一种南非2型口蹄疫病毒VP3基因的原核可溶性表达方法

    公开(公告)号:CN110951757A

    公开(公告)日:2020-04-03

    申请号:CN201911168275.5

    申请日:2019-11-25

    Abstract: 本发明公开了一种南非2型口蹄疫病毒VP3基因的原核可溶性表达方法,根据南非2型口蹄疫病毒基因序列,在FMDV SAT2的VP3蛋白编码基因上游直接偶联SUMO促溶表达标签编码基因,然后在SUMO的上游引入6个His标签编码基因,再根据大肠杆菌密码子嗜性,优化HisSUMO-SAT2-VP3基因,重组至PUC57质粒,以HisSUMO-SAT2-VP3-PUC57质粒为模板,设计扩增南非2型口蹄疫病毒VP3基因的特异性引物,PCR扩增后用相同的限制性内切酶酶切目的片段与表达载体,之后将目的基因克隆入pET32a(+)原核表达载体,构建重组质粒pET32a-HisSUMO-VP3,转入大肠杆菌进行表达并对重组蛋白进行纯化。本发明成功构建了pET32a-HisSUMO-VP3原核表达载体,实现了在大肠杆菌中的表达,纯化后的目的蛋白具有较好的反应原性,为后续南非2型口蹄疫病毒亚单位疫苗的组装奠定基础。

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