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公开(公告)号：CN120041481A
公开(公告)日：2025-05-27
申请号：CN202510187038.2
申请日：2025-02-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明公开了一种利用毕赤酵母表达系统生产口蹄疫病毒样颗粒疫苗的方法及其产品和应用。所述的方法是通过将优化后的P1基因和优化后的3C蛋白酶的表达盒构建在同一个质粒上，然后在毕赤酵母里面进行诱导表达，最后通过组装、纯化后得到的。本发明通过在P1基因引入N1017D和H2145Y突变，提高了VLPs的耐酸性。同时，为了提高3C蛋白酶在毕赤酵母细胞中的切割效率，对3C蛋白酶基因进行了改良，提高了其对P1蛋白的切割功能，成功利用毕赤酵母表达系统制备了VLPs。本发明的提出为口蹄疫病毒样颗粒的制备提供了新的方法，相比其他真核表达系统更有优势，且解决了毕赤酵母系统中3C蛋白酶的影响问题，有利于将来的工业化生产。
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公开(公告)号：CN119959545A
公开(公告)日：2025-05-09
申请号：CN202510018411.1
申请日：2025-01-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明提出了一种用于筛查口蹄疫病毒持续感染牛的标志物、试剂盒及其应用，属于病毒免疫学检测技术领域。所述的标志物由牛外周血中的CD21+B细胞和牛口咽液中的IgA组成。在口蹄疫病毒感染28天后同时检测牛外周血中的CD21+B细胞数量和口咽液中的IgA的水平，FMDV持续感染牛外周血中的CD21+B细胞比例显著低于康复牛外周血中的CD21+B细胞比例，同时FMDV持续感染牛OPF中IgA的水平显著高于康复牛OPF中IgA的水平，从而可以更有效的筛查出FMDV持续感染的牛。ROC分析结果显示，在35dpc时，AUC为1.000(95％置信区间，0.782‑1.000)，诊断的敏感性和特异性均达到了100％。因此，本发明的提出为筛查FMDV持续感染牛提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN119552821A
公开(公告)日：2025-03-04
申请号：CN202411690015.5
申请日：2024-11-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12N5/10 , C12N15/85 , C07K14/09 , G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种口蹄疫假病毒细胞培养系统及其应用。本发明属于生物技术领域。本发明提供的一种细胞培养系统，可用于生产具有转录和复制能力的口蹄疫假病毒(FMDV‑trVLPs)，但其不具有活病毒的感染性。该系统由Nluc替换了FMDV衣壳蛋白基因(P1)的亚基因组复制子(FMDV‑Nluc)和稳定整合FMDV P12A3C基因的BHK‑21细胞系(BHK‑P1)组成。当FMDV‑Nluc复制子转染进BHK‑P1细胞后，可生产出口蹄疫假病毒FMDV‑trVLPs，并能在BHK‑P1细胞内增殖和传代，有效实现生物安全降级，在降低生物安全风险、模拟FMDV活病毒研究方面具有巨大潜力与实用价值。
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公开(公告)号：CN118130791A
公开(公告)日：2024-06-04
申请号：CN202311781532.9
申请日：2023-12-21
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/531 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种A型口蹄疫疫苗抗原定量检测ELISA试剂盒、检测方法及其应用。所述的试剂盒中含有A型口蹄疫病毒的特异性抗体Ab3，其氨基酸序列为SEQ ID No.1所示。所述的抗原包括A型口蹄疫病毒146S抗原以及口蹄疫病毒样颗粒。此外，本发明还建立了一种定量检测A型口蹄疫疫苗中抗原含量的方法，该方法是以A型口蹄疫病毒的特异性抗体Ab3为包被抗体，生物素化标记的Ab3抗体为检测抗体，HRP标记的链霉亲和素作为酶标二抗，同时使用A型口蹄疫病毒灭活146S抗原标准品制作标准曲线，建立的双抗体夹心ELISA方法，该方法具有较高的特异性和重复性，且相比较传统蔗糖密度梯度离心法，操作更简易，不需要大型仪器设备，更适合临床推广。
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公开(公告)号：CN117990904A
公开(公告)日：2024-05-07
申请号：CN202410166120.2
申请日：2024-02-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N33/68 , G01N33/543 , G01N33/536 , G01N33/532 , C07K16/10
Abstract: 本发明公开了一种用于A型口蹄疫病毒中和抗体检测的液相阻断ELISA试剂盒及其应用。所述的液相阻断ELISA试剂盒中包含A型口蹄疫病毒中和抗体Ab1、A型口蹄疫病毒样颗粒(VLPs)抗原以及生物素标记的Ab1抗体，其中，所述的A型口蹄疫病毒中和抗体Ab1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明基于自主研发制备的A型口蹄疫病毒中和抗体Ab1抗体和A型口蹄疫病毒VLPs，研发出一种敏感性和特异性均较好，可以检测A型口蹄疫病毒中和抗体，且价格低廉的国产A型口蹄疫病毒中和抗体检测试剂盒，能够方便的用于评价疫苗诱导的抗体是否具有保护作用，其检测结果与传统VNT方法检测结果具有很高的符合率(95.3％)。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117388491A
