-
公开(公告)号：CN110951757A
公开(公告)日：2020-04-03
申请号：CN201911168275.5
申请日：2019-11-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种南非2型口蹄疫病毒VP3基因的原核可溶性表达方法，根据南非2型口蹄疫病毒基因序列，在FMDV SAT2的VP3蛋白编码基因上游直接偶联SUMO促溶表达标签编码基因，然后在SUMO的上游引入6个His标签编码基因，再根据大肠杆菌密码子嗜性，优化HisSUMO-SAT2-VP3基因，重组至PUC57质粒，以HisSUMO-SAT2-VP3-PUC57质粒为模板，设计扩增南非2型口蹄疫病毒VP3基因的特异性引物，PCR扩增后用相同的限制性内切酶酶切目的片段与表达载体，之后将目的基因克隆入pET32a(+)原核表达载体，构建重组质粒pET32a-HisSUMO-VP3，转入大肠杆菌进行表达并对重组蛋白进行纯化。本发明成功构建了pET32a-HisSUMO-VP3原核表达载体，实现了在大肠杆菌中的表达，纯化后的目的蛋白具有较好的反应原性，为后续南非2型口蹄疫病毒亚单位疫苗的组装奠定基础。
-
公开(公告)号：CN108504654A
公开(公告)日：2018-09-07
申请号：CN201810330296.1
申请日：2018-04-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种抗塞尼卡谷病毒VHH抗体的酵母cDNA文库及其构建方法和用途，本发明从塞尼卡谷病毒灭活疫苗免疫的骆驼外周血中分离得到淋巴细胞，通过RT-PCR的方法得到抗塞尼卡谷病毒VHH抗体的cDNA片段，将VHH抗体的cDNA片段与pGADT7-Rec共转化酵母感受态细胞，得到抗塞尼卡谷病毒VHH抗体的酵母cDNA文库。结果表明该文库的滴度约为7.2×106cfu/ml，文库的重组率为100％。进一步对文库进行初步功能性鉴定，表明所构建的酵母文库中存在具有抗塞尼卡谷病毒的VHH抗体。本发明的提出为筛选抗塞尼卡谷病毒VHH抗体提供了平台，并且为塞尼卡谷的早期治疗和诊断提供了新的方法。
-
公开(公告)号：CN106483291A
公开(公告)日：2017-03-08
申请号：CN201610778727.1
申请日：2016-08-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/535 , C07K16/10
CPC classification number: G01N33/577 , C07K16/1009 , C07K2317/33 , G01N33/535 , G01N33/56983
Abstract: 本发明公开了一种基于型特异性单抗的Asia1型口蹄疫病毒抗体固相竞争ELISA试剂盒。含有HRP标记的Asia1型口蹄疫特异性单抗。本发明的试剂盒可用于Asia1型口蹄疫病毒抗体水平监测。替代现有ELISA中口蹄疫兔抗、豚鼠抗血清及抗豚鼠酶标抗体，简化ELISA方法步骤，提高稳定性、大幅度缩短检测时间，从24h缩短至1.5小时内，突破了原来ELISA需要一抗和二抗等反应过程。
-
公开(公告)号：CN104086652A
公开(公告)日：2014-10-08
申请号：CN201410304607.9
申请日：2014-06-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种抗O型口蹄疫病毒特异性单域抗体及其重组表达载体，该抗O型口蹄疫病毒特异性单域抗体具有核苷酸序列：SEQIDNO1或SEQIDNO2。本发明以O型口蹄疫病毒灭活疫苗免疫双峰驼，利用噬菌体展示技术建立抗FMDVO型VHH免疫抗体库，以重组VP1蛋白作为筛选用抗原，通过3轮高强度淘洗，筛选得到与VP1抗原亲和力强的2株特异性抗FMDV血清O型的重链抗体序列，并将其分别克隆到原核表达载体中，在E.coli中完成了可溶性表达，亲和层析纯化的VHH抗体蛋白能够特异性的同O型FMDV全病毒抗原和重组VP1蛋白特异性相互作用，与FMD病毒Asia1和A型不发生交叉反应，具备了同常规IgG抗体相同的生物学功能。
-
公开(公告)号：CN103884839A
公开(公告)日：2014-06-25
申请号：CN201210555104.X
申请日：2012-12-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569
CPC classification number: G01N33/6803 , G01N33/56983 , G01N2333/09
Abstract: 本发明公开了一种用于定量检测FMDV有效抗原的反向液相阻断ELISA方法。本发明通过将标准阳性血清的稀释方法固定，即固定血清抗体的量，将待检抗原作系列稀释与之作用，同时设置已知有效抗原含量的标准对照抗原，基于阳性血清在某一恒定的抗体效价下其50%阻断有效抗原量是一定的这一抗原抗体反应原理，成功建立了一种对口蹄疫病毒有效抗原定量的新技术，命名为反向液相阻断ELISA。该方法继承了液相阻断ELISA方法用于测定血清抗体时可分型、操作简单、重复性好、高敏感性、高特异性、可批量检测等优点，同时实现了对FMDV的有效抗原量的定量测定，为解决现今国内外急需解决的疫苗效力检验动物替代问题提供了技术手段。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103266091A
公开(公告)日：2013-08-28
申请号：CN201310175324.4
申请日：2013-05-14
