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公开(公告)号:CN119955944A
公开(公告)日:2025-05-09
申请号:CN202510030997.3
申请日:2025-01-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种鉴定口蹄疫病毒持续感染牛的分子标志物组合及其应用。所述的分子标志物组合由IL‑10、IL‑1β以及CXCL8基因组成。在口蹄疫病毒持续感染牛中,IL‑10、IL‑1β以及CXCL8基因的表达水平均在攻毒后7天显著低于康复牛,而在攻毒后14天显著高于康复牛。对这三个基因进行诊断的敏感性和特异性分析。结果显示,在7dpc时,AUC为1.000(95%置信区间,0.872‑1.000),诊断的敏感性和特异性均达到了100%。在14dpc时,AUC为1.000(95%置信区间,0.872‑1.000),诊断的敏感性和特异性也均达到了100%。该结果说明IL‑10、IL‑1β、CXCL8可作为一个分子标志物组合,在口蹄疫病毒感染早期(
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公开(公告)号:CN119162247A
公开(公告)日:2024-12-20
申请号:CN202411485227.X
申请日:2024-10-23
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明提供了一种稳定表达猪瘟病毒疫苗株E2蛋白的悬浮HEK293细胞系的构建方法。本发明构建了表达猪瘟病毒疫苗株E2蛋白的悬浮HEK293细胞系。在细胞稳定传代试验中证实,当HEK‑E2细胞系能够稳定传10代时,培养上清中E2蛋白的表达量稳定,产量稳定保持在1.0‑1.2 mg/ml,亲和层析纯化获得的E2蛋白纯度达到95%,双抗体夹心ELISA确定其具有很好的反应原性,206佐剂乳化E2蛋白免疫猪能够诱导高水平的血清抗体,攻击强毒后能够得到完全保护。本发明构建的HEK‑293细胞系能够稳定分泌表达的CSFV E2蛋白的具备开发为重组E2基因工程疫苗的应用前景。
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公开(公告)号:CN117625551A
公开(公告)日:2024-03-01
申请号:CN202311591386.3
申请日:2023-11-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及基因工程学和免疫学技术领域,具体涉及一种能够表达口蹄疫病毒颗粒样的细胞池构建与应用。本发明通过构建含有口蹄疫病毒的重组质粒,并进一步转染至宿主细胞之后筛选得到了一种稳健表达口蹄疫病毒样颗粒的重组多克隆细胞池,为进一步防范口蹄疫病毒,以及制备口蹄疫病毒疫苗提供新策略。本发明获得的重组中国卵巢细胞池不仅稳健表达口蹄疫病毒样颗粒,而且通过该重组中国卵巢细胞池制备的口蹄疫病毒样颗粒具有良好的免疫原性。
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公开(公告)号:CN117186192A
公开(公告)日:2023-12-08
申请号:CN202311180688.1
申请日:2023-09-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/09 , C07K16/10 , C12N15/42 , C12N15/13 , A61K39/135 , A61P31/14 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于兽医生物制品领域,具体的涉及动物疾病预防,更具体涉及口蹄疫病毒保守免疫抗原优势表位的筛选。本发明公开了一种口蹄疫病毒的T细胞抗原表位多肽。本发明筛选出的口蹄疫病毒两种保守的非结构蛋白2C、2B的T的抗原表位多肽,能激活很强的细胞免疫应答,且免疫效果良好,产生了更好的中和性抗体以及产生了完全的保护。
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公开(公告)号:CN117164706A
公开(公告)日:2023-12-05
申请号:CN202311135472.3
申请日:2023-09-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于抗体工程制药领域,具体的涉及一种靶向塞内卡病毒A的纳米抗体筛选及其应用,具体公开了一种塞内卡病毒A的单域抗体或其抗原结合片段。该重组纳米抗体的免疫原性风险低,能有效阻断SVA病毒感染IBRS‑2细胞,具有显著的SVA中和活性;因此,本发明提供的纳米抗体序列及表达载体在SVA鉴定中和表位、预防或治疗、诊断中具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN116769831A
公开(公告)日:2023-09-19
申请号:CN202310453994.1
