/577 , G01N21/76 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及单克隆抗体技术领域，尤其涉及化学发光相加法在制备识别不同表位单克隆抗体中的应用。基于化学发光免疫分析(CLIA)的高灵敏度、宽的线性范围，本发明将化学发光应用于单克隆抗体分类中，建立化学发光相加法。化学发光相加法是一种简便快速将抗体进行分类的方法，为制备识别不同表位的单抗提供了一种新方法，该方法能够避免制备同一种单抗，从而大大降低了制备识别不同表位单抗的成本，节省了科研人员的时间和精力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116840475A
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202310784386.9
申请日：2023-06-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/535
Abstract: 本发明涉及夹心阻断ELISA试剂在制备口蹄疫病毒抗体检测试剂盒中的应用，属于生物技术领域，本发明将阴阳性血清及被检血清直接在已包被捕获抗体的ELISA板上稀释后紧接着加入酶标抗体，最后加入病毒抗原，同时设置病毒抗原对照，被检血清及阴阳性血清中口蹄疫型特异抗体阻断病毒抗原参与酶标单抗与ELISA板上的捕获抗体的双抗夹心ELISA反应的进行，判定参照液相阻断ELISA，以病毒抗原对照孔OD值平均值的50%作为病毒抗原被50%阻断的临界值，成功建立阻断夹心ELISA方法，也称为液相阻断ELISA一步法，可用于定性、定量检测口蹄疫抗体，为口蹄疫疫苗免疫抗体监测、疫苗免疫效果评估等方面提供新的技术支持。
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公开(公告)号：CN106596933A
公开(公告)日：2017-04-26
申请号：CN201611113836.8
申请日：2016-12-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/531
CPC classification number: G01N33/56983 , G01N33/531 , G01N2333/125
Abstract: 本发明公开了一种新城疫病毒抗体检测阻断ELISA试剂盒。本发明所述新城疫病毒抗体检测阻断ELISA试剂盒，包括：包被新城疫病毒灭活抗原的ELISA板，新城疫病毒阳性对照血清、阴性对照血清，辣根过氧化物酶标记的新城疫病毒NP蛋白单克隆抗体。所述新城疫病毒NP蛋白单克隆抗体由保藏编号为CCTCC NO：C2016180的杂交瘤细胞株所分泌。本发明所述新城疫病毒抗体检测阻断ELISA试剂盒能够检测不同种属来源的疑似新城疫病毒感染的血清样品，区分MG7缺失苗免疫和野毒感染后的新城疫病毒血清，且与常见禽类病毒性病原阳性血清不存在交叉反应，检测敏感性和特异性高，重复性好，适用于高通量检测血清样品。
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公开(公告)号：CN105467138A
公开(公告)日：2016-04-06
申请号：CN201510878606.X
申请日：2015-12-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/94 , G01N33/539
CPC classification number: G01N33/94 , G01N33/539 , G01N2333/09
Abstract: 本发明提供一种确定口蹄疫疫苗组份及估计抗原含量的方法，包括以下步骤：1）口蹄疫疫苗破乳，分离出抗原相；2）对抗原相进行浓缩；3）用纯化的口蹄疫病毒亚洲1型、O型、A型三个型的146S抗原免疫动物，制备检测血清；4）将浓缩抗原以不同倍数稀释，分别于检测血清进行免疫扩散试验；5）根据出现沉淀线情况判定口蹄疫疫苗组份，即是O型单价疫苗、或是O型+A型双价疫苗、还是O型+亚洲1型+A型三价疫苗。6）再根据出现沉淀线的最高抗原稀释倍数估算被检疫苗样品中抗原含量。本发明的方法既能对口蹄疫疫苗的组份进行甄别，又能估算出各组份含量。本方法操作简单、特异性强、稳定性好、适合于基层应用。
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公开(公告)号：CN103884839A
公开(公告)日：2014-06-25
申请号：CN201210555104.X
申请日：2012-12-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569
CPC classification number: G01N33/6803 , G01N33/56983 , G01N2333/09
Abstract: 本发明公开了一种用于定量检测FMDV有效抗原的反向液相阻断ELISA方法。本发明通过将标准阳性血清的稀释方法固定，即固定血清抗体的量，将待检抗原作系列稀释与之作用，同时设置已知有效抗原含量的标准对照抗原，基于阳性血清在某一恒定的抗体效价下其50%阻断有效抗原量是一定的这一抗原抗体反应原理，成功建立了一种对口蹄疫病毒有效抗原定量的新技术，命名为反向液相阻断ELISA。该方法继承了液相阻断ELISA方法用于测定血清抗体时可分型、操作简单、重复性好、高敏感性、高特异性、可批量检测等优点，同时实现了对FMDV的有效抗原量的定量测定，为解决现今国内外急需解决的疫苗效力检验动物替代问题提供了技术手段。
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公开(公告)号：CN119320436A
公开(公告)日：2025-01-17
申请号：CN202411474710.8
申请日：2024-10-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K14/18 , C07K19/00 , C12N15/40 , C12N15/62 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种牛病毒性腹泻病毒NS2截短蛋白及在BVDV抗体检测中的应用。本发明首先提供了一种BVDV NS2蛋白的截短蛋白，所述截短蛋白分别与谷胱甘肽S移换酶(GST)和辣根过氧化物酶(HRP)融合后可溶性表达，且与BVDV抗体阳性血清具有较好的反应原性，与BVDV抗体阴性血清不发生反应，可用于BVDV抗体检测；其次，本发明以GST与所述截短蛋白的融合蛋白为包被抗原，以HRP与所述截短蛋白的融合蛋白为检测抗原，构建了BVDV抗体检测的双抗原夹心ELISA方法，所述方法具有敏感性高、特异性好、操作简便、易于推广、成本低等技术优点，可适用用于牛群中BVDV抗体的筛查。
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