公开(公告)号：CN112522444A

公开(公告)日：2021-03-19

申请号：CN202011529612.1

申请日：2020-12-22

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 郑海学 ,  杨波 ,  田宏 ,  石正旺 ,  李攀 ,  王丽娟 ,  麻园 ,  罗俊聪 ,  万颖 ,  宋锐 ,  付辉 ,  袁克湖 ,  朱海

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒LAMP‑CRISPR检测用组合物、检测试剂盒和检测方法，该组合物包括LAMP扩增引物、crRNA和ssDNA荧光报告探针。该试剂盒包括上述组合物，还包括用于LAMP扩增的LAMP反应缓冲液、Bst DNA聚合酶和p72质粒模板，以及用于CRISPR Cas12a检测体系的LbCas12a、RNase抑制剂、CRISPR反应缓冲液。本发明采用LAMP方法与CRISPR相结合的技术，可高效、精准并且不需借助大型仪器达到检测结果可视化的目的，为ASFV的快速诊断提供了新的技术支持。本发明建立的LAMP‑CRISPR对ASFV抗原分子的检测具有较高的灵敏度，能够检测到单拷贝即7×100copies/μL的质粒浓度。

公开(公告)号：CN113092753A

公开(公告)日：2021-07-09

申请号：CN202110364113.X

申请日：2021-04-03

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 郑海学 ,  田宏 ,  万颖 ,  石正旺 ,  罗俊聪 ,  彭高闯 ,  王丽娟 ,  茹毅 ,  麻园 ,  周改静 ,  宋锐

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明公开了一种用于全程监测非洲猪瘟病毒抗体的胶体金双联检测试纸条及其制备方法，所述试纸条包括PVC底板，所述的PVC底板上从左到右依次设置有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫，所述硝酸纤维素膜上设有检测线和质控线，所述结合垫包被胶体金标记的ASFV p30蛋白和ASFV p72蛋白，所述检测线包被ASFV p72和ASFV p30蛋白，所述质控线C包被抗ASFV p30蛋白单克隆抗体和/或抗ASFV p72蛋白单克隆抗体；本发明通过优化结合垫的制备，实现了非洲猪瘟病毒抗体的全程监控，相比于单个的p30或p72试纸条可以更加准确的获悉机体的感染时期，同时结合其特异性好、灵敏性较高，有望成为非洲猪瘟抗体的现场或者实验室检测的技术手段，为非洲猪瘟的精确、快速诊断提供一种新思路。