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公开(公告)号:CN112852761B
公开(公告)日:2022-08-23
申请号:CN202110248651.2
申请日:2021-03-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种基因缺失减毒非洲猪瘟病毒株Δ20/40的构建及作为疫苗的应用。本发明采用基因工程手段在非洲猪瘟亲本毒株ASFVCN/GS/2018中联合缺失了MGF‑110‑9L基因和MGF‑360‑9L基因编码蛋白的功能,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株;所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪健康,且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒(100HAD50剂量)提供100%免疫保护,可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN114807062A
公开(公告)日:2022-07-29
申请号:CN202210240926.2
申请日:2022-03-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种非洲猪瘟病毒I73R基因条件性缺失毒株的构建及其作为疫苗的应用。本发明在基因Ⅱ型非洲猪瘟(African swine fever,ASF)亲本毒株ASFV CN/GS/2018中条件性敲除I73R基因构建了ASFV I73R基因条件性缺失毒株(vI73Ri);所述vI73Ri是一株安全性高的减毒ASF候选疫苗株,对猪完全致弱、免疫猪无典型ASF临床症状、免疫后在猪血液内检测到非常低的病毒,且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒提供100%免疫保护,可作为安全和有效的防控ASF疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN113416768B
公开(公告)日:2022-05-17
申请号:CN202110761133.0
申请日:2021-07-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/6851 , C12N15/113 , C12N15/55 , C12N5/10 , A61K48/00 , A61K31/713 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于生物基因工程技术领域,具体涉及一种PRKRA基因作为靶点在抑制小反刍兽疫病毒复制中的应用。本发明首先发现通过抑制或沉默宿主PRKRA基因,能够抑制小反刍兽疫病毒的复制,可作为靶点用于制备抑制小反刍兽疫病毒复制的药物;其次,以PRKRA基因为靶点,本发明设计了小干扰RNA,所述小干扰RNA能够干扰小反刍兽疫病毒复制,可用于制备抑制小反刍兽疫病毒的复制的药物;并且,本发明提供了一种特异性靶向PRKRA基因的sgRNA,所述的sgRNA能够特异性靶向PRKRA基因,结合CRISPR‑Cas9技术实现了PRKRA基因的完全敲除,获得的单克隆细胞系PRKRA‑KOs对PPRV具有抗性表型,能够显著抑制PPRV在细胞内的复制,为进一步研究PRKRA基因在细胞内调控病原微生物复制的分子机制提供研究工具和材料。
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公开(公告)号:CN114425053A
公开(公告)日:2022-05-03
申请号:CN202210181584.1
申请日:2022-02-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K31/5377 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于非洲猪瘟治疗技术领域,具体涉及化合物阿瑞吡坦在预防或治疗非洲猪瘟中的应用。本发明发现化合物阿瑞吡坦能够显著抑制ASFV复制,并且发现阿瑞吡坦不仅抑制D1133L的转录和蛋白表达,而且可以降低p30和p72的转录和蛋白表达水平,阻止病毒入侵宿主细胞,可用于抑制ASFV的早、晚期感染。因此,化合物阿瑞吡坦可用于预防或治疗非洲猪瘟。
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公开(公告)号:CN114316036A
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN202210011206.9
申请日:2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 杨洋 , 茹毅 , 秦晓东 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/577 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种O型口蹄疫病毒广谱中和抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1为免疫原,免疫Balb/c小鼠,经细胞融合,筛选获得一株高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系,并获得了一种鼠单克隆抗体9H6‑VP1,所述单克隆抗体9H6‑VP1为IgG1型单克隆抗体。免疫印迹试验表明所述单克隆抗体9H6‑VP1对O型不同谱系病毒(O/ZK/93、O/Mya/98和O/HK/93)具有广谱反应性,而不和A型毒株进行反应;而且病毒中和实验表明所述单克隆抗体对O/ZK/93、O/Mya/98和O/HK/93均具有中和活性,可阻止病毒入侵,保护机体免受感染。
