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公开(公告)号：CN119592742A
公开(公告)日：2025-03-11
申请号：CN202411498537.5
申请日：2024-10-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明提供了一种羊肠道病毒TaqMan实时荧光定量RT‑PCR检测引物和探针，所述引物和探针的核苷酸序列为：上游引物CEV‑qF：5'‑TCCTCCGGRGCCGTGAATGC‑3'；下游引物CEV‑qR：5'‑CCGAAAGTAGTCTGTTCCGC‑3'；探针CEV‑P：5'‑Cy5‑AACCTCCGAGCGTGTGCGCA‑BHQ2‑3'。本发明利用所述引物和探针建立的羊肠道病毒TaqMan实时荧光定量RT‑PCR检测方法快速省时，特异性强，重复性好，敏感性高，最低检测限为23 copies/μL。
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公开(公告)号：CN117285622B
公开(公告)日：2024-08-06
申请号：CN202311351414.4
申请日：2023-10-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种抗塞内卡病毒猪源Fab基因工程抗体及其制备方法和应用。利用单个B细胞抗体技术，从感染和免疫SVA的猪外周血中分选特异性结合SVA的单个B细胞，然后扩增获得SVA抗体IgG的VH和VL基因，并将其插入含CH1和CL的真核表达质粒中，在CHO‑S细胞中表达获得SVA特异性猪源Fab抗体，然后利用ELISA、病毒中和实验、WB和免疫荧光实验验证筛选出SVA高亲和力的特异性猪源Fab基因工程抗体。该技术获得抗体保留了重链和轻链可变区的天然配对，具有基因多样性好，效率高，自然宿主（猪）来源，需要细胞量少等优势。该技术获得的Fab抗体对研究SVA宿主特异性抗原位点的鉴定提供了重要支撑。
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公开(公告)号：CN117106076B
公开(公告)日：2024-07-30
申请号：CN202311351302.9
申请日：2023-10-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种抗塞内卡病毒猪源Fab基因工程抗体及其制备方法和应用。利用单个B细胞抗体技术，从感染和免疫SVA的猪外周血中分选特异性结合SVA的单个B细胞，然后扩增获得SVA抗体IgG的VH和VL基因，并将其插入含CH1和CL的真核表达质粒中，在CHO‑S细胞中表达获得SVA特异性猪源Fab抗体，然后利用ELISA、病毒中和实验、WB和免疫荧光实验验证筛选出SVA高亲和力的特异性猪源Fab基因工程抗体。该技术获得抗体保留了重链和轻链可变区的天然配对，具有基因多样性好，效率高，自然宿主（猪）来源，需要细胞量少等优势。该技术获得的Fab抗体对研究SVA宿主特异性抗原位点的鉴定提供了重要支撑。
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公开(公告)号：CN118344473A
公开(公告)日：2024-07-16
申请号：CN202410667088.6
申请日：2024-05-28
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种口蹄疫病毒O型和A型广谱中和性猪源单克隆抗体及其应用。本发明公开了口蹄疫病毒O型和A型广谱中和性猪源单克隆抗体pOA‑2，其重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明获得1株猪源O型和A型FMDV广谱中和抗体，并鉴定其识别的关键抗原位点，为FMDV抗体药物开发和血清学检测方法建立提供了有力工具。
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公开(公告)号：CN118304393A
公开(公告)日：2024-07-09
申请号：CN202410078575.9
申请日：2024-01-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: A61K39/135 , A61K39/295 , A61K39/39 , A61P31/14 , C07K14/09
Abstract: 为了克服口蹄疫灭活疫苗潜在的生物安全风险以及提高口蹄疫疫苗与流行毒株的匹配度，本发明提供了一种O型口蹄疫病毒复合表位蛋白疫苗及应用。该疫苗由O型口蹄疫病毒复合表位蛋白和佐剂混合、充分乳化后制备而成；O型口蹄疫病毒复合表位蛋白包含近年来流行的O型三种拓扑型四个谱系代表性毒株的优势B细胞表位、FMDV特异性T细胞表位以及通用T细胞表位，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。利用大肠杆菌表达的O型口蹄疫病毒复合表位蛋白制备疫苗并免疫小鼠，发现疫苗免疫小鼠能够产生高水平的口蹄疫病毒特异性抗体和中和抗体，还能够产生细胞免疫应答，该复合表位疫苗有望作为一种新型疫苗应用于口蹄疫的防控中。
