公开(公告)号：CN108504654A

公开(公告)日：2018-09-07

申请号：CN201810330296.1

申请日：2018-04-13

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 郑海学 ,  田宏 ,  杨帆 ,  石正旺 ,  吴锦艳 ,  朱紫祥 ,  李丹 ,  张克山 ,  曹伟军 ,  刘永杰 ,  郭建宏 ,  何继军 ,  马旭升 ,  茹毅 ,  李林林 ,  刘湘涛

IPC: C12N15/10 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C40B50/06 ,  C40B40/02 ,  C07K16/10

Abstract: 本发明公开了一种抗塞尼卡谷病毒VHH抗体的酵母cDNA文库及其构建方法和用途，本发明从塞尼卡谷病毒灭活疫苗免疫的骆驼外周血中分离得到淋巴细胞，通过RT-PCR的方法得到抗塞尼卡谷病毒VHH抗体的cDNA片段，将VHH抗体的cDNA片段与pGADT7-Rec共转化酵母感受态细胞，得到抗塞尼卡谷病毒VHH抗体的酵母cDNA文库。结果表明该文库的滴度约为7.2×106cfu/ml，文库的重组率为100％。进一步对文库进行初步功能性鉴定，表明所构建的酵母文库中存在具有抗塞尼卡谷病毒的VHH抗体。本发明的提出为筛选抗塞尼卡谷病毒VHH抗体提供了平台，并且为塞尼卡谷的早期治疗和诊断提供了新的方法。

公开(公告)号：CN108384893A

公开(公告)日：2018-08-10

申请号：CN201810415406.4

申请日：2018-05-03

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 郑海学 ,  田宏 ,  杨帆 ,  石正旺 ,  朱紫祥 ,  李丹 ,  张克山 ,  曹伟军 ,  刘永杰 ,  郭建宏 ,  何继军 ,  马旭升 ,  茹毅 ,  李林林 ,  刘湘涛

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种用于检测口蹄疫病毒和塞尼卡谷病毒的实时荧光定量RT-PCR试剂盒及其应用。所述试剂盒包含分别用于检测口蹄疫病毒和塞尼卡谷病毒的引物以及探针，优选的，所述试剂盒中还包含核酸提取液、2×Direct qRT-PCR Mix、酶混合液、阴性对照、阳性对照。使用本发明的试剂盒检测口蹄疫病毒和塞尼卡谷病毒，具有特异性高，灵敏度高，稳定性好，操作简便等优点，用户无需额外提取病毒RNA，无需反转录，只需将待检样品加入反应管中，利用荧光信号的变化，通过Ct值和标准曲线的关系对起始模板进行定量分析，即可计算待检样品拷贝数。不仅适用于科研单位定量分析，而且适合于各级防控单位，基层兽医站，大中型养殖场等的病原检测分析，具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN108384894A

公开(公告)日：2018-08-10

申请号：CN201810415408.3

申请日：2018-05-03

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 郑海学 ,  田宏 ,  杨帆 ,  石正旺 ,  朱紫祥 ,  李丹 ,  张克山 ,  曹伟军 ,  刘永杰 ,  郭建宏 ,  何继军 ,  马旭升 ,  茹毅 ,  李林林 ,  刘湘涛

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种用于检测塞尼卡谷病毒的Taqman实时荧光定量RT-PCR试剂盒及其应用。所述的试剂盒包含用于检测塞尼卡谷病毒的引物以及探针，优选的，所述试剂盒中还包含核酸提取液、2×Direct qRT-PCR Mix、酶混合液、阴性对照、阳性对照。使用本发明的试剂盒检测塞尼卡谷病毒，具有特异性高，灵敏度高，稳定性好，操作简便等优点，用户无需额外提取病毒RNA，无需反转录，只需将待检样品加入反应管中，利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化，通过Ct值和标准曲线的关系对起始模板进行定量分析，即可计算待检样品拷贝数。不仅适用于科研单位定量分析，而且适合于各级防控单位，基层兽医站，大中型养殖场等的病原检测分析，具有良好的应用前景。