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公开(公告)号：CN117964778A
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202410066560.0
申请日：2024-01-16
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K19/00 , C12N9/88 , C12N15/81 , C07K1/22 , C07K1/34 , C07K1/36 , A61K39/12 , A61K39/385 , A61P31/20 , C07K16/08 , C12R1/84
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒(African swine fever virus，ASFV)P14.5蛋白纳米颗粒及其制备方法和应用。所述蛋白纳米颗粒由蛋白质单体自组装形成，所述蛋白质单体由非洲猪瘟病毒P14.5蛋白和骨架蛋白通过连接肽连接后得到。所述骨架蛋白为mi3，其编码核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示，所述P14.5蛋白的编码核苷酸序列为SEQ ID NO：2所示。本发明利用蛋白骨架的自组装特性以及N端的可修饰性，将ASFV P14.5结构蛋白展示在蛋白骨架的外表面，获得了具有较高免疫效力及较高稳定性的非洲猪瘟纳米颗粒抗原，可用于制备抗ASFV特异性抗体或预防或治疗由ASFV感染引起的疾病的药物。本发明的提出为非洲猪瘟病毒的防控提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN117815376A
公开(公告)日：2024-04-05
申请号：CN202311817155.X
申请日：2023-12-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K39/135 , C12N5/0784 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种口蹄疫DC疫苗、制备方法及其应用。本发明通过在体外使用FMDV灭活抗原刺激源自猪血液PBMC制备的DC，并在不同激动剂和细胞因子诱导下得到成熟DC，制备出具有增强交叉递呈作用的DC疫苗，回输给猪后刺激适应性免疫应答激活，可以产生细胞毒性T细胞并增强中和抗体的产生。攻毒保护试验发现，该DC疫苗可以产生完全的保护性应答，而且没有病毒血症的产生。因此，本发明为猪口蹄疫的预防提供了一种有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN115057941A
公开(公告)日：2022-09-16
申请号：CN202210501097.9
申请日：2022-05-09
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K19/00 , C07K14/09 , C07K14/00 , C12N15/70 , A61K39/135 , A61K39/295 , A61P31/14 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种AO双价口蹄疫病毒表位嵌合纳米颗粒的制备方法及应用。本发明的AO双价口蹄疫病毒表位嵌合纳米颗粒由A型及O型口蹄疫病毒的表位串联两种骨架蛋白组成。本发明通过选择A型及O型口蹄疫病毒结构蛋白及非机构蛋白的T细胞表位及B细胞表位，串联至骨架蛋白A上，再选择具有免疫增强效果的多个肽段串联至骨架蛋白B上，之后将优化后的两个蛋白的基因序列插入到原核载体中，通过原核系统表达、纯化、自组装后得到所述的AO双价口蹄疫病毒表位嵌合纳米颗粒。本发明的AO双价口蹄疫病毒表位嵌合纳米颗粒可用于制备预防A型及O型口蹄疫病毒引起的疾病的疫苗。此外，本发明中的纳米颗粒骨架还可用于串联其他病毒的表位制备相关疫苗。
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公开(公告)号：CN107261135B
公开(公告)日：2020-11-10
申请号：CN201710553111.9
申请日：2017-07-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所
IPC: A61K39/39 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了金纳米颗粒作为佐剂在制备病毒样颗粒疫苗中的应用。本发明尝试将金纳米颗粒作为佐剂用于制备病毒样颗粒(VLPs)疫苗，其中，所述金纳米颗粒优选为金纳米笼或金纳米星。结果显示，金纳米颗粒与VLPs结合产物注射进入动物体内后，能有效的释放运载的VLPs，最终诱导特异的抗体免疫反应与T‑淋巴细胞免疫反应。这些结果表明，金纳米颗粒可以作为VLPs的佐剂在动物机体内有效刺激机体产生特异的免疫反应。本发明的提出为VLPs疫苗的制备提供了一种能够有效的提高口蹄疫病毒VLPs的免疫效果，更好的促进VLPs疫苗产生细胞免疫与体液免疫的佐剂。
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公开(公告)号：CN111848808A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010765401.1
申请日：2020-08-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K17/14 , C07K14/09 , C01B25/32 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及一种矿化口蹄疫病毒样颗粒，是由病毒样颗粒和颗粒表面覆盖的矿化外壳构成，所述的口蹄疫病毒样颗粒是由口蹄疫病毒的结构蛋白VP0、结构蛋白VP1和结构蛋白VP3组装而成，然后通过矿化液矿化处理获得了表面覆盖的矿化外壳。矿化液是由含有钙离子和磷酸根离子的材料构成，其中钙离子和磷酸根离子的浓度比为1.33-2.0，通过矿化处理在口蹄疫病毒样颗粒表面形成35-50nm厚的矿化外壳。本发明矿化口蹄疫病毒样颗粒具有提高病毒样颗粒稳定性、进入细胞内的数量显著增加、诱导机体产生更多的特异性抗体和中和抗体。
