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公开(公告)号：CN119979484A
公开(公告)日：2025-05-13
申请号：CN202510189224.X
申请日：2025-02-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明提供了一种高抗原产量的重组口蹄疫病毒株及其构建方法和应用，属于生物技术领域。一种重组口蹄疫病毒株，其中L蛋白是第108位氨基酸发生突变或缺失的突变L蛋白。本发明发现宿主蛋白RAB20过表达抑制FMDV的复制，且通过蛋白酶体通路降解L蛋白，进而抑制病毒复制；本发明通过在FMDV L蛋白中对关键氨基酸位点(108)进行突变，构建了不被宿主蛋白RAB20抑制复制的重组口蹄疫病毒株，所述重组病毒能够稳定传代，且在BHK‑21细胞上具有高病毒滴度的特性，提高了病毒滴度及抗原产量，能够用于FMDV疫苗制备，具备良好的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119979607A
公开(公告)日：2025-05-13
申请号：CN202510190001.5
申请日：2025-02-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明提供了一种稳定传代的重组口蹄疫病毒毒株及构建方法和应用，属于生物医药技术领域。本发明根据宿主细胞KRT31蛋白对FMDV的复制抑制性，通过在L蛋白中引入点突变，消除KRT31蛋白降解L蛋白及抑制FMDV复制的能力。本发明成功构建并拯救了L蛋白关键氨基酸位点突变的重组口蹄疫病毒株，突变位点能稳定遗传，且不影响口蹄疫病毒的复制，提高了病毒滴度，具有良好的生产性能，可用于制备重组口蹄疫疫苗株。
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公开(公告)号：CN118308451A
公开(公告)日：2024-07-09
申请号：CN202410531923.3
申请日：2024-04-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及猪RPS11蛋白在制备抑制口蹄疫病毒感染和复制药物中的应用。本发明首先发现，过表达宿主RPS11基因，能够抑制口蹄疫病毒的感染和复制，即RPS11可作为靶点用于筛选抑制口蹄疫病毒感染和复制的药物；本发明还提供了一种口蹄疫病毒的抑制细胞系和相应的制备方法，获得稳定过表达RPS11基因的细胞系，可用于制备抗口蹄疫病毒感染的细胞或动物模型，在临床、实验室研究上具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN119979606A
公开(公告)日：2025-05-13
申请号：CN202510187991.7
申请日：2025-02-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明提供了一种L蛋白突变的重组口蹄疫病毒株及在疫苗制备中的应用，属于生物医药技术领域。本发明首先发现在宿主细胞中过表达CISD2蛋白会抑制FMDV的复制，并且解析了抑制机制，具体包括CISD2通过抑制L蛋白的表达，尤其是通过蛋白酶体途径引起L蛋白的降解，进而抑制FMDV复制。本发明还鉴定出了CISD2蛋白降解L蛋白的关键位点，利用反向遗传技术，通过在L蛋白中引入关键位点氨基酸突变，成功构建并拯救得到L蛋白关键氨基酸位点突变的重组口蹄疫病毒，消除了CISD2蛋白降解L蛋白及抑制FMDV复制的能力，提升了病毒滴度，具有良好的生产性能，可用于制备重组口蹄疫病毒株及重组疫苗株。
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公开(公告)号：CN118703423A
公开(公告)日：2024-09-27
申请号：CN202410961165.9
申请日：2024-07-17
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12N5/071 , C12N5/0786 , C12N7/00 , C12N7/02 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种高效分离非洲猪瘟病毒的PAMs/WSh细胞及其分离方法与应用，本发明在常规分离PAMs细胞并重悬后，依次用不同孔径细胞筛过滤除杂、用不含RNA酶的无核酸酶水在20 s内重悬，然后加入含90%胎牛血清+10%的DMSO的细胞冻存液冻存；复苏细胞时先用含两性双抗和庆大双抗RPMI‑1640培养基混悬细胞，过滤离心后用含两性双抗和庆大双抗、12%胎牛血清的1640培养基重悬后培养6‑8 h，接毒，收毒时间为4‑5 d。通过排除红细胞干扰、去除可能存在的细胞团或碎片、筛选目标细胞大小的单细胞悬液，提高了细胞活力，提升了病毒分离率和拷贝数，同时也克服了细胞冻存周期短的问题，获得的PAMs/WSh细胞为非洲猪瘟病毒的高效分离及病毒感染致病机制研究提供了有利工具。
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公开(公告)号：CN118064375A
公开(公告)日：2024-05-24
申请号：CN202410056940.6
申请日：2024-01-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , C07K14/065 , C07K1/22 , C12N15/39 , C12N15/70 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种抗羊口疮病毒(ORFV)B2L蛋白抗体阻断ELISA检测试剂盒及其应用。所述的试剂盒包括HRP标记的抗羊口疮病毒B2L蛋白的单克隆抗体，所述的抗羊口疮病毒B2L蛋白的单克隆抗体由保藏编号为CCTCC NO：C2023353的杂交瘤细胞株分泌产生。本发明所述的抗羊口疮病毒B2L蛋白的单克隆抗体具有效价高、性质稳定、纯度高、特异性强等特点，能够用于建立ORFV抗体阻断ELISA试剂盒，进而用于建立ORFV的免疫学检测方法，具有良好的应用前景。且本发明使用HRP直接标记单抗可减少因酶标二抗间接反应带来的非特异性反应。本发明的试剂盒能够用于大批量样本的检测，成本低、简单快速且灵敏。本发明的提出为羊口疮的防控提供了有效技术手段。
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