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公开(公告)号：CN111748563A
公开(公告)日：2020-10-09
申请号：CN202010661680.7
申请日：2020-07-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种可用作疫苗的基因缺失减毒非洲猪瘟病毒株及其构建方法，该病毒株是亲本非洲猪瘟病毒ASFV CN/GS/2018分离株的基因缺失弱毒株。本发明发现了DP71L基因是对猪致病性致弱的新靶标基因，并发现联合丧失MGF360-18R基因、DP71L基因和DP96R基因编码蛋白的功能，降低了亲本毒株的毒性，获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株；所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株高剂量(104HAD50)免疫猪后，对猪完全致弱，免疫猪健康，不发病，与免疫猪同居猪核酸也呈阴性，不水平传播，具有较好安全性；且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株的攻毒提供100％免疫保护，可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗，具有极大的社会价值。
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公开(公告)号：CN111394389A
公开(公告)日：2020-07-10
申请号：CN202010212435.8
申请日：2020-03-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/86 , C12N15/66 , C12N7/01 , A61K39/125 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种针对正链RNA病毒的单质粒拯救系统及基于该系统的塞内卡病毒感染性克隆及构建方法和应用，涉及基因工程技术领域。本发明提供了针对正链RNA病毒的单质粒拯救系统以及利用该拯救系统可定向设计SVA反向重组疫苗及构建SVA定向突变毒株在病毒基因功能、病毒变异及致病机制等研究中的应用。本发明利用聚合酶I和聚合酶II启动子、终止子、核酶等元件构建的单质粒塞内卡病毒拯救系统，实现了在质粒水平上编辑病毒基因组，为病毒定向设计、构建和拯救提供了技术平台。
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公开(公告)号：CN108504654A
公开(公告)日：2018-09-07
申请号：CN201810330296.1
申请日：2018-04-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种抗塞尼卡谷病毒VHH抗体的酵母cDNA文库及其构建方法和用途，本发明从塞尼卡谷病毒灭活疫苗免疫的骆驼外周血中分离得到淋巴细胞，通过RT-PCR的方法得到抗塞尼卡谷病毒VHH抗体的cDNA片段，将VHH抗体的cDNA片段与pGADT7-Rec共转化酵母感受态细胞，得到抗塞尼卡谷病毒VHH抗体的酵母cDNA文库。结果表明该文库的滴度约为7.2×106cfu/ml，文库的重组率为100％。进一步对文库进行初步功能性鉴定，表明所构建的酵母文库中存在具有抗塞尼卡谷病毒的VHH抗体。本发明的提出为筛选抗塞尼卡谷病毒VHH抗体提供了平台，并且为塞尼卡谷的早期治疗和诊断提供了新的方法。
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公开(公告)号：CN106483291A
公开(公告)日：2017-03-08
申请号：CN201610778727.1
申请日：2016-08-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/535 , C07K16/10
CPC classification number: G01N33/577 , C07K16/1009 , C07K2317/33 , G01N33/535 , G01N33/56983
Abstract: 本发明公开了一种基于型特异性单抗的Asia1型口蹄疫病毒抗体固相竞争ELISA试剂盒。含有HRP标记的Asia1型口蹄疫特异性单抗。本发明的试剂盒可用于Asia1型口蹄疫病毒抗体水平监测。替代现有ELISA中口蹄疫兔抗、豚鼠抗血清及抗豚鼠酶标抗体，简化ELISA方法步骤，提高稳定性、大幅度缩短检测时间，从24h缩短至1.5小时内，突破了原来ELISA需要一抗和二抗等反应过程。
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公开(公告)号：CN104651531A
公开(公告)日：2015-05-27
申请号：CN201510035254.1
申请日：2015-01-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
CPC classification number: C12Q1/708 , C12Q1/6851 , C12Q2561/101 , C12Q2545/113
Abstract: 本发明公开用于检测青少年复发性呼吸道乳头瘤HPV11亚型的高度特异性引物对，和用于青少年复发性呼吸道乳头瘤HPV11亚型一步法TapMan 荧光定量PCR检测试剂盒。本发明的用于检测青少年复发性呼吸道乳头瘤状病毒的高度特异性引物对序列分别为SEQ ID No.1和 SEQ ID No.2，检测试剂盒内还有序列为 SEQ ID No.3的探针。本发明可对青少年复发性呼吸道乳头瘤HPV11亚型定量扩增、检测，可减少污染、提高了检测的精准度、操作简单快捷，非常适用于临床快速分型检测及该病毒流行病学调查的应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104086652A
