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公开(公告)号:CN119592742A
公开(公告)日:2025-03-11
申请号:CN202411498537.5
申请日:2024-10-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明提供了一种羊肠道病毒TaqMan实时荧光定量RT‑PCR检测引物和探针,所述引物和探针的核苷酸序列为:上游引物CEV‑qF:5'‑TCCTCCGGRGCCGTGAATGC‑3';下游引物CEV‑qR:5'‑CCGAAAGTAGTCTGTTCCGC‑3';探针CEV‑P:5'‑Cy5‑AACCTCCGAGCGTGTGCGCA‑BHQ2‑3'。本发明利用所述引物和探针建立的羊肠道病毒TaqMan实时荧光定量RT‑PCR检测方法快速省时,特异性强,重复性好,敏感性高,最低检测限为23 copies/μL。
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公开(公告)号:CN118344473A
公开(公告)日:2024-07-16
申请号:CN202410667088.6
申请日:2024-05-28
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种口蹄疫病毒O型和A型广谱中和性猪源单克隆抗体及其应用。本发明公开了口蹄疫病毒O型和A型广谱中和性猪源单克隆抗体pOA‑2,其重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明获得1株猪源O型和A型FMDV广谱中和抗体,并鉴定其识别的关键抗原位点,为FMDV抗体药物开发和血清学检测方法建立提供了有力工具。
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公开(公告)号:CN118304393A
公开(公告)日:2024-07-09
申请号:CN202410078575.9
申请日:2024-01-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: A61K39/135 , A61K39/295 , A61K39/39 , A61P31/14 , C07K14/09
Abstract: 为了克服口蹄疫灭活疫苗潜在的生物安全风险以及提高口蹄疫疫苗与流行毒株的匹配度,本发明提供了一种O型口蹄疫病毒复合表位蛋白疫苗及应用。该疫苗由O型口蹄疫病毒复合表位蛋白和佐剂混合、充分乳化后制备而成;O型口蹄疫病毒复合表位蛋白包含近年来流行的O型三种拓扑型四个谱系代表性毒株的优势B细胞表位、FMDV特异性T细胞表位以及通用T细胞表位,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。利用大肠杆菌表达的O型口蹄疫病毒复合表位蛋白制备疫苗并免疫小鼠,发现疫苗免疫小鼠能够产生高水平的口蹄疫病毒特异性抗体和中和抗体,还能够产生细胞免疫应答,该复合表位疫苗有望作为一种新型疫苗应用于口蹄疫的防控中。
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公开(公告)号:CN118955701A
公开(公告)日:2024-11-15
申请号:CN202411125184.4
申请日:2024-08-16
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Inventor: 李坤 , 卢曾军 , 孙颖 , 樊惠英 , 李平花 , 曹轶梅 , 包慧芳 , 孙普 , 付元芳 , 袁红 , 白兴文 , 马雪青 , 赵志荀 , 张婧 , 王健 , 李冬 , 张强
IPC: C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种识别口蹄疫病毒VP2蛋白C末端线性抗原表位的广谱单克隆抗体及其应用。本发明成功构建了单克隆抗体pOTB‑1,重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.6,轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.7。经间接免疫荧光试验、酶联免疫吸附试验、Western‑blot验证抗体的生物活性。该株抗体展现了对O型和A型FMDV的广谱反应性,结合亲和力强。该株抗体识别位于结构蛋白VP2 C末端的连续线性B细胞表位。该表位序列在FMDV O型、A型和Asia1型间高度保守,说明在衣壳蛋白VP2存在型间通用的抗原位点。基于生物素化的pOTB‑1建立竞争性ELISA检测方法,为FMDV的防控及血清学检测提供工具,并为FMDV标记疫苗的设计及免疫效果评估奠定基础。
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公开(公告)号:CN118344474B
公开(公告)日:2024-11-15
申请号:CN202410667691.4
申请日:2024-05-28
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒O型、A型和Asia1型广谱中和性猪源单克隆抗体pOA‑6、pOA‑13和pOA‑20。pOA‑6重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示;pOA‑13的重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示;pOA‑20的重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示。本发明首次获得3株自然宿主源O型、A型和Asia1型FMDV广谱中和抗体,并鉴定其识别的关键抗原位点,为FMDV抗体药物开发和血清学检测方法建立提供了有力工具。
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公开(公告)号:CN119684444A