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公开(公告)号：CN114854698B
公开(公告)日：2023-09-15
申请号：CN202210682771.8
申请日：2022-06-16
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 李平花 , 卢曾军 , 查晶晶 , 马雪青 , 孙普 , 李冬 , 白兴文 , 曹轶梅 , 李坤 , 袁红 , 付元芳 , 包慧芳 , 刘在新 , 赵志荀 , 王健 , 张克强 , 陈应理 , 张强
Abstract: 本发明提供了一种复制滴度提高的O型口蹄疫病毒株及其构建方法和应用，属于生物制品技术领域。本发明通过口蹄疫病毒的反向遗传操作技术，在嵌合口蹄疫病毒O/XJ/CHA/2017株主要免疫基因重组病毒骨架上，进一步用口蹄疫病毒O/NXYCh/CHA/2018株的G‑H环基因替换其对应基因，构建的重组病毒rHN/XJ/NXGH引起100％致感染细胞病变的时间显著缩短到12h，感染细胞12h的复制滴度提高了5倍以上。重组病毒连续传代，遗传稳定性良好，且G‑H环的替换没有影响疫苗的免疫原性。因此，本发明提供的重组口蹄疫病毒株rHN/XJ/NXGH有潜力作为疫苗候选株，用于我国O型口蹄疫的有效防控。
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公开(公告)号：CN114736989B
公开(公告)日：2023-06-16
申请号：CN202210339139.3
申请日：2022-04-01
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种用于美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒的荧光RPA检测引物、方法及试剂盒。本发明涉及了用于美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒的荧光RPA检测引物和探针组合，包含引物和探针组合反应体系的检测试剂盒及方法；该方法快速省时，最低检测PRRSV载量为50copies/μL，且与常见感染猪的病毒无交叉反应，特异性好；该方法与实时荧光RT‑PCR检测结果符合率为100%。结果表明：本研究建立的PRRSV实时荧光RPA检测方法具有特异性强、敏感性高，满足美洲型PRRSV的快速诊断和流行病学调查。
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公开(公告)号：CN105754951B
公开(公告)日：2020-04-10
申请号：CN201610087180.0
申请日：2016-02-16
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开一株杂交瘤细胞株K3L25，其在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC No：C2015222。本发明的杂交瘤细胞株K3L25及所分泌的单克隆抗体表现出良好的免疫原性，可在制备早期诊断试剂或早期检测羊痘病毒感染试剂中的应用，也可在制备基础试验中使用的试剂中应用。
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公开(公告)号：CN104789694B
公开(公告)日：2017-05-17
申请号：CN201410464737.9
申请日：2014-09-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开一种可同时用于口蹄疫（A型、O型和Asia 1型）、猪水泡病和水疱性口炎检测的引物、由这些引物构成的试剂盒和制备方法，以及这种试剂盒非疾病诊断目的的使用方法。本发明的用于检测口蹄疫A型、O型和Asia 1型病毒的引物基因序列共10条，试剂盒中除主十条引物外还包括2条通用引物。相关实验表明本发明的敏感性高于普通荧光定量PCR技术，与荧光定量PCR相比可大大的节省时间，可以避免非特异性产物的扩增，同时有效地避免了引物的偏好向现象，提高了检测的灵敏性。
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公开(公告)号：CN105754951A
公开(公告)日：2016-07-13
申请号：CN201610087180.0
申请日：2016-02-16
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开一株杂交瘤细胞株K3L25，其在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC No：C2015222。本发明的杂交瘤细胞株K3L25及所分泌的单克隆抗体表现出良好的免疫原性，可在制备早期诊断试剂或早期检测羊痘病毒感染试剂中的应用，也可在制备基础试验中使用的试剂中应用。
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