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公开(公告)号：CN107475207B
公开(公告)日：2020-10-16
申请号：CN201710539048.3
申请日：2017-07-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 浙江大学
IPC: C12N7/04 , C07K19/00 , C12N15/70 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种矿化口蹄疫病毒样颗粒及其制备方法和应用。本发明利用口蹄疫VLPs大肠杆菌表达组装技术平台，通过基因工程手段，将三种能有效富集钙离子的矿化肽分别插入到口蹄疫病毒结构蛋白VP1的loop环中，结果表明，嵌合矿化肽的VP1与口蹄疫病毒的结构蛋白VP0以及VP3在大肠杆菌中能够成功表达并组装成完整的VLPs，且对组装效率并未造成影响，后用矿化剂成功实现了对病毒样颗粒的矿化，同时提高了口蹄疫病毒VLPs的组装效果。本发明的提出推动了蛋白类疫苗由冷链疫苗向常温疫苗转化的步伐，为常温疫苗的应用提供了新的技术手段。
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公开(公告)号：CN119955944A
公开(公告)日：2025-05-09
申请号：CN202510030997.3
申请日：2025-01-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种鉴定口蹄疫病毒持续感染牛的分子标志物组合及其应用。所述的分子标志物组合由IL‑10、IL‑1β以及CXCL8基因组成。在口蹄疫病毒持续感染牛中，IL‑10、IL‑1β以及CXCL8基因的表达水平均在攻毒后7天显著低于康复牛，而在攻毒后14天显著高于康复牛。对这三个基因进行诊断的敏感性和特异性分析。结果显示，在7dpc时，AUC为1.000(95％置信区间，0.872‑1.000)，诊断的敏感性和特异性均达到了100％。在14dpc时，AUC为1.000(95％置信区间，0.872‑1.000)，诊断的敏感性和特异性也均达到了100％。该结果说明IL‑10、IL‑1β、CXCL8可作为一个分子标志物组合，在口蹄疫病毒感染早期(
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公开(公告)号：CN117625551A
公开(公告)日：2024-03-01
申请号：CN202311591386.3
申请日：2023-11-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及基因工程学和免疫学技术领域，具体涉及一种能够表达口蹄疫病毒颗粒样的细胞池构建与应用。本发明通过构建含有口蹄疫病毒的重组质粒，并进一步转染至宿主细胞之后筛选得到了一种稳健表达口蹄疫病毒样颗粒的重组多克隆细胞池，为进一步防范口蹄疫病毒，以及制备口蹄疫病毒疫苗提供新策略。本发明获得的重组中国卵巢细胞池不仅稳健表达口蹄疫病毒样颗粒，而且通过该重组中国卵巢细胞池制备的口蹄疫病毒样颗粒具有良好的免疫原性。
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公开(公告)号：CN117186192A
公开(公告)日：2023-12-08
申请号：CN202311180688.1
申请日：2023-09-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/09 , C07K16/10 , C12N15/42 , C12N15/13 , A61K39/135 , A61P31/14 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于兽医生物制品领域，具体的涉及动物疾病预防，更具体涉及口蹄疫病毒保守免疫抗原优势表位的筛选。本发明公开了一种口蹄疫病毒的T细胞抗原表位多肽。本发明筛选出的口蹄疫病毒两种保守的非结构蛋白2C、2B的T的抗原表位多肽，能激活很强的细胞免疫应答，且免疫效果良好，产生了更好的中和性抗体以及产生了完全的保护。
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公开(公告)号：CN116769831A
公开(公告)日：2023-09-19
申请号：CN202310453994.1
申请日：2023-04-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/85 , C12N15/42 , C07K14/09 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及生物医学领域，具体涉及一种针对口蹄疫病毒样颗粒的转座‑诱导表达系统，所述系统包括编码转座酶、反向反式激活因子、诱导剂、口蹄疫病毒样颗粒的核酸，所述转座酶可以是编码PiggyBac(PB)的转座酶及其变体，所述反向反式激活因子为可以是反向反式激活因子本身及其变体，所述诱导剂为四环素及其衍生物，所述口蹄疫病毒样颗粒的核酸为优化后的序列P12A3Copti，如SEQ ID NO:3所示。本发明经过构建PB转座‑四环素诱导表达系统，并将优化后的P12A3Copti在该系统表达，提高了P12A和3C基因稳定整合至细胞基因组的成功率，同时FMDV衣壳蛋白的表达量增加了15‑30倍。
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