公开(公告)号：CN106222208A

公开(公告)日：2016-12-14

申请号：CN201610619244.7

申请日：2016-08-01

Applicant: 安徽工程大学

Inventor： 刘艳 ,  薛正莲 ,  王洲 ,  章宁娟 ,  胡刘秀 ,  杨建伟 ,  余飞 ,  杨蒙 ,  郑之明

IPC: C12P7/66 ,  C12N1/21 ,  C12R1/20

CPC classification number: C12P7/66 ,  C12N9/16 ,  C12Y301/02014

Abstract: 本发明公开了一种提高维生素K2胞外分泌能力的方法，该方法通过分子生物学手段调节黄杆菌细胞膜脂肪酸的饱和度，提高了黄杆菌细胞膜通透性，解除了维生素K2胞内合成过程中中间代谢物和关键酶对其产生的反馈抑制，从而促进了维生素K2胞外分泌的能力，提高了维生素K2的总产量。本发明为维生素K2工业化生产提供了一条菌种改造的新思路，在食品、生物制药领域具有较大的实际应用价值和广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN108004261A

公开(公告)日：2018-05-08

申请号：CN201711137213.9

申请日：2017-11-16

Applicant: 安徽工程大学

Inventor： 薛正莲 ,  朱昊 ,  王洲 ,  刘艳 ,  陈阿娜 ,  杨蒙 ,  甘玉飞

IPC: C12N15/70 ,  C07K14/00 ,  C07K1/14

Abstract: 本发明提供一种磷脂酶A1辅助蛋白PlaS的表达方法，将磷脂酶A1辅助蛋白plaS基因N端去除信号肽，得到截短辅助蛋白，然后构建大肠杆菌/截短辅助蛋白表达菌株，将表达菌株接种至培养基中进行目的蛋白诱导表达。本发明人采用N端截短技术，将plaS基因N端截短35AA，并成功构建了BL21/dSP28表达菌株，使辅助蛋白进行大量表达。且通过对表达培养基组分的优化，获得了能够使目的蛋白大量可溶表达并易纯化的培养基。然后采用不同纯化方式对目的蛋白进行纯化，确定了最佳纯化方法。该培养基使目的蛋白在破碎上清中大量可溶性表达，减少了在蛋白纯化过程中变复性的繁琐操作，纯化方法提高了蛋白得率，使纯化过程更为简便。

公开(公告)号：CN106591253A

公开(公告)日：2017-04-26

申请号：CN201611056729.6

申请日：2016-11-26

Applicant: 安徽工程大学

Inventor： 刘艳 ,  薛正莲 ,  王洲 ,  章宁娟 ,  苏燕南 ,  胡刘秀 ,  丁秀敏 ,  杨建伟 ,  朱昊 ,  余飞 ,  杨蒙

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12P7/66 ,  C12R1/20

Abstract: 本发明公开了一种4‑羟苯甲酸‑聚异戊二烯转移酶突变体及其制备方法和应用，所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.6或SEQ ID NO.8所示。所述突变体的核苷酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.7所示。本发明提供的突变体酶，蛋白表达水平有明显的降低，而维生素K2生物合成能力有所提高，UbiA合成量的减少，促进了MenA的合成，从而最终促进了维生素K2的生物合成。

公开(公告)号：CN106591253B

公开(公告)日：2019-11-22

申请号：CN201611056729.6

申请日：2016-11-26

Applicant: 安徽工程大学

Inventor： 刘艳 ,  薛正莲 ,  王洲 ,  章宁娟 ,  苏燕南 ,  胡刘秀 ,  丁秀敏 ,  杨建伟 ,  朱昊 ,  余飞 ,  杨蒙

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12P7/66 ,  C12R1/20

Abstract: 本发明公开了一种4‑羟苯甲酸‑聚异戊二烯转移酶突变体及其制备方法和应用，所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.6或SEQ ID NO.8所示。所述突变体的核苷酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.7所示。本发明提供的突变体酶，蛋白表达水平有明显的降低，而维生素K2生物合成能力有所提高，UbiA合成量的减少，促进了MenA的合成，从而最终促进了维生素K2的生物合成。