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公开(公告)号:CN114921589A
公开(公告)日:2022-08-19
申请号:CN202210524501.4
申请日:2022-05-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6806 , C12Q1/686 , C07K16/08 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于单域抗体9‑4‑1免疫磁珠的直扩检测山羊痘病毒的试剂盒及其应用。所述试剂盒包括SEQ ID NO.1所示的山羊痘病毒单域抗体9‑4‑1通过链霉亲和素‑生物素与磁珠进行偶联得到的单域抗体9‑4‑1免疫磁珠。本发明使用切胶纯化的单域抗体9‑4‑1蛋白与磁珠进行偶联获得免疫磁珠,免疫磁珠富集山羊痘病毒后,无需提取基因组RNA,可直接对其进行扩增。本发明的提出克服了山羊痘病毒由于形成夹皮时间久,不容易在病毒复制高峰期发现,采集病料病毒含量低微,所以检出率低,容易漏检等现象;以及提取基因组DNA时费时、费财、费力,操作时污染环境等一系列难题,而且高效、灵敏、特异、稳定、实用,本发明的提出为山羊痘病毒病的检测提供了一种高效的技术手段。
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公开(公告)号:CN106405092A
公开(公告)日:2017-02-15
申请号:CN201610776713.6
申请日:2016-08-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/531 , C07K16/10
CPC classification number: G01N33/56983 , C07K16/1009 , G01N33/531 , G01N33/577 , G01N2333/09
Abstract: 本发明公开了一种基于型特异性单抗的O型口蹄疫病毒抗体固相竞争ELISA试剂盒。含有HRP标记的O型口蹄疫特异性单抗。本发明的试剂盒可用于O型口蹄疫病毒抗体水平监测。替代现有ELISA中口蹄疫兔抗、豚鼠抗血清及抗豚鼠酶标抗体,简化ELISA方法步骤,提高稳定性、大幅度缩短检测时间,从24h缩短至1.5小时内,突破了原来ELISA需要一抗和二抗等反应过程。
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公开(公告)号:CN103091270B
公开(公告)日:2015-09-09
申请号:CN201310055748.7
申请日:2013-01-17
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N21/31 , G01N33/569 , G01N33/544 , G01N33/535
Abstract: 本发明公开了一种亚洲Ⅰ型口蹄疫146S抗原定量ELISA检测方法,包括以下步骤:1)储备亚洲Ⅰ型口蹄疫标准对照抗原;2)纯化定量亚洲Ⅰ型口蹄疫标准对照抗原146S;3)建立亚洲Ⅰ型口蹄疫间接夹心ELISA方法;4)绘制标准对照抗原标准曲线;5)计算被检样品146S抗原含量;6)检测敏感性和特异性。并提供了应用此检测方法的试剂盒。本发明的有益效果为:本发明提供的一种亚洲Ⅰ型口蹄疫146S抗原定量ELISA检测方法在测定口蹄疫抗原的含量时,既能计算出抗原含量,又能对抗原进行分型,以其原理制备的试剂盒,敏感、特异、操作简单、省时省力、稳定性好、适合于批量检测,且能区分血清型。
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公开(公告)号:CN103091270A
公开(公告)日:2013-05-08
申请号:CN201310055748.7
申请日:2013-01-17
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N21/31 , G01N33/569 , G01N33/544 , G01N33/535
Abstract: 本发明公开了一种亚洲Ⅰ型口蹄疫146S抗原定量ELISA检测方法,包括以下步骤:1)储备亚洲Ⅰ型口蹄疫标准对照抗原;2)纯化定量亚洲Ⅰ型口蹄疫标准对照抗原146S;3)建立亚洲Ⅰ型口蹄疫间接夹心ELISA方法;4)绘制标准对照抗原标准曲线;5)计算被检样品146S抗原含量;6)检测敏感性和特异性。并提供了应用此检测方法的试剂盒。本发明的有益效果为:本发明提供的一种亚洲Ⅰ型口蹄疫146S抗原定量ELISA检测方法在测定口蹄疫抗原的含量时,既能计算出抗原含量,又能对抗原进行分型,以其原理制备的试剂盒,敏感、特异、操作简单、省时省力、稳定性好、适合于批量检测,且能区分血清型。
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公开(公告)号:CN114317571B
公开(公告)日:2025-04-18
申请号:CN202111641645.X
申请日:2021-12-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/62 , C12N15/70 , A61K39/125 , A61K39/135 , A61K39/39 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种病毒样颗粒及其制备方法和应用,属于农业科学畜牧兽医科学技术领域。本发明以小泛素样修饰蛋白作为标签蛋白促进病毒结构蛋白VP0、VP1和VP3的正确折叠,同时保证了蛋白的结构稳定性,实现结构蛋白的大量表达,经过3种结构蛋白体外自组装后,获得大量的与天然病毒性能相似的病毒样颗粒。经过免疫原性检测,本发明制备的病毒样颗粒具有较高的免疫原性,可作为储备疫苗,在防控猪水泡病或口蹄疫病毒传播中应用。
