公开(公告)号：CN112522444A

公开(公告)日：2021-03-19

申请号：CN202011529612.1

申请日：2020-12-22

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 郑海学 ,  杨波 ,  田宏 ,  石正旺 ,  李攀 ,  王丽娟 ,  麻园 ,  罗俊聪 ,  万颖 ,  宋锐 ,  付辉 ,  袁克湖 ,  朱海

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒LAMP‑CRISPR检测用组合物、检测试剂盒和检测方法，该组合物包括LAMP扩增引物、crRNA和ssDNA荧光报告探针。该试剂盒包括上述组合物，还包括用于LAMP扩增的LAMP反应缓冲液、Bst DNA聚合酶和p72质粒模板，以及用于CRISPR Cas12a检测体系的LbCas12a、RNase抑制剂、CRISPR反应缓冲液。本发明采用LAMP方法与CRISPR相结合的技术，可高效、精准并且不需借助大型仪器达到检测结果可视化的目的，为ASFV的快速诊断提供了新的技术支持。本发明建立的LAMP‑CRISPR对ASFV抗原分子的检测具有较高的灵敏度，能够检测到单拷贝即7×100copies/μL的质粒浓度。