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公开(公告)号:CN117815376A
公开(公告)日:2024-04-05
申请号:CN202311817155.X
申请日:2023-12-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K39/135 , C12N5/0784 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种口蹄疫DC疫苗、制备方法及其应用。本发明通过在体外使用FMDV灭活抗原刺激源自猪血液PBMC制备的DC,并在不同激动剂和细胞因子诱导下得到成熟DC,制备出具有增强交叉递呈作用的DC疫苗,回输给猪后刺激适应性免疫应答激活,可以产生细胞毒性T细胞并增强中和抗体的产生。攻毒保护试验发现,该DC疫苗可以产生完全的保护性应答,而且没有病毒血症的产生。因此,本发明为猪口蹄疫的预防提供了一种有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN115028744B
公开(公告)日:2023-05-09
申请号:CN202210771918.0
申请日:2022-06-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K19/00 , C12N15/70 , A61K39/135 , A61P31/14 , G01N33/569 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供了一种口蹄疫病毒VP1嵌合纳米颗粒及其制备方法和应用,涉及生物医药技术领域。本发明所述VP1嵌合纳米颗粒,为将O型/A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1和天然蛋白质纳米骨架蛋白共价连接得到。本发明在制备所述VP1嵌合纳米颗粒时,通过蛋白骨架共价连接口蹄疫VP1结构蛋白,将其展示在纳米笼外部,并且采用小泛素样修饰蛋白原核表达系统,既促进了目的蛋白的正确折叠,提高可溶性表达,又兼顾了原核表达系统表达效率高,成本低等优点。本发明的O型/A型口蹄疫病毒VP1嵌合纳米颗粒可在制备用于预防O型/A型口蹄疫病毒引起疾病的疫苗中应用,也可在制备用于检测O型/A型口蹄疫病毒的检测试剂中应用。
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公开(公告)号:CN113896206B
公开(公告)日:2023-04-07
申请号:CN202111367359.9
申请日:2021-11-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C01B33/18 , A61K39/39 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于材料技术领域,具体涉及一种空心介孔硅纳米微球及其制备方法和用途。所述的纳米微球为球状;其内部为空腔结构,空腔大小150±10nm,外部为介孔硅壳层,壳层厚度为55±5nm。所述的纳米微球的壳层上有3±1nm的介孔结构。本发明的空心介孔硅纳米微球具有安全性好、稳定性高、制备简单等优势,可用于制备口蹄疫病毒样颗粒疫苗。
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公开(公告)号:CN115057941A
公开(公告)日:2022-09-16
申请号:CN202210501097.9
申请日:2022-05-09
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K19/00 , C07K14/09 , C07K14/00 , C12N15/70 , A61K39/135 , A61K39/295 , A61P31/14 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种AO双价口蹄疫病毒表位嵌合纳米颗粒的制备方法及应用。本发明的AO双价口蹄疫病毒表位嵌合纳米颗粒由A型及O型口蹄疫病毒的表位串联两种骨架蛋白组成。本发明通过选择A型及O型口蹄疫病毒结构蛋白及非机构蛋白的T细胞表位及B细胞表位,串联至骨架蛋白A上,再选择具有免疫增强效果的多个肽段串联至骨架蛋白B上,之后将优化后的两个蛋白的基因序列插入到原核载体中,通过原核系统表达、纯化、自组装后得到所述的AO双价口蹄疫病毒表位嵌合纳米颗粒。本发明的AO双价口蹄疫病毒表位嵌合纳米颗粒可用于制备预防A型及O型口蹄疫病毒引起的疾病的疫苗。此外,本发明中的纳米颗粒骨架还可用于串联其他病毒的表位制备相关疫苗。
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公开(公告)号:CN115043914A
公开(公告)日:2022-09-13
申请号:CN202210613204.7
申请日:2022-05-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/085 , A61K39/125 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种塞内卡病毒A空衣壳及其制备方法和用途。本发明在细胞感染8h时加入10mM盐酸胍使SVA完整病毒粒子全部形成空衣壳,然后使用10%‑50%氯化铯,230000g,离心2.5h条件下分离SVA完整病毒粒子及空衣壳。为确定分离塞内卡病毒A完整病毒粒子和空衣壳的免疫效果,按2μg/鼠的剂量肌肉注射免疫BALB/c小鼠,之后检测特异性抗体和中和抗体变化。结果显示SVA完整病毒粒子及空衣壳免疫后诱导产生的中和抗体及特异性抗体相当。本发明的提出为塞内卡病毒A空衣壳的制备提供了新的技术手段,也为更为安全、有效的塞内卡病毒A疫苗的研究提供了技术支持,同时也为其他小RNA病毒的分离纯化奠定了基础。
