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公开(公告)号:CN103076451B
公开(公告)日:2016-01-20
申请号:CN201310017378.8
申请日:2013-01-17
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种O型口蹄疫146S抗原定量ELISA检测试剂盒及其使用方法,包括酶标板;O型口蹄疫标准对照抗原;破乳剂;口蹄疫O型兔抗血清;口蹄疫O型豚鼠抗血清;兔抗豚鼠-辣根过氧化物酶结合物;豚鼠抗血清稀释液;25倍PBST浓缩液;碳酸盐缓冲液胶囊;柠檬酸-磷酸盐缓冲液片剂;OPD片剂;终止液;封板膜;移液槽;96孔U型稀释板。本发明是蔗糖密度梯度离心、间接夹心ELISA方法的有机结合体,是集二者之长而去其不足,其操作简单、稳定性好、适合于批量检测,能区分血清型,是抗原定量和疫苗效力检验替代的理想方法。
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公开(公告)号:CN101236204A
公开(公告)日:2008-08-06
申请号:CN200710194664.6
申请日:2007-11-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/52
Abstract: 本发明涉及一种用于对偶蹄类动物O型口蹄疫抗体水平进行快速检测的胶体金试纸条,这种试纸条的制备,以及其具体检测的方法。试纸条的底板上固定有多孔纤维材料构成的加样吸收垫、位于加样吸收垫尾端并与加样吸收垫相连的免疫金标层、和由硝酸纤维膜构成的检测段,以及位于检测段尾端与检测段相连的用吸水材料构成的吸收段,质控线为抗O型口蹄疫病毒的兔或豚鼠IgG抗体,检测线包由O型口蹄疫病毒构成,检测段的检测线和免疫金标层吸附的胶体金标记的O型口蹄疫病毒是天然病毒,或者是基因重组表达口蹄疫病毒,或者是口蹄疫病毒的分解抗原。
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公开(公告)号:CN103884839A
公开(公告)日:2014-06-25
申请号:CN201210555104.X
申请日:2012-12-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569
CPC classification number: G01N33/6803 , G01N33/56983 , G01N2333/09
Abstract: 本发明公开了一种用于定量检测FMDV有效抗原的反向液相阻断ELISA方法。本发明通过将标准阳性血清的稀释方法固定,即固定血清抗体的量,将待检抗原作系列稀释与之作用,同时设置已知有效抗原含量的标准对照抗原,基于阳性血清在某一恒定的抗体效价下其50%阻断有效抗原量是一定的这一抗原抗体反应原理,成功建立了一种对口蹄疫病毒有效抗原定量的新技术,命名为反向液相阻断ELISA。该方法继承了液相阻断ELISA方法用于测定血清抗体时可分型、操作简单、重复性好、高敏感性、高特异性、可批量检测等优点,同时实现了对FMDV的有效抗原量的定量测定,为解决现今国内外急需解决的疫苗效力检验动物替代问题提供了技术手段。
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公开(公告)号:CN101236204B
公开(公告)日:2012-09-05
申请号:CN200710194664.6
申请日:2007-11-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/52
Abstract: 本发明涉及一种用于对偶蹄类动物O型口蹄疫抗体水平进行快速检测的胶体金试纸条,这种试纸条的制备,以及其具体检测的方法。试纸条的底板上固定有多孔纤维材料构成的加样吸收垫、位于加样吸收垫尾端并与加样吸收垫相连的免疫金标层、和由硝酸纤维膜构成的检测段,以及位于检测段尾端与检测段相连的用吸水材料构成的吸收段,质控线为抗O型口蹄疫病毒的兔或豚鼠IgG抗体,检测线包由O型口蹄疫病毒构成,检测段的检测线和免疫金标层吸附的胶体金标记的O型口蹄疫病毒是天然病毒,或者是基因重组表达口蹄疫病毒,或者是口蹄疫病毒的分解抗原。
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公开(公告)号:CN116574848A
公开(公告)日:2023-08-11
申请号:CN202310732068.8
申请日:2023-06-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q1/6806 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于LAMP‑CRISPRCas12a检测猪圆环2型病毒的引物及检测方法,包括以下操作步骤:(1)组织样品的处理;(2)病毒DNA的提取;(3)引物设计;(4)PCR产物回收及纯化;(5)标准质粒的构建;(6)重组质粒鉴定;(7)质粒DNA小量抽提;(8)LAMP引物筛选及扩增;(9)猪圆环病毒2型LAMP‑CRISPR‑Cas12a检测体系建立;本发明在CRISPR技术的基础上与LAMP技术相结合,建立了PCV2的快速检测方法,该方法敏感性高、特异性高、操作简单、检测时间短、结果分析简单、抗干扰性强、不需要复杂仪器设备。这种低价、高度敏感和特异性强、便携式和可视化的方法将是现场PCV2检测的替代方法,这可能有助于及时监测和快速制定控制PCV2的策略。
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公开(公告)号:CN114921589A
