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公开(公告)号：CN114807102B
公开(公告)日：2023-08-04
申请号：CN202210528649.5
申请日：2022-05-16
Applicant: 安徽工程大学
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种耐乙醇酰胺酶、基因、表达载体、工程菌及制备方法和应用，所述酰胺酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。该酰胺酶能够耐受高浓度乙醇、可降解氨基甲酸乙酯，但不降解尿素。本发明所获得的酰胺酶可在含有高浓度乙醇条件下高效降解氨基甲酸乙酯且不降解尿素，有助于该酶高效的运用于酒精饮料中氨基甲酸乙酯的降解。本发明为实现酒精饮料中致癌物氨基甲酸乙酯的降解奠定了基础，具有巨大的经济及社会效益。
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公开(公告)号：CN116497011A
公开(公告)日：2023-07-28
申请号：CN202211466974.X
申请日：2022-11-22
Applicant: 安徽工程大学
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种弗氏链霉菌来源的NeoN突变体、基因、重组菌及其制备方法和应用，所述NeoN突变体的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明基于NeoN‑SAM‑新霉素C三元复合物模型，解析了NeoN催化新霉素C合成新霉素B的作用机制。构建的重组菌株SF‑2‑NeoNV252A能够生产新霉素B 16676.6U/mL，相对于出发菌株SF‑2提高了45.8％，且新霉素C的占比量相对于出发菌株由16.1％下降到6.28％。本发明提供了NeoN的催化机理解析，对于理性改造NeoN提高新霉素B的产量以及削弱新霉素C的占比具有一定的借鉴意义。
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公开(公告)号：CN114250240B
公开(公告)日：2023-07-28
申请号：CN202111613081.9
申请日：2021-12-27
Applicant: 安徽工程大学
Abstract: 本发明涉及遗传工程技术领域，具体涉及一种调节大肠杆菌菌膜形态和高效合成MK‑7的方法，包括如下步骤：步骤一、以大肠杆菌BL21基因组为模板，构建得到△ispB菌株EC1；步骤二、以枯草芽孢杆菌168全基因组为模板，扩增得到hepT基因，通过与pET‑28a载体连接构建得到菌株EC2；步骤三、根据待突变LsrR的氨基酸位点来设计PCR点突变引物，以构建的重组质粒pET‑lsrR为模板，构建得到菌株EC3；步骤四、根据待突变lsrK的氨基酸位点来设计PCR点突变引物，构建得到用于高效合成MK‑7的菌株EC4。本发明通过调控大肠杆菌菌膜形态，促进大肠杆菌维生素K2的MK‑7高效合成。
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公开(公告)号：CN114807102A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202210528649.5
申请日：2022-05-16
Applicant: 安徽工程大学
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种耐乙醇酰胺酶、基因、表达载体、工程菌及制备方法和应用，所述酰胺酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。该酰胺酶能够耐受高浓度乙醇、可降解氨基甲酸乙酯，但不降解尿素。本发明所获得的酰胺酶可在含有高浓度乙醇条件下高效降解氨基甲酸乙酯且不降解尿素，有助于该酶高效的运用于酒精饮料中氨基甲酸乙酯的降解。本发明为实现酒精饮料中致癌物氨基甲酸乙酯的降解奠定了基础，具有巨大的经济及社会效益。
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公开(公告)号：CN112921048B
公开(公告)日：2022-03-08
申请号：CN202110244068.4
申请日：2021-03-05
Applicant: 安徽工程大学
Abstract: 本发明提供了一种纳豆激酶工程菌及提高纳豆激酶活力的方法，包括如下步骤：步骤一、分别提取枯草芽胞杆菌与纳豆芽胞杆菌的基因组DNA；步骤二、以转录调控因子sinR和纳豆激酶编码基因aprN为目的基因，以枯草芽胞杆菌与纳豆芽胞杆菌的DNA为模板，分别设计第一引物对和第二引物对进行PCR扩增，以得到sinR PCR产物和aprN PCR产物；步骤三、以sinR PCR产物和aprN PCR产物构建串联sinR与aprN的重组质粒；步骤四、将重组质粒转化感受态细胞，以得到阳性克隆菌落；步骤五、对阳性克隆菌落依次进行种子培养基培养和发酵培养。本发明将群体感应调控因子与纳豆激酶编码基因串联表达，提高纳豆激酶含量及活力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109837289B