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公开(公告)号:CN114317571A
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN202111641645.X
申请日:2021-12-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/62 , C12N15/70 , A61K39/125 , A61K39/135 , A61K39/39 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种病毒样颗粒及其制备方法和应用,属于农业科学畜牧兽医科学技术领域。本发明以小泛素样修饰蛋白作为标签蛋白促进病毒结构蛋白VP0、VP1和VP3的正确折叠,同时保证了蛋白的结构稳定性,实现结构蛋白的大量表达,经过3种结构蛋白体外自组装后,获得大量的与天然病毒性能相似的病毒样颗粒。经过免疫原性检测,本发明制备的病毒样颗粒具有较高的免疫原性,可作为储备疫苗,在防控猪水泡病或口蹄疫病毒传播中应用。
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公开(公告)号:CN113896206A
公开(公告)日:2022-01-07
申请号:CN202111367359.9
申请日:2021-11-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C01B33/18 , A61K39/39 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于材料技术领域,具体涉及一种空心介孔硅纳米微球及其制备方法和用途。所述的纳米微球为球状;其内部为空腔结构,空腔大小150±10nm,外部为介孔硅壳层,壳层厚度为55±5nm。所述的纳米微球的壳层上有3±1nm的介孔结构。本发明的空心介孔硅纳米微球具有安全性好、稳定性高、制备简单等优势,可用于制备口蹄疫病毒样颗粒疫苗。
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公开(公告)号:CN113174407A
公开(公告)日:2021-07-27
申请号:CN202110506452.7
申请日:2021-05-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种稳定表达猪瘟病毒完整结构蛋白CHO‑K1细胞系的筛选方法,主要是利用PCR方法扩增猪瘟病毒(石门株)的完整结构蛋白(ShmEs)基因,并将其插入真核表达载体pcDNA3.4中,构建重组表达质粒pcDNA3.4‑ShmEs。利用瞬时转染的方法将该重组质粒转入CHO‑K1细胞,并使用抗生素G418进行筛选。试验结果表明,ShmEs基因在CHO‑K1细胞中得到了表达且能够稳定传代表达,并且利用该稳定细胞系生产的抗原免疫兔体能够刺激兔体产生猪瘟特异性抗体,并且能够至少维持42天。ShmEs基因的成功表达及其稳定细胞系的建立为猪瘟新型基因重组疫苗的开发奠定了基础。
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公开(公告)号:CN111979205A
公开(公告)日:2020-11-24
申请号:CN202010725839.7
申请日:2020-07-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/85 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种耐热型口蹄疫重组病毒株、由该病毒株制成的灭活疫苗及其应用。所述的一种耐热型口蹄疫重组病毒株,命名为rM3,其是由SEQ ID NO.1所示的感染性cDNA通过病毒拯救获得的。实验证明,该重组病毒株的衣壳完全裂解的温度比野生毒株病毒的高,表明该拯救获得的口蹄疫重组病毒株rM3比野生毒株更耐热。本发明的提出为进一步推进热稳定性疫苗的研究和应用,为重大疫病防控及彻底净化提供了技术支持。同时本发明的提出为制备稳定性口蹄疫疫苗奠定了基础。
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公开(公告)号:CN111944768A
公开(公告)日:2020-11-17
申请号:CN202010724770.6
申请日:2020-07-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/85 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种耐热型口蹄疫重组病毒株及其在制备口蹄疫灭活疫苗中的应用。本发明所述的一种耐热型口蹄疫重组病毒株,命名为rM10,其是由SEQ ID NO.1所示的感染性cDNA通过病毒拯救获得的。实验证明,该重组病毒株的衣壳完全裂解的温度比野生毒株病毒的高,表明该拯救获得的口蹄疫重组病毒株rM10比野生毒株更耐热。本发明的提出为进一步推进热稳定性疫苗的研究和应用,为重大疫病防控及彻底净化提供了技术支持。同时本发明的提出为制备稳定性口蹄疫疫苗奠定了基础。
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