公开(公告)号：CN114058619B

公开(公告)日：2023-11-14

申请号：CN202111392731.1

申请日：2021-11-19

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 郑海学 ,  朱紫祥 ,  张向乐 ,  曹伟军 ,  杨帆 ,  唐闻达 ,  李攀 ,  齐晓兰 ,  顾峰幸 ,  陈文哲 ,  张克山 ,  刘湘涛

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/55 ,  C12N5/10 ,  A61K39/125 ,  A61K39/135 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及RIPLET敲除细胞系的构建及作为小核糖核酸病毒科病毒疫苗生产细胞系的应用。本发明首先发现，抑制宿主细胞中RIPLET基因表达能促进小核糖核酸病毒科病毒，尤其是口蹄疫病毒和塞内卡病毒的复制；其次，本发明提供了一种特异性靶向RIPLET的sgRNA，所述sgRNA能够特异性靶向RIPLET基因，结合CRISPR‑Cas9技术实现了RIPLET基因的敲除，获得的单克隆细胞系能够显著促进小核糖核酸病毒科病毒，尤其是口蹄疫病毒和塞内卡病毒的复制，提高小核糖核酸病毒科病毒疫苗的生产量和抗原表达量，可作为小核糖核酸病毒科病毒疫苗的生产细胞系，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN114058619A

公开(公告)日：2022-02-18

申请号：CN202111392731.1

申请日：2021-11-19

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 郑海学 ,  朱紫祥 ,  张向乐 ,  曹伟军 ,  杨帆 ,  唐闻达 ,  李攀 ,  齐晓兰 ,  顾峰幸 ,  陈文哲 ,  张克山 ,  刘湘涛

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/55 ,  C12N5/10 ,  A61K39/125 ,  A61K39/135 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及RIPLET敲除细胞系的构建及作为小核糖核酸病毒科病毒疫苗生产细胞系的应用。本发明首先发现，抑制宿主细胞中RIPLET基因表达能促进小核糖核酸病毒科病毒，尤其是口蹄疫病毒和塞内卡病毒的复制；其次，本发明提供了一种特异性靶向RIPLET的sgRNA，所述sgRNA能够特异性靶向RIPLET基因，结合CRISPR‑Cas9技术实现了RIPLET基因的敲除，获得的单克隆细胞系能够显著促进小核糖核酸病毒科病毒，尤其是口蹄疫病毒和塞内卡病毒的复制，提高小核糖核酸病毒科病毒疫苗的生产量和抗原表达量，可作为小核糖核酸病毒科病毒疫苗的生产细胞系，具有广阔的应用前景。