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公开(公告)号:CN114316035A
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN202210010319.7
申请日:2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 杨洋 , 秦晓东 , 茹毅 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种通用型的口蹄疫病毒结构蛋白抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒146s为免疫原,免疫Balb/c小鼠,经细胞融合,筛选获得两株高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系,并获得了两种鼠单克隆抗体m33和m77。免疫印迹和间接免疫荧光试验表明所述单克隆抗体m33和m77对O型不同谱系病毒和A型谱系不同病毒均具有广谱反应性。m33和m77抗体特异性结合在FMDV结构蛋白中的型间保守抗原表位,相较于现有抗体,显著提高了检测结果的灵敏度和特异性,适用于O型和A型FMDV感染或灭活疫苗免疫后结构蛋白抗体的检测,是一种FMD非免疫动物群体感染状况监测的新方法。
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公开(公告)号:CN114058619A
公开(公告)日:2022-02-18
申请号:CN202111392731.1
申请日:2021-11-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/55 , C12N5/10 , A61K39/125 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及RIPLET敲除细胞系的构建及作为小核糖核酸病毒科病毒疫苗生产细胞系的应用。本发明首先发现,抑制宿主细胞中RIPLET基因表达能促进小核糖核酸病毒科病毒,尤其是口蹄疫病毒和塞内卡病毒的复制;其次,本发明提供了一种特异性靶向RIPLET的sgRNA,所述sgRNA能够特异性靶向RIPLET基因,结合CRISPR‑Cas9技术实现了RIPLET基因的敲除,获得的单克隆细胞系能够显著促进小核糖核酸病毒科病毒,尤其是口蹄疫病毒和塞内卡病毒的复制,提高小核糖核酸病毒科病毒疫苗的生产量和抗原表达量,可作为小核糖核酸病毒科病毒疫苗的生产细胞系,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN113082049B
公开(公告)日:2022-01-14
申请号:CN202110442821.0
申请日:2021-04-23
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K33/18 , A61P31/20 , A61K31/4155
Abstract: 本发明属于非洲猪瘟治疗技术领域,具体涉及碘化钾或含有碘化钾的组合物用于预防或治疗非洲猪瘟的新用途。本发明意外发现,碘化钾(KI)能够抑制非洲猪瘟病毒蛋白p72和p30的表达,抑制非洲猪瘟病毒基因拷贝数和病毒滴度,能够抑制ASFV的复制和感染,用于预防或治疗非洲猪瘟;同时,本发明发现,碘化钾(KI)联合ML‑60218能够显著抑制非洲猪瘟病毒蛋白p30、p72的表达,阻止病毒入侵宿主细胞,可用于抑制ASFV感染的整个时期;并且碘化钾(KI)联合ML‑60218能够显著抑制非洲猪瘟病毒的复制,降低非洲猪瘟病毒感染后的病毒滴度,可作为非洲猪瘟病毒的抑制剂,用于预防或治疗非洲猪瘟。
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公开(公告)号:CN113845572A
公开(公告)日:2021-12-28
申请号:CN202111363441.4
申请日:2020-08-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一类促进猪机体产生广谱获得性免疫应答的多肽及其应用,属于生物医药技术领域;所述多肽包括第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽中的一种或几种;所述第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.5所示。本发明的多肽能够高水平促进健康猪机体的单核巨噬细胞增殖,显著促进健康猪机体的CD8+T细胞及B细胞分泌IFN‑γ从而增强猪机体产生广谱获得性免疫应答,能够作为猪病疫苗的有效组分或者疫苗免疫增强剂。
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公开(公告)号:CN113265435A
公开(公告)日:2021-08-17
申请号:CN202110667590.3
申请日:2021-06-16
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及基因工程与生物化学技术领域,具体为一种运用同一种细菌源重组生物酶催化生成三种第二信使分子,即环二核苷酸c‑di‑GMP、c‑di‑AMP和3′3′‑cGAMP的方法。所述重组生物酶为重组霍乱弧菌二核苷酸环化酶DncV,即重组DncV酶。DncV的氨基酸序列如序列表的序列1所示。本发明利用基因工程学技术首先制备可溶性表达的重组霍乱弧菌二核苷酸环化酶DncV,然后利用生物化学方法以ATP、GTP或ATP和GTP为底物,该生物酶分别催化合成高活性、专一性的c‑di‑GMP、c‑di‑AMP或3’3’‑cGAMP,提供简单快速、成本低廉、条件温和、产率高以及可大规模生产三种CDNs的制备方法;同时提供一种能够鉴定重组DncV酶及其催化产物c‑di‑GMP、c‑di‑AMP或3’3’‑cGAMP生物学活性的方法。
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