公开(公告)日：2024-01-12
申请号：CN202311263433.1
申请日：2023-09-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/68 , C07K16/10
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及兽用诊断技术领域，具体的公开了一种猪塞内卡病毒中和抗体液相阻断ELISA试剂盒，所述试剂盒含猪塞内卡病毒单域抗体以及配套的检测试剂，所述猪塞内卡病毒单域抗体还可以是单域抗体的抗原结合片段，所述单域抗体选自52组中的一组或多组，所述每组单域抗体或抗原结合片段的重链可变区包含CDR‑1、CDR‑2和CDR‑3，所述52组单域抗体或抗原结合片段的重链可变区CDR‑1(VH‑CDR‑1)的氨基酸序列分别为SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.52所示，重链可变区CDR‑2(VH‑CDR‑2)的氨基酸序列分别为SEQ ID NO.53～SEQ ID NO.104所示，重链可变区CDR‑3(VH‑CDR‑3)的氨基酸序列分别为SEQ ID NO.105～SEQ ID NO.156所示。本发明的试剂盒可对血清中的SVA中和抗体水平进行快速检测，其敏感性高、特异性好、结果稳定，可更好地应用于SVA疫苗效力评价。
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公开(公告)号：CN113955762B
公开(公告)日：2023-03-31
申请号：CN202111367802.2
申请日：2021-11-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于材料技术领域，具体涉及一种介孔硅纳米材料及其制备方法和应用。所述的介孔硅纳米材料具有核‑锥结构；其内部为二氧化硅实心核，外部为从核向外放射的树枝状介孔硅壳层。二氧化硅核大小为108±10nm；介孔硅壳层厚度为66±10nm。所述的介孔硅纳米材料为球形形貌，粒径为237±10nm。本发明的优点：介孔硅纳米材料比表面积和孔体积大、粒径均一、结构稳定、生物安全性高。可以实现对口蹄疫病毒样颗粒抗原的负载和缓慢释放，具有较高的蛋白负载能力、极低的细胞毒性、良好的血液相容性及较低的组织器官毒性。作为佐剂，可以增强免疫应答水平和提高攻毒保护率效果。
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公开(公告)号：CN113925842B
公开(公告)日：2022-12-02
申请号：CN202111367318.X
申请日：2021-11-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于材料技术领域，具体涉及一种开口型空心硅纳米胶囊及其制备方法和用途。所述的开口型空心硅纳米胶囊内部为空腔结构，外部为二氧化硅壳层；在其壳层上有单一的10～50nm的开孔结构。所述的开口型空心硅纳米胶囊内部空腔大小为220±10nm，外部二氧化硅壳层厚度为15±3nm。所述的开口型空心硅纳米胶囊为球形形貌，粒径为254±7nm。本发明的方法制备简单、成本较低，重复性好，粒径大小均一，而且可以实现大规模制备。本发明制备的开口型空心硅纳米胶囊可用于动物疫苗递送载体。
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公开(公告)号：CN113925842A
公开(公告)日：2022-01-14
申请号：CN202111367318.X
申请日：2021-11-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于材料技术领域，具体涉及一种开口型空心硅纳米胶囊及其制备方法和用途。所述的开口型空心硅纳米胶囊内部为空腔结构，外部为二氧化硅壳层；在其壳层上有单一的10～50nm的开孔结构。所述的开口型空心硅纳米胶囊内部空腔大小为220±10nm，外部二氧化硅壳层厚度为15±3nm。所述的开口型空心硅纳米胶囊为球形形貌，粒径为254±7nm。本发明的方法制备简单、成本较低，重复性好，粒径大小均一，而且可以实现大规模制备。本发明制备的开口型空心硅纳米胶囊可用于动物疫苗递送载体。
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公开(公告)号：CN111239409B
公开(公告)日：2021-06-01
申请号：CN202010061291.0
申请日：2020-01-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/58 , G01N33/569 , G01N33/558 , C09K11/85 , C09K11/02
Abstract: 本发明公开了一种用于O型口蹄疫病毒抗体定量检测的上转换发光免疫层析试纸条及其制备方法。本发明利用大肠杆菌原核表达技术表达O型口蹄疫(O‑FMDV)衣壳蛋白，在体外组装成O型口蹄疫病毒样颗粒作为俘获抗原；利用上转换发光纳米材料特殊的发光性能，将其作为荧光标记物与蛋白G进行偶联，进而与抗体结合，制备得到的本发明上转换发光免疫层析试纸条。本发明制备的免疫层析试纸敏感性高、特异性和可重复性好，结果稳定，可应用于O型口蹄疫的抗体水平的监测，有助于进一步了解偶蹄类家畜O型口蹄疫抗体的状况。
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