公开(公告)日:2025-03-25
申请号:CN202411966019.1
申请日:2024-12-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/68 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了塞内卡病毒A猪源Fab抗体及其竞争ELISA检测方法。中和性的Fab基因工程抗体重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No .4和SEQ ID No .7所示,抗体与SVA之间有较高的亲和力,建立了竞争ELISA检测方法,确定ELISA检测方法的SVA粒子最佳包被浓度为1 μg/mL、竞争抗体最适工作浓度为0.5 μg/mL、待检血清样本最佳稀释比例为1:10、酶标亲和素最佳稀释比为1:30 000;确定抑制百分率PI为47%时,敏感性和特异性最高,分别为96.88%和100%,且与常见的主要猪病毒病阳性血清不发生反应;批内变异系数范围为1.12%~7.34%、批间变异系数范围为1.19%~11.72%,表明重复性较好;利用该方法和VNT检测同时检测了224份临床猪血清样本,符合率为93.75%。
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公开(公告)号:CN119661701A
公开(公告)日:2025-03-21
申请号:CN202411195117.X
申请日:2024-08-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/68 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一株口蹄疫病毒抗独特型抗体及其应用。抗独特型抗体氨基酸序列如SEQ ID No. 1所示。本发明利用单B细胞抗体技术,筛选获得了1株口蹄疫病毒抗独特型抗体,能够真实模拟FMDV抗原表位,阻断中和抗体与抗原的结合,具有抗独特型抗体Ab2β的特征。口蹄疫病毒抗独特型抗体分子在免疫动物后可诱导机体产生FMDV特异性广谱抗体,所产生的抗体对O型FMDV和A型FMDV均具有结合活性。口蹄疫病毒抗独特型抗体分子提供了口蹄疫病毒抗原表位,可用于FMDV广谱疫苗分子设计与新型诊断试剂开发。
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公开(公告)号:CN118754972A
公开(公告)日:2024-10-11
申请号:CN202410612113.0
申请日:2024-05-16
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , A61K39/42 , A61P31/14 , G01N33/569 , G01N33/58
Abstract: 本发明提供了一种口蹄疫病毒广谱中和抗体、中和抗体竞争ELISA检测试剂盒和应用,属于抗体技术领域。一种口蹄疫病毒广谱中和抗体,重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明还提供了一种口蹄疫病毒中和抗体竞争ELISA检测试剂盒,包括以下组成:捕获有口蹄疫病毒146S抗原的检测板、生物素标记的所述口蹄疫病毒广谱中和抗体和酶标亲和素。所述试剂盒的检测敏感性为100%,特异性为99.5%以上,与中和抗体检测金标准方法VNT检测结果比较,阴性/阳性符合率为92.8/%,能够较准确的反映血清中和抗体的水平。
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公开(公告)号:CN118652326A
公开(公告)日:2024-09-17
申请号:CN202410945723.2
申请日:2024-07-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明涉及犬病毒病治疗领域,特别是涉及一种全犬源单克隆抗体D1及其应用。所述全犬源单克隆抗体D1的重链可变区氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明提供的抗体完全来源于犬,除了具有更好的反应活性外,该抗体也不会引起机体的免疫排斥反应,因此可以反复注射,中和效价为3.13μg/mL。
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公开(公告)号:CN118108837B
公开(公告)日:2024-08-16
申请号:CN202410081359.X
申请日:2024-01-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Inventor: 李坤 , 黄书伦 , 卢曾军 , 董开恒 , 张强 , 包慧芳 , 曹轶梅 , 李平花 , 付元芳 , 袁红 , 孙普 , 白兴文 , 马雪青 , 赵志荀 , 张婧 , 王健 , 李冬
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/577 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒Asia1型中和性猪源单克隆抗体及其应用。本发明公开了口蹄疫病毒Asia1型中和性猪源单克隆抗体PD3,包括重链可变区和轻链可变区,所述重链可变区包含3个重链互补决定区HCDR1、HCDR2、HCDR3。本发明还公开了口蹄疫病毒Asia1型中和性猪源单克隆抗体PD7,包括重链可变区和轻链可变区;所述重链可变区包含3个重链互补决定区HCDR1、HCDR2、HCDR3。本发明首次获得自然宿主源Asia1型FMDV特异性中和抗体,并鉴定其识别的关键抗原位点,为Asia1型FMDV抗原解析和血清学检测方法建立提供了有力工具。
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