申请日:2023-04-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/85 , C12N15/42 , C07K14/09 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及生物医学领域,具体涉及一种针对口蹄疫病毒样颗粒的转座‑诱导表达系统,所述系统包括编码转座酶、反向反式激活因子、诱导剂、口蹄疫病毒样颗粒的核酸,所述转座酶可以是编码PiggyBac(PB)的转座酶及其变体,所述反向反式激活因子为可以是反向反式激活因子本身及其变体,所述诱导剂为四环素及其衍生物,所述口蹄疫病毒样颗粒的核酸为优化后的序列P12A3Copti,如SEQ ID NO:3所示。本发明经过构建PB转座‑四环素诱导表达系统,并将优化后的P12A3Copti在该系统表达,提高了P12A和3C基因稳定整合至细胞基因组的成功率,同时FMDV衣壳蛋白的表达量增加了15‑30倍。
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公开(公告)号:CN114540393B
公开(公告)日:2023-07-21
申请号:CN202210236002.5
申请日:2022-03-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/70 , C12N1/21 , C07K14/01 , C12P21/06 , C07K1/34 , C07K1/22 , C07K1/36 , A61K39/12 , A61P31/20 , C07K16/08 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一种猪圆环病毒3型病毒样颗粒及其构建方法和应用,属于病毒样颗粒制备技术领域。本发明提供了一种重组质粒,所述重组质粒以pSMA质粒作为基础载体,插入优化好的Cap全长基因,所述优化好的Cap全长基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明克服了现有真核表达系统及传统原核表达系统的不足,使利用原核表达系统可溶性表达猪圆环病毒3型完整Cap蛋白并成功实现病毒样颗粒的制备方法成为可能,且得到的病毒样颗粒免疫原性高,成本低。
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公开(公告)号:CN114540393A
公开(公告)日:2022-05-27
申请号:CN202210236002.5
申请日:2022-03-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/70 , C12N1/21 , C07K14/01 , C12P21/06 , C07K1/34 , C07K1/22 , C07K1/36 , A61K39/12 , A61P31/20 , C07K16/08 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一种猪圆环病毒3型病毒样颗粒及其构建方法和应用,属于病毒样颗粒制备技术领域。本发明提供了一种重组质粒,所述重组质粒以pSMA质粒作为基础载体,插入优化好的Cap全长基因,所述优化好的Cap全长基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明克服了现有真核表达系统及传统原核表达系统的不足,使利用原核表达系统可溶性表达猪圆环病毒3型完整Cap蛋白并成功实现病毒样颗粒的制备方法成为可能,且得到的病毒样颗粒免疫原性高,成本低。
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公开(公告)号:CN113955762A
公开(公告)日:2022-01-21
申请号:CN202111367802.2
申请日:2021-11-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于材料技术领域,具体涉及一种介孔硅纳米材料及其制备方法和应用。所述的介孔硅纳米材料具有核‑锥结构;其内部为二氧化硅实心核,外部为从核向外放射的树枝状介孔硅壳层。二氧化硅核大小为108±10nm;介孔硅壳层厚度为66±10nm。所述的介孔硅纳米材料为球形形貌,粒径为237±10nm。本发明的优点:介孔硅纳米材料比表面积和孔体积大、粒径均一、结构稳定、生物安全性高。可以实现对口蹄疫病毒样颗粒抗原的负载和缓慢释放,具有较高的蛋白负载能力、极低的细胞毒性、良好的血液相容性及较低的组织器官毒性。作为佐剂,可以增强免疫应答水平和提高攻毒保护率效果。
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公开(公告)号:CN109799342A
公开(公告)日:2019-05-24
申请号:CN201811491852.X
申请日:2018-12-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/535
Abstract: 本发明公开一种采用O型口蹄疫病毒样颗粒(VLPs)制备的检测试剂盒及制备方法。本发明的试剂盒的制备方法是将HRP直接标记在跟被检抗体同时作用的竞争性抗体上,其内酶标板包被的O型口蹄疫病毒样颗粒是由O型口蹄疫病毒的结构蛋白VP0、VP1和经优化的VP3组装而成。本发明采用的VLPs能高效组装,且不影响其诊断效率,有利于降低诊断制剂的成本。本发明方法相对现有技术的检测步骤有所减少,实验操作简单,工作量小,用时短,并可提高诊断试剂的特异性和敏感性。
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