公开(公告)号：CN111926081B

公开(公告)日：2024-07-23

申请号：CN202010661487.3

申请日：2020-07-10

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 景志忠 ,  房永祥 ,  贾怀杰 ,  陈国华 ,  何小兵 ,  李军成 ,  杨帆 ,  李维克 ,  娄忠子 ,  李政厅

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/686 ,  A01K67/02

Abstract: 本发明属于实验动物遗传育种技术领域，公开了一种单一毛色近交系合作小型猪培育方法及遗传辅助鉴定方法。以原产地合作猪为原始种子，以体表毛色松鼠背色和小体型为控制目标定向遗传；将具有松鼠背色的小体型合作猪以兄妹或父女、母子方式交配进行繁殖，选留松鼠背色和小体型子代猪作为种猪继续繁殖，近交繁育15代以上，追踪观察和测定其外貌特征、生长发育、生产性能以及繁殖性能指标；经封闭定向近交选育，使松鼠背色遗传性状完全稳定，并通过10个微卫星DNA遗传多态性位点检测辅助鉴定和控制，获得了松鼠背色合作小型猪的关键遗传位点标志。本发明填补了国际这一领域的空白，解决了单一毛色近交系合作小型猪遗传控制和鉴定的难题。

公开(公告)号：CN111926081A

公开(公告)日：2020-11-13

申请号：CN202010661487.3

申请日：2020-07-10

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 景志忠 ,  房永祥 ,  贾怀杰 ,  陈国华 ,  何小兵 ,  李军成 ,  杨帆 ,  李维克 ,  娄忠子 ,  李政厅

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/686 ,  A01K67/02

Abstract: 本发明属于实验动物遗传育种技术领域，公开了一种单一毛色近交系合作小型猪培育方法及遗传辅助鉴定方法。以原产地合作猪为原始种子，以体表毛色松鼠背色和小体型为控制目标定向遗传；将具有松鼠背色的小体型合作猪以兄妹或父女、母子方式交配进行繁殖，选留松鼠背色和小体型子代猪作为种猪继续繁殖，近交繁育15代以上，追踪观察和测定其外貌特征、生长发育、生产性能以及繁殖性能指标；经封闭定向近交选育，使松鼠背色遗传性状完全稳定，并通过10个微卫星DNA遗传多态性位点检测辅助鉴定和控制，获得了松鼠背色合作小型猪的关键遗传位点标志。本发明填补了国际这一领域的空白，解决了单一毛色近交系合作小型猪遗传控制和鉴定的难题。

公开(公告)号：CN112301163A

公开(公告)日：2021-02-02

申请号：CN202011213851.6

申请日：2020-11-04

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 景志忠 ,  房永祥 ,  李政厅 ,  贾怀杰 ,  娄忠子 ,  何小兵 ,  朱丽珂 ,  陈国华 ,  李维克 ,  高真贞 ,  杨帆 ,  刘娟

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及一种病毒检测试剂盒及其使用方法，特别是一种用于检测鉴别山羊痘病毒属病毒(山羊痘病毒，绵羊痘病毒、牛结节性皮肤病病毒)的试剂盒及用于非疾病诊断目的的使用方法。本发明的检测鉴别山羊痘病毒属病毒(山羊痘病毒、绵羊痘病毒、牛结节性皮肤病病毒)的试剂盒内包括序列为SEQ ID No.1和SEQ ID No.2的特异性引物。本发明具有高特异性和高灵敏度；其性价比高，只需一对特异性引物，即可对任何扩增子上的未知突变进行筛查，相比Taq‑man探针法而言，成本大大降低，操作简便。

公开(公告)号：CN113265435A

公开(公告)日：2021-08-17

申请号：CN202110667590.3

申请日：2021-06-16

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 景志忠 ,  何小兵 ,  龙朝琳 ,  陈国华 ,  杨帆 ,  贾怀杰 ,  房永祥 ,  李维克 ,  娄忠子

IPC: C12P19/36 ,  C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明涉及基因工程与生物化学技术领域，具体为一种运用同一种细菌源重组生物酶催化生成三种第二信使分子，即环二核苷酸c‑di‑GMP、c‑di‑AMP和3′3′‑cGAMP的方法。所述重组生物酶为重组霍乱弧菌二核苷酸环化酶DncV，即重组DncV酶。DncV的氨基酸序列如序列表的序列1所示。本发明利用基因工程学技术首先制备可溶性表达的重组霍乱弧菌二核苷酸环化酶DncV，然后利用生物化学方法以ATP、GTP或ATP和GTP为底物，该生物酶分别催化合成高活性、专一性的c‑di‑GMP、c‑di‑AMP或3’3’‑cGAMP，提供简单快速、成本低廉、条件温和、产率高以及可大规模生产三种CDNs的制备方法；同时提供一种能够鉴定重组DncV酶及其催化产物c‑di‑GMP、c‑di‑AMP或3’3’‑cGAMP生物学活性的方法。

公开(公告)号：CN112198311A

公开(公告)日：2021-01-08

申请号：CN202010988707.3

申请日：2020-09-18

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 景志忠 ,  陈国华 ,  贾怀杰 ,  何小兵 ,  房永祥 ,  周广青 ,  娄忠子 ,  李维克

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/543 ,  C07K14/065 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明公开一种用于检测牛结节性皮肤病的竞争ELISA抗体检测试剂盒及制备方法。本发明的试剂盒包括：包被有GTPV‑ORF117编码的抗原蛋白的酶标板，竞争抗体，酶标二抗，样品稀释液，洗涤液，显色底物，及终止液等。本发明的检测试剂盒制备方法是：以提取的山羊痘病毒GTPV基因组DNA为模板，以SEQ ID No.1和SEQIDNo.2为引物扩增得到ORF117胞外区扩增片段，将扩增片段构建到原核表达载体pET‑30a中，表达质粒转化BL21(DE3)感受态，诱导表达获得ORF117胞外区重组蛋白，并将其包被于酶标板上封闭；以ORF117胞外区重组蛋白免疫兔，收集抗ORF117蛋白兔血清制备竞争抗体。本发明具有制备方便，价格低廉，不影响诊断的效率，诊断制剂成本低的优点，可以满足我国现阶段LSD感染、爆发、防控的需求。