公开(公告)日：2021-12-28
申请号：CN201910233452.7
申请日：2019-03-26
Applicant: 安徽工程大学
Abstract: 本发明公开了一种调控纳豆芽孢杆菌自凝集能力和菌膜特性的方法。该方法通过改变非特异性DNA结合蛋白HBsu编码基因表达水平和蛋白表达量达到改变纳豆芽孢杆菌自凝集能力和菌膜特性，并进一步改变纳豆芽孢杆菌合成维生素K2的能力。本发明为维生素K2优良菌株的选育提供了一条新思路，在食品、生物制药领域具有较大的实际意义和广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN108004261A
公开(公告)日：2018-05-08
申请号：CN201711137213.9
申请日：2017-11-16
Applicant: 安徽工程大学
Abstract: 本发明提供一种磷脂酶A1辅助蛋白PlaS的表达方法，将磷脂酶A1辅助蛋白plaS基因N端去除信号肽，得到截短辅助蛋白，然后构建大肠杆菌/截短辅助蛋白表达菌株，将表达菌株接种至培养基中进行目的蛋白诱导表达。本发明人采用N端截短技术，将plaS基因N端截短35AA，并成功构建了BL21/dSP28表达菌株，使辅助蛋白进行大量表达。且通过对表达培养基组分的优化，获得了能够使目的蛋白大量可溶表达并易纯化的培养基。然后采用不同纯化方式对目的蛋白进行纯化，确定了最佳纯化方法。该培养基使目的蛋白在破碎上清中大量可溶性表达，减少了在蛋白纯化过程中变复性的繁琐操作，纯化方法提高了蛋白得率，使纯化过程更为简便。
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公开(公告)号：CN104711237A
公开(公告)日：2015-06-17
申请号：CN201510124651.6
申请日：2015-03-20
Applicant: 安徽工程大学
CPC classification number: C12N9/1085 , C12Y205/01039
Abstract: 本发明提供一种调控1,4-二羟基-2-萘甲酸-聚异戊二烯转移酶活力的方法，该方法通过抑制纳豆芽孢杆菌中4-羟苯甲酸-聚异戊二烯转移酶(UbiA)的活力，降低了聚异戊二醇菌体内代谢流向辅酶Q的合成。更为重要的是，ubiA基因的调节，也影响了菌体内1,4-二羟基-2-萘甲酸-聚异戊二烯转移酶(MenA)的活力，从而直接影响了纳豆芽孢杆菌合成维生素K2的能力。本发明为维生素K2优良菌株的选育提供了一条新思路，在食品、生物制药领域具有较大的实际意义和广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN117843740A
公开(公告)日：2024-04-09
申请号：CN202311612177.2
申请日：2023-11-29
Applicant: 安徽工程大学 , 新宇药业股份有限公司
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种游动放线菌来源的转录因子AcaR、基因、重组菌及其制备方法和应用，所述AcaR的氨基酸序列如SEQ IDNo.1所示，所述AcaR的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明基于比较转录组学分析，挖掘得到了转录因子AcaR，有着调控阿卡波糖合成的能力。构建的重组游动放线菌ZFAC/AcaR发酵7天后能够生产阿卡波糖4.86g/L，相对于出发菌株ZFAC提高了20.8％。本发明发现并验证了转录因子AcaR对于游动放线菌合成阿卡波糖具有明显的正调控作用，对于基于转录水平调控阿卡波糖的生物合成具有一定的借鉴意义。
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公开(公告)号：CN114874965B
公开(公告)日：2023-04-14
申请号：CN202210669937.2
申请日：2022-06-14
Applicant: 安徽工程大学
Abstract: 本发明涉及分子生物学及代谢工程技术领域，具体涉及一种枯草芽孢杆菌工程菌及其构建方法和应用，构建方法包括如下步骤：步骤一、构建表达菌株BU12；步骤二、构建得到启动子PD8；步骤三、将表达菌株BU12中的级联信号分子PhrG和RapG的天然启动子替换为组成型启动子Phag，以构建得到BC01菌株；步骤四、将BC01菌株capB,C,A和racE的启动子中至少两种启动子替换为所述启动子PD8，构建得到枯草芽孢杆菌工程菌。采用本发明的枯草芽孢杆菌工程菌进行发酵调控培养，最终得到聚‑γ‑谷氨酸和D型谷氨酸单体含量皆较高，为拓宽聚‑γ‑谷氨酸在药物输送材料方面的市场应用奠定了坚实的基础。
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