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公开(公告)号:CN111944768B
公开(公告)日:2022-10-25
申请号:CN202010724770.6
申请日:2020-07-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/85 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种耐热型口蹄疫重组病毒株及其在制备口蹄疫灭活疫苗中的应用。本发明所述的一种耐热型口蹄疫重组病毒株,命名为rM10,其是由SEQ ID NO.1所示的感染性cDNA通过病毒拯救获得的。实验证明,该重组病毒株的衣壳完全裂解的温度比野生毒株病毒的高,表明该拯救获得的口蹄疫重组病毒株rM10比野生毒株更耐热。本发明的提出为进一步推进热稳定性疫苗的研究和应用,为重大疫病防控及彻底净化提供了技术支持。同时本发明的提出为制备稳定性口蹄疫疫苗奠定了基础。
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公开(公告)号:CN113252891A
公开(公告)日:2021-08-13
申请号:CN202110021181.6
申请日:2021-01-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明公开一种用于检测猪塞尼卡病毒A抗体的试剂盒。本发明的检测塞尼卡病毒A抗体的试剂盒至少有包被有塞尼卡病毒A兔抗血清的酶标板和塞尼卡病毒A豚鼠抗血清。本发明具有敏感性高、特异性好、且操作简单、结果稳定、适合于批量检测,可评估未免疫猪群中塞尼卡病毒A的感染情况,及疫苗免疫后猪群的特异性抗体水平的优点。
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公开(公告)号:CN106483291A
公开(公告)日:2017-03-08
申请号:CN201610778727.1
申请日:2016-08-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/535 , C07K16/10
CPC classification number: G01N33/577 , C07K16/1009 , C07K2317/33 , G01N33/535 , G01N33/56983
Abstract: 本发明公开了一种基于型特异性单抗的Asia1型口蹄疫病毒抗体固相竞争ELISA试剂盒。含有HRP标记的Asia1型口蹄疫特异性单抗。本发明的试剂盒可用于Asia1型口蹄疫病毒抗体水平监测。替代现有ELISA中口蹄疫兔抗、豚鼠抗血清及抗豚鼠酶标抗体,简化ELISA方法步骤,提高稳定性、大幅度缩短检测时间,从24h缩短至1.5小时内,突破了原来ELISA需要一抗和二抗等反应过程。
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公开(公告)号:CN105467138A
公开(公告)日:2016-04-06
申请号:CN201510878606.X
申请日:2015-12-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/94 , G01N33/539
CPC classification number: G01N33/94 , G01N33/539 , G01N2333/09
Abstract: 本发明提供一种确定口蹄疫疫苗组份及估计抗原含量的方法,包括以下步骤:1)口蹄疫疫苗破乳,分离出抗原相;2)对抗原相进行浓缩;3)用纯化的口蹄疫病毒亚洲1型、O型、A型三个型的146S抗原免疫动物,制备检测血清;4)将浓缩抗原以不同倍数稀释,分别于检测血清进行免疫扩散试验;5)根据出现沉淀线情况判定口蹄疫疫苗组份,即是O型单价疫苗、或是O型+A型双价疫苗、还是O型+亚洲1型+A型三价疫苗。6)再根据出现沉淀线的最高抗原稀释倍数估算被检疫苗样品中抗原含量。本发明的方法既能对口蹄疫疫苗的组份进行甄别,又能估算出各组份含量。本方法操作简单、特异性强、稳定性好、适合于基层应用。
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公开(公告)号:CN103884839A
公开(公告)日:2014-06-25
申请号:CN201210555104.X
申请日:2012-12-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569
CPC classification number: G01N33/6803 , G01N33/56983 , G01N2333/09
Abstract: 本发明公开了一种用于定量检测FMDV有效抗原的反向液相阻断ELISA方法。本发明通过将标准阳性血清的稀释方法固定,即固定血清抗体的量,将待检抗原作系列稀释与之作用,同时设置已知有效抗原含量的标准对照抗原,基于阳性血清在某一恒定的抗体效价下其50%阻断有效抗原量是一定的这一抗原抗体反应原理,成功建立了一种对口蹄疫病毒有效抗原定量的新技术,命名为反向液相阻断ELISA。该方法继承了液相阻断ELISA方法用于测定血清抗体时可分型、操作简单、重复性好、高敏感性、高特异性、可批量检测等优点,同时实现了对FMDV的有效抗原量的定量测定,为解决现今国内外急需解决的疫苗效力检验动物替代问题提供了技术手段。
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