公开(公告)号：CN114736989B

公开(公告)日：2023-06-16

申请号：CN202210339139.3

申请日：2022-04-01

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 孙普 ,  卢曾军 ,  王方洲 ,  张婧 ,  马雪青 ,  李平花 ,  赵志荀 ,  袁红 ,  包慧芳 ,  李冬 ,  付元芳 ,  曹轶梅 ,  李坤 ,  王健 ,  白兴文 ,  刘在新

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种用于美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒的荧光RPA检测引物、方法及试剂盒。本发明涉及了用于美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒的荧光RPA检测引物和探针组合，包含引物和探针组合反应体系的检测试剂盒及方法；该方法快速省时，最低检测PRRSV载量为50copies/μL，且与常见感染猪的病毒无交叉反应，特异性好；该方法与实时荧光RT‑PCR检测结果符合率为100%。结果表明：本研究建立的PRRSV实时荧光RPA检测方法具有特异性强、敏感性高，满足美洲型PRRSV的快速诊断和流行病学调查。

公开(公告)号：CN114736989A

公开(公告)日：2022-07-12

申请号：CN202210339139.3

申请日：2022-04-01

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 孙普 ,  卢曾军 ,  王方洲 ,  张婧 ,  马雪青 ,  李平花 ,  赵志荀 ,  袁红 ,  包慧芳 ,  李冬 ,  付元芳 ,  曹轶梅 ,  李坤 ,  王健 ,  白兴文 ,  刘在新

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种用于美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒的荧光RPA检测引物、方法及试剂盒。本发明涉及了用于美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒的荧光RPA检测引物和探针组合，包含引物和探针组合反应体系的检测试剂盒及方法；该方法快速省时，最低检测PRRSV载量为50copies/μL，且与常见感染猪的病毒无交叉反应，特异性好；该方法与实时荧光RT‑PCR检测结果符合率为100%。结果表明：本研究建立的PRRSV实时荧光RPA检测方法具有特异性强、敏感性高，满足美洲型PRRSV的快速诊断和流行病学调查。

公开(公告)号：CN114438260A

公开(公告)日：2022-05-06

申请号：CN202210088957.0

申请日：2022-01-25

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 孙普 ,  张婧 ,  卢曾军 ,  马雪青 ,  王方洲 ,  李平花 ,  包慧芳 ,  赵志荀 ,  白兴文 ,  王健 ,  李冬 ,  李坤 ,  曹轶梅 ,  袁红 ,  刘在新

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了猪繁殖与呼吸综合征病毒一步法多重RT‑PCR检测方法和试剂盒，建立的一步法多重RT‑PCR方法对美洲型PRRSV毒株均可以扩增出约408bp、548bp、689bp特异性条带，至少扩增出一条带，对欧洲型毒株仅扩增出约408bp条带，25μL反应体系中3对引物最佳使用量均为0.5μL(10mmol/μL)，最佳退火温度为58℃，循环数为30～35个；对美洲型毒株的检测能力不低于25～50TCID50/mL，具有良好的敏感性；该方法对感染猪的常见重要病毒均未扩增出任何片段，说明特异性良好。本发明成功建立了PRRSV的一步法多重RT‑PCR检测方法，对美洲型毒株和欧洲型毒株均具良好的敏感性和特异性，值得组装成试剂盒推广应用，这为猪繁殖与呼吸综合征的快速准确诊断提供了有效的技术方法。