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/86 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种利用反向遗传操作技术制备的A型口蹄疫重组疫苗株及其制备方法和应用，一种是效价高、抗原匹配性和免疫保护率高的A型口蹄疫重组疫苗株，另一种是效价高、抗原匹配性、免疫保护率高且对宿主无致病性的A型口蹄疫重组无致病性疫苗株，疫苗株的抗原核苷酸序列为SEQIDNO:1所示，利用反向遗传操作系统能够拯救出病毒的真核质粒，用制备的重组疫苗株制成灭活苗，免疫猪和牛后可有效刺激机体产生免疫应答，并提供猪和牛体免疫保护作用，对A型AISA拓扑型毒株的10000倍牛半数感染剂量（BID50）攻毒实验，免疫保护率达100%，50%保护剂量（PD50）为10.81～13.59，可用于我国及其周边国家A型口蹄疫病毒的预防和控制。
-
公开(公告)号：CN120082525A
公开(公告)日：2025-06-03
申请号：CN202510187899.0
申请日：2025-02-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明提供了一种L蛋白突变的口蹄疫病毒重组毒株及其构建方法和应用，属于生物技术技术领域。一种L蛋白突变的口蹄疫病毒重组毒株，其中L蛋白是第18位、28位和39位氨基酸发生突变或缺失的突变L蛋白。本发明证明宿主蛋白POLR2H过表达抑制FMDV的复制，并且是通过蛋白酶体通路降解L蛋白，进而抑制病毒复制；本发明通过在FMDV L蛋白中对关键氨基酸位点(18、28和39位)进行突变，构建了不被宿主蛋白POLR2H抑制复制的口蹄疫病毒重组毒株，所述重组病毒能够稳定传代，且在BHK‑21细胞上具有高病毒滴度的特性，提高了病毒滴度及抗原产量，能够用于FMDV疫苗制备，具备良好的应用前景。
-
公开(公告)号：CN119979607A
公开(公告)日：2025-05-13
申请号：CN202510190001.5
申请日：2025-02-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明提供了一种稳定传代的重组口蹄疫病毒毒株及构建方法和应用，属于生物医药技术领域。本发明根据宿主细胞KRT31蛋白对FMDV的复制抑制性，通过在L蛋白中引入点突变，消除KRT31蛋白降解L蛋白及抑制FMDV复制的能力。本发明成功构建并拯救了L蛋白关键氨基酸位点突变的重组口蹄疫病毒株，突变位点能稳定遗传，且不影响口蹄疫病毒的复制，提高了病毒滴度，具有良好的生产性能，可用于制备重组口蹄疫疫苗株。
-
公开(公告)号：CN116785419B
公开(公告)日：2024-10-22
申请号：CN202310607714.8
申请日：2023-05-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 朱紫祥 , 毛箬青 , 郝荣增 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物技术领域。首先提供了一种由非洲猪瘟病毒P34、P30、P54、A104R、E165R、C129R、P72、X、Y、P8、P15、K205R、K78R、MGF 110‑5L‑6L、L60L、MGF 110‑4L、MGF 110‑7L、I215L、P14、P35、E248R、A238L、EP153R蛋白组成的抗原蛋白组合，所述抗原蛋白组合能够诱导机体产生较强的免疫反应；其次本发明制备了包含上述抗原蛋白组合的二十三组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗，所述亚单位疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率，无生物安全风险，突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题。
-
公开(公告)号：CN116747296B
公开(公告)日：2024-10-22
申请号：CN202310605961.4
申请日：2023-05-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 朱紫祥 , 毛箬青 , 郝荣增 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及一种十一组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、E165R蛋白、C129R蛋白、P72蛋白、X蛋白、Y蛋白、A蛋白和B蛋白组成的非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合，所述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合能够诱导机体产生较强的免疫反应；其次本发明制备了包含上述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合的十一组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗，所述亚单位疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率，无生物安全风险，突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题，证明了非洲猪瘟亚单位疫苗研究方案的可行性。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
103
records
(took 0.032 seconds)
