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公开(公告)号:CN116445486B
公开(公告)日:2023-12-05
申请号:CN202310322418.3
申请日:2023-03-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/12 , C12N7/00 , C12N5/10 , A61K39/135 , A61K38/17 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12R1/91 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及KLHL34敲除细胞系的构建及作为小RNA病毒科病毒疫苗生产细胞系的应用。本发明首先发现,抑制宿主细胞中KLHL34基因表达能促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制;其次,本发明提供了一种特异性靶向KLHL34的sgRNA,所述sgRNA能够特异性靶向KLHL34基因,结合CRISPR‑Cas9技术实现了KLHL34基因的敲除,获得的单克隆细胞系能够显著促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制,提高FMDV
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公开(公告)号:CN116870145A
公开(公告)日:2023-10-13
申请号:CN202310648279.3
申请日:2023-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 郝荣增 , 朱紫祥 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 毛箬青 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
IPC: A61K39/12 , A61K39/385 , A61K9/14 , A61K47/34 , A61K47/32 , A61K47/36 , A61K47/10 , A61K47/42 , A61K47/02 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种九组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒抗原P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、E165R蛋白、C129R蛋白、P72蛋白和Y蛋白组成的九组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合,其中至少一种抗原与纳米颗粒载体形成含有所述抗原或其抗原表位的纳米颗粒;所述九组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合能够刺激机体产生较强的免疫反应;制备的九组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险,突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题。
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公开(公告)号:CN116589538A
公开(公告)日:2023-08-15
申请号:CN202310373357.3
申请日:2023-04-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 朱紫祥 , 毛箬青 , 郝荣增 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
IPC: C07K14/01 , C07K19/00 , A61K39/12 , A61K39/295 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合,所述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合能够产生较强的免疫反应;其次本发明制备了包含上述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合的七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗,所述七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险,突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题,证明了非洲猪瘟亚单位疫苗研究方案的可行性。
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公开(公告)号:CN116574848A
公开(公告)日:2023-08-11
申请号:CN202310732068.8
申请日:2023-06-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q1/6806 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于LAMP‑CRISPRCas12a检测猪圆环2型病毒的引物及检测方法,包括以下操作步骤:(1)组织样品的处理;(2)病毒DNA的提取;(3)引物设计;(4)PCR产物回收及纯化;(5)标准质粒的构建;(6)重组质粒鉴定;(7)质粒DNA小量抽提;(8)LAMP引物筛选及扩增;(9)猪圆环病毒2型LAMP‑CRISPR‑Cas12a检测体系建立;本发明在CRISPR技术的基础上与LAMP技术相结合,建立了PCV2的快速检测方法,该方法敏感性高、特异性高、操作简单、检测时间短、结果分析简单、抗干扰性强、不需要复杂仪器设备。这种低价、高度敏感和特异性强、便携式和可视化的方法将是现场PCV2检测的替代方法,这可能有助于及时监测和快速制定控制PCV2的策略。
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公开(公告)号:CN114540393B
公开(公告)日:2023-07-21
申请号:CN202210236002.5