公开(公告)日：2014-10-08
申请号：CN201410304607.9
申请日：2014-06-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种抗O型口蹄疫病毒特异性单域抗体及其重组表达载体，该抗O型口蹄疫病毒特异性单域抗体具有核苷酸序列：SEQIDNO1或SEQIDNO2。本发明以O型口蹄疫病毒灭活疫苗免疫双峰驼，利用噬菌体展示技术建立抗FMDVO型VHH免疫抗体库，以重组VP1蛋白作为筛选用抗原，通过3轮高强度淘洗，筛选得到与VP1抗原亲和力强的2株特异性抗FMDV血清O型的重链抗体序列，并将其分别克隆到原核表达载体中，在E.coli中完成了可溶性表达，亲和层析纯化的VHH抗体蛋白能够特异性的同O型FMDV全病毒抗原和重组VP1蛋白特异性相互作用，与FMD病毒Asia1和A型不发生交叉反应，具备了同常规IgG抗体相同的生物学功能。
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公开(公告)号：CN103884839A
公开(公告)日：2014-06-25
申请号：CN201210555104.X
申请日：2012-12-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569
CPC classification number: G01N33/6803 , G01N33/56983 , G01N2333/09
Abstract: 本发明公开了一种用于定量检测FMDV有效抗原的反向液相阻断ELISA方法。本发明通过将标准阳性血清的稀释方法固定，即固定血清抗体的量，将待检抗原作系列稀释与之作用，同时设置已知有效抗原含量的标准对照抗原，基于阳性血清在某一恒定的抗体效价下其50%阻断有效抗原量是一定的这一抗原抗体反应原理，成功建立了一种对口蹄疫病毒有效抗原定量的新技术，命名为反向液相阻断ELISA。该方法继承了液相阻断ELISA方法用于测定血清抗体时可分型、操作简单、重复性好、高敏感性、高特异性、可批量检测等优点，同时实现了对FMDV的有效抗原量的定量测定，为解决现今国内外急需解决的疫苗效力检验动物替代问题提供了技术手段。
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公开(公告)号：CN103266091A
公开(公告)日：2013-08-28
申请号：CN201310175324.4
申请日：2013-05-14
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/86 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种利用反向遗传操作技术制备的A型口蹄疫重组疫苗株及其制备方法和应用，一种是效价高、抗原匹配性和免疫保护率高的A型口蹄疫重组疫苗株，另一种是效价高、抗原匹配性、免疫保护率高且对宿主无致病性的A型口蹄疫重组无致病性疫苗株，疫苗株的抗原核苷酸序列为SEQIDNO:1所示，利用反向遗传操作系统能够拯救出病毒的真核质粒，用制备的重组疫苗株制成灭活苗，免疫猪和牛后可有效刺激机体产生免疫应答，并提供猪和牛体免疫保护作用，对A型AISA拓扑型毒株的10000倍牛半数感染剂量（BID50）攻毒实验，免疫保护率达100%，50%保护剂量（PD50）为10.81～13.59，可用于我国及其周边国家A型口蹄疫病毒的预防和控制。
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公开(公告)号：CN101270155A
公开(公告)日：2008-09-24
申请号：CN200810105955.8
申请日：2008-05-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/09 , C12N15/42 , C12N15/63 , C12N5/10 , C12N15/866 , A61K39/135 , A61P31/14 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种通过耐酸性改造在昆虫细胞中组装口蹄疫病毒空衣壳的方法。本发明的在昆虫细胞中组装口蹄疫病毒空衣壳的方法，包括以下步骤：1)将改造后的P12A基因和口蹄疫病毒的非结构蛋白基因3C通过杆状病毒载体导入细菌内进行重组，得到重组杆状病毒A；用重组杆状病毒A的DNA转染昆虫细胞，获得口蹄疫病毒空衣壳。本发明首次在昆虫细胞中组装成了完整的FMDV空衣壳，为基因工程亚单位疫苗和新型诊断试剂的研发奠定了基础。
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公开(公告)号：CN120082525A
公开(公告)日：2025-06-03
申请号：CN202510187899.0
申请日：2025-02-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明提供了一种L蛋白突变的口蹄疫病毒重组毒株及其构建方法和应用，属于生物技术技术领域。一种L蛋白突变的口蹄疫病毒重组毒株，其中L蛋白是第18位、28位和39位氨基酸发生突变或缺失的突变L蛋白。本发明证明宿主蛋白POLR2H过表达抑制FMDV的复制，并且是通过蛋白酶体通路降解L蛋白，进而抑制病毒复制；本发明通过在FMDV L蛋白中对关键氨基酸位点(18、28和39位)进行突变，构建了不被宿主蛋白POLR2H抑制复制的口蹄疫病毒重组毒株，所述重组病毒能够稳定传代，且在BHK‑21细胞上具有高病毒滴度的特性，提高了病毒滴度及抗原产量，能够用于FMDV疫苗制备，具备良好的应用前景。
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