公开(公告)日:2022-08-19
申请号:CN202210524501.4
申请日:2022-05-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6806 , C12Q1/686 , C07K16/08 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于单域抗体9‑4‑1免疫磁珠的直扩检测山羊痘病毒的试剂盒及其应用。所述试剂盒包括SEQ ID NO.1所示的山羊痘病毒单域抗体9‑4‑1通过链霉亲和素‑生物素与磁珠进行偶联得到的单域抗体9‑4‑1免疫磁珠。本发明使用切胶纯化的单域抗体9‑4‑1蛋白与磁珠进行偶联获得免疫磁珠,免疫磁珠富集山羊痘病毒后,无需提取基因组RNA,可直接对其进行扩增。本发明的提出克服了山羊痘病毒由于形成夹皮时间久,不容易在病毒复制高峰期发现,采集病料病毒含量低微,所以检出率低,容易漏检等现象;以及提取基因组DNA时费时、费财、费力,操作时污染环境等一系列难题,而且高效、灵敏、特异、稳定、实用,本发明的提出为山羊痘病毒病的检测提供了一种高效的技术手段。
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公开(公告)号:CN103091270B
公开(公告)日:2015-09-09
申请号:CN201310055748.7
申请日:2013-01-17
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N21/31 , G01N33/569 , G01N33/544 , G01N33/535
Abstract: 本发明公开了一种亚洲Ⅰ型口蹄疫146S抗原定量ELISA检测方法,包括以下步骤:1)储备亚洲Ⅰ型口蹄疫标准对照抗原;2)纯化定量亚洲Ⅰ型口蹄疫标准对照抗原146S;3)建立亚洲Ⅰ型口蹄疫间接夹心ELISA方法;4)绘制标准对照抗原标准曲线;5)计算被检样品146S抗原含量;6)检测敏感性和特异性。并提供了应用此检测方法的试剂盒。本发明的有益效果为:本发明提供的一种亚洲Ⅰ型口蹄疫146S抗原定量ELISA检测方法在测定口蹄疫抗原的含量时,既能计算出抗原含量,又能对抗原进行分型,以其原理制备的试剂盒,敏感、特异、操作简单、省时省力、稳定性好、适合于批量检测,且能区分血清型。
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公开(公告)号:CN103091270A
公开(公告)日:2013-05-08
申请号:CN201310055748.7
申请日:2013-01-17
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N21/31 , G01N33/569 , G01N33/544 , G01N33/535
Abstract: 本发明公开了一种亚洲Ⅰ型口蹄疫146S抗原定量ELISA检测方法,包括以下步骤:1)储备亚洲Ⅰ型口蹄疫标准对照抗原;2)纯化定量亚洲Ⅰ型口蹄疫标准对照抗原146S;3)建立亚洲Ⅰ型口蹄疫间接夹心ELISA方法;4)绘制标准对照抗原标准曲线;5)计算被检样品146S抗原含量;6)检测敏感性和特异性。并提供了应用此检测方法的试剂盒。本发明的有益效果为:本发明提供的一种亚洲Ⅰ型口蹄疫146S抗原定量ELISA检测方法在测定口蹄疫抗原的含量时,既能计算出抗原含量,又能对抗原进行分型,以其原理制备的试剂盒,敏感、特异、操作简单、省时省力、稳定性好、适合于批量检测,且能区分血清型。
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公开(公告)号:CN103091490B
公开(公告)日:2016-01-20
申请号:CN201310017209.4
申请日:2013-01-17
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种A型口蹄疫146S抗原定量ELISA检测方法,包括以下步骤:1)储备A型口蹄疫标准对照抗原;2)纯化定量A型口蹄疫标准对照抗原146S;3)建立A型口蹄疫间接夹心ELISA方法;4)绘制标准对照抗原标准曲线;5)计算被检样品146S抗原含量;6)检测敏感性和特异性。并提供了应用此检测方法的试剂盒。本发明的有益效果为:本发明提供的一种A型口蹄疫146S抗原定量ELISA检测方法在测定口蹄疫抗原的含量时,既能计算出抗原含量,又能对抗原进行分型,以其原理制备的试剂盒,敏感、特异、操作简单、省时省力、稳定性好、适合于批量检测,且能区分血清型。
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公开(公告)号:CN103884839B
公开(公告)日:2015-08-19
申请号:CN201210555104.X
申请日:2012-12-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种用于定量检测FMDV有效抗原的反向液相阻断ELISA方法。本发明通过将标准阳性血清的稀释方法固定,即固定血清抗体的量,将待检抗原作系列稀释与之作用,同时设置已知有效抗原含量的标准对照抗原,基于阳性血清在某一恒定的抗体效价下其50%阻断有效抗原量是一定的这一抗原抗体反应原理,成功建立了一种对口蹄疫病毒有效抗原定量的新技术,命名为反向液相阻断ELISA。该方法继承了液相阻断ELISA方法用于测定血清抗体时可分型、操作简单、重复性好、高敏感性、高特异性、可批量检测等优点,同时实现了对FMDV的有效抗原量的定量测定,为解决现今国内外急需解决的疫苗效力检验动物替代问题提供了技术手段。
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