申请日:2022-03-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/70 , C12N1/21 , C07K14/01 , C12P21/06 , C07K1/34 , C07K1/22 , C07K1/36 , A61K39/12 , A61P31/20 , C07K16/08 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一种猪圆环病毒3型病毒样颗粒及其构建方法和应用,属于病毒样颗粒制备技术领域。本发明提供了一种重组质粒,所述重组质粒以pSMA质粒作为基础载体,插入优化好的Cap全长基因,所述优化好的Cap全长基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明克服了现有真核表达系统及传统原核表达系统的不足,使利用原核表达系统可溶性表达猪圆环病毒3型完整Cap蛋白并成功实现病毒样颗粒的制备方法成为可能,且得到的病毒样颗粒免疫原性高,成本低。
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公开(公告)号:CN115644165A
公开(公告)日:2023-01-31
申请号:CN202210780307.2
申请日:2022-07-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A01N1/02
Abstract: 本发明公开一种用于保存动反刍动物食道‑咽部分泌物(O‑P液)药物。本发明的合物包括:磷酸二氢钾0.08g~0.24g、磷酸氢二钠、0.46g~1.44g、氯化钠2.7g~8.0g、氯化钾、0.05g~0.2g,和酚红0.01g~0.5g。本发明的组合物为固体,稳定性更高,可常规温度保存更长时间,具有携带方便,价格低廉的优点,并可指示采集样品是否成功,可大大提高采集样品的效率,从而提高样品一次检测通过的概率,最终在实际工作中取得更好的经济效益。
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公开(公告)号:CN114921589A
公开(公告)日:2022-08-19
申请号:CN202210524501.4
申请日:2022-05-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6806 , C12Q1/686 , C07K16/08 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于单域抗体9‑4‑1免疫磁珠的直扩检测山羊痘病毒的试剂盒及其应用。所述试剂盒包括SEQ ID NO.1所示的山羊痘病毒单域抗体9‑4‑1通过链霉亲和素‑生物素与磁珠进行偶联得到的单域抗体9‑4‑1免疫磁珠。本发明使用切胶纯化的单域抗体9‑4‑1蛋白与磁珠进行偶联获得免疫磁珠,免疫磁珠富集山羊痘病毒后,无需提取基因组RNA,可直接对其进行扩增。本发明的提出克服了山羊痘病毒由于形成夹皮时间久,不容易在病毒复制高峰期发现,采集病料病毒含量低微,所以检出率低,容易漏检等现象;以及提取基因组DNA时费时、费财、费力,操作时污染环境等一系列难题,而且高效、灵敏、特异、稳定、实用,本发明的提出为山羊痘病毒病的检测提供了一种高效的技术手段。
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公开(公告)号:CN114540393A
公开(公告)日:2022-05-27
申请号:CN202210236002.5
申请日:2022-03-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/70 , C12N1/21 , C07K14/01 , C12P21/06 , C07K1/34 , C07K1/22 , C07K1/36 , A61K39/12 , A61P31/20 , C07K16/08 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一种猪圆环病毒3型病毒样颗粒及其构建方法和应用,属于病毒样颗粒制备技术领域。本发明提供了一种重组质粒,所述重组质粒以pSMA质粒作为基础载体,插入优化好的Cap全长基因,所述优化好的Cap全长基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明克服了现有真核表达系统及传统原核表达系统的不足,使利用原核表达系统可溶性表达猪圆环病毒3型完整Cap蛋白并成功实现病毒样颗粒的制备方法成为可能,且得到的病毒样颗粒免疫原性高,成本低。
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公开(公告)号:CN113136361A
公开(公告)日:2021-07-20
申请号:CN202110656116.0
申请日:2021-06-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种羔绵羊睾丸支持细胞及其分离方法和应用,其中,所述羔绵羊睾丸支持细胞SCST的保藏编号为CCTCC No.C2019203。本发明的SCST细胞可直接用于羊口疮病毒的规模化繁殖;也可转染端粒酶基因使其永生化,然后进行压力粗筛、压力分种以及持续传代,得到亚克隆细胞系,将该亚克隆细胞系用于羊口疮病毒的规模化繁殖。所述亚克隆细胞系可以用含国产血清的培养基培养,降低了生产成本,适合规模化生产应用。本发明提供的亚克隆细胞系与常规原代细胞相比,能够明显提高羊口疮病毒的分离率,且羊口疮病毒的致病变时间明显缩短、分离病毒的拷贝数比原代细胞提高100倍以上,可以为羊口疮病毒的规模化繁殖及病毒感染致病机制研究提供工具。
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公开(公告)号:CN107041951B
公开(公告)日:2020-08-04
申请号:CN201710256542.9
申请日:2017-04-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K39/295 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及一种口蹄疫病毒疫苗组合物,特别是重组口蹄疫O型、A型、Asia1型三价疫苗组合物。本发明还涉及一种制备所述口蹄疫病毒疫苗组合物的方法、以及所述口蹄疫病毒疫苗组合物在制备用于预防和/或控制动物口蹄疫疾病的药物中的用途。
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