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公开(公告)号：CN108004261A
公开(公告)日：2018-05-08
申请号：CN201711137213.9
申请日：2017-11-16
Applicant: 安徽工程大学
Abstract: 本发明提供一种磷脂酶A1辅助蛋白PlaS的表达方法，将磷脂酶A1辅助蛋白plaS基因N端去除信号肽，得到截短辅助蛋白，然后构建大肠杆菌/截短辅助蛋白表达菌株，将表达菌株接种至培养基中进行目的蛋白诱导表达。本发明人采用N端截短技术，将plaS基因N端截短35AA，并成功构建了BL21/dSP28表达菌株，使辅助蛋白进行大量表达。且通过对表达培养基组分的优化，获得了能够使目的蛋白大量可溶表达并易纯化的培养基。然后采用不同纯化方式对目的蛋白进行纯化，确定了最佳纯化方法。该培养基使目的蛋白在破碎上清中大量可溶性表达，减少了在蛋白纯化过程中变复性的繁琐操作，纯化方法提高了蛋白得率，使纯化过程更为简便。
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公开(公告)号：CN106591253A
公开(公告)日：2017-04-26
申请号：CN201611056729.6
申请日：2016-11-26
Applicant: 安徽工程大学
Abstract: 本发明公开了一种4‑羟苯甲酸‑聚异戊二烯转移酶突变体及其制备方法和应用，所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.6或SEQ ID NO.8所示。所述突变体的核苷酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.7所示。本发明提供的突变体酶，蛋白表达水平有明显的降低，而维生素K2生物合成能力有所提高，UbiA合成量的减少，促进了MenA的合成，从而最终促进了维生素K2的生物合成。
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公开(公告)号：CN105754839A
公开(公告)日：2016-07-13
申请号：CN201610217906.8
申请日：2016-04-08
Applicant: 安徽工程大学
CPC classification number: C12N15/101 , C12Q2523/308 , C12Q2527/125 , C12Q2521/537
Abstract: 本发明提供一种用于基因纯化的装置，所述装置包括吸头、套筒、筛板和推杆，吸头与套筒前端紧密贴合，筛板为与套筒内壁横截面大小配合的圆片状，筛板、推杆依次置于套筒内部，并分别与套筒内侧壁紧密贴合。在筛板与套筒前端之间，放置有吸附材料。本发明还提供应用该装置进行基因纯化的方法。本发明利用实验室常规耗材及药品实现了细菌基因组及质粒、PCR Clean以及胶回收的低成本、高效率纯化；且整个提取过程不添加任何有毒有机溶剂。本发明的装置制作方法和操作方法简单，可循环使用，降低了成本。清洗及洗脱过程无需使用离心机，且洗脱之前无需晾干挥发乙醇，节省了时间。装置规格种类多，可进行微量及大批量操作。
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公开(公告)号：CN106591253B
公开(公告)日：2019-11-22
申请号：CN201611056729.6
申请日：2016-11-26
Applicant: 安徽工程大学
Abstract: 本发明公开了一种4‑羟苯甲酸‑聚异戊二烯转移酶突变体及其制备方法和应用，所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.6或SEQ ID NO.8所示。所述突变体的核苷酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.7所示。本发明提供的突变体酶，蛋白表达水平有明显的降低，而维生素K2生物合成能力有所提高，UbiA合成量的减少，促进了MenA的合成，从而最终促进了维生素K2的生物合成。
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