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公开(公告)号：CN114250240A
公开(公告)日：2022-03-29
申请号：CN202111613081.9
申请日：2021-12-27
Applicant: 安徽工程大学
Abstract: 本发明涉及遗传工程技术领域，具体涉及一种调节大肠杆菌菌膜形态和高效合成MK‑7的方法，包括如下步骤：步骤一、以大肠杆菌BL21基因组为模板，构建得到△ispB菌株EC1；步骤二、以枯草芽孢杆菌168全基因组为模板，扩增得到hepT基因，通过与pET‑28a载体连接构建得到菌株EC2；步骤三、根据待突变LsrR的氨基酸位点来设计PCR点突变引物，以构建的重组质粒pET‑lsrR为模板，构建得到菌株EC3；步骤四、根据待突变lsrK的氨基酸位点来设计PCR点突变引物，构建得到用于高效合成MK‑7的菌株EC4。本发明通过调控大肠杆菌菌膜形态，促进大肠杆菌维生素K2的MK‑7高效合成。
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公开(公告)号：CN114250240B
公开(公告)日：2023-07-28
申请号：CN202111613081.9
申请日：2021-12-27
Applicant: 安徽工程大学
Abstract: 本发明涉及遗传工程技术领域，具体涉及一种调节大肠杆菌菌膜形态和高效合成MK‑7的方法，包括如下步骤：步骤一、以大肠杆菌BL21基因组为模板，构建得到△ispB菌株EC1；步骤二、以枯草芽孢杆菌168全基因组为模板，扩增得到hepT基因，通过与pET‑28a载体连接构建得到菌株EC2；步骤三、根据待突变LsrR的氨基酸位点来设计PCR点突变引物，以构建的重组质粒pET‑lsrR为模板，构建得到菌株EC3；步骤四、根据待突变lsrK的氨基酸位点来设计PCR点突变引物，构建得到用于高效合成MK‑7的菌株EC4。本发明通过调控大肠杆菌菌膜形态，促进大肠杆菌维生素K2的MK‑7高效合成。
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公开(公告)号：CN114231554B
公开(公告)日：2023-07-28
申请号：CN202111614876.1
申请日：2021-12-27
Applicant: 安徽工程大学
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种维生素K2系列产物的生物合成方法，包括如下步骤：步骤一、敲除Bacillus subtilis168基因中的hepS基因，得到△hepS菌株BS01；步骤二、敲除Bacillus subtilis168基因中的hepT基因，得到△hepT菌株BS02；步骤三、PCR扩增大肠杆菌yqiD基因或Bacillus subtilis168的hepT基因；将所得PCR产物连接表达载体pHY‑P43得到重组质粒，之后转到BS02，即得产生维生素K2系列产物的工程菌。该发明对于获取不同食品级维生素K2同系物具有十分重要的意义。
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公开(公告)号：CN114231554A
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN202111614876.1
申请日：2021-12-27
Applicant: 安徽工程大学
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种维生素K2系列产物的生物合成方法，包括如下步骤：步骤一、敲除Bacillus subtilis168基因中的hepS基因，得到△hepS菌株BS01；步骤二、敲除Bacillus subtilis168基因中的hepT基因，得到△hepT菌株BS02；步骤三、PCR扩增大肠杆菌yqiD基因或Bacillus subtilis168的hepT基因；将所得PCR产物连接表达载体pHY‑P43得到重组质粒，之后转到BS02，即得产生维生素K2系列产物的工程菌。该发明对于获取不同食品级维生素K2同系物具有十分重要的意义。
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