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公开(公告)号:CN116790519B
公开(公告)日:2025-05-06
申请号:CN202310649962.9
申请日:2023-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 郝荣增 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 朱紫祥 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 毛箬青 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及九组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒抗原P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、E165R蛋白、C129R蛋白、P72蛋白和Y蛋白组成的九组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒组合,其中将至少一种抗原或其抗原表位的编码基因插入腺病毒骨架载体构建为表达所述抗原或其抗原表位的重组腺病毒;所述九组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒组合能够产生较强的免疫反应;制备的九组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株攻毒具有良好的免疫保护力,无生物安全风险;且所述九组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗与九组分亚单位疫苗联合具有更好的免疫保护效力。
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公开(公告)号:CN116694583B
公开(公告)日:2024-10-22
申请号:CN202310649839.7
申请日:2023-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 郝荣增 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 朱紫祥 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 毛箬青 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒抗原蛋白P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的七组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒组合,其中将至少一种抗原或其抗原表位的编码基因插入腺病毒骨架载体构建为表达所述抗原或其抗原表位的重组腺病毒;所述七组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒组合能够产生较强的免疫反应;制备的七组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险;且所述的七组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗与七组分亚单位疫苗联合,具有更好的免疫保护效力。
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公开(公告)号:CN117467617A
公开(公告)日:2024-01-30
申请号:CN202311360016.9
申请日:2023-10-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/10 , C12N15/113 , C12N15/12 , C12N15/87 , A61K35/22 , A61K31/7105 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种敲除vimentin基因的MA‑104细胞系MA‑104‑KO‑vimentin及其构建方法和应用。细胞系MA‑104‑KO‑vimentin的保藏编号为CCTCC:C2023142或CCTCC:C2023229。细胞系MA‑104‑KO‑vimentin的构建方法,包括:(1)gRNA设计。(2)将gRNA通过瞬时转染到细胞中,通过CAT Tool分析切割效率,选择切割效率最高的gRNA用于生产KO细胞系。(3)单克隆细胞培养。(4)单克隆细胞筛选。本发明利用CRISPR‑Cas9系统构建了稳敲除vimentin基因的MA‑104细胞系。
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公开(公告)号:CN116694583A
公开(公告)日:2023-09-05
申请号:CN202310649839.7
申请日:2023-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 郝荣增 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 朱紫祥 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 毛箬青 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒抗原蛋白P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的七组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒组合,其中将至少一种抗原或其抗原表位的编码基因插入腺病毒骨架载体构建为表达所述抗原或其抗原表位的重组腺病毒;所述七组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒组合能够产生较强的免疫反应;制备的七组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险;且所述的七组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗与七组分亚单位疫苗联合,具有更好的免疫保护效力。
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公开(公告)号:CN116672443A
公开(公告)日:2023-09-01
申请号:CN202310647769.1
申请日:2023-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 郝荣增 , 朱紫祥 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 毛箬青 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
IPC: A61K39/12 , A61K39/385 , A61K9/14 , A61K47/34 , A61K47/32 , A61K47/36 , A61K47/10 , A61K47/42 , A61K47/02 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟组合疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒抗原P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合,其中至少一种抗原与纳米颗粒载体形成含有所述抗原或其抗原表位的纳米颗粒;所述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合能够刺激机体产生较强的免疫反应;其次本发明制备了包含上述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合的疫苗,所述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险,突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题。
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公开(公告)号:CN116589539A
公开(公告)日:2023-08-15
申请号:CN202310374606.0
申请日:2023-04-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 朱紫祥 , 毛箬青 , 郝荣增 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
IPC: C07K14/01 , C07K19/00 , A61K39/12 , A61K39/295 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种九组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、E165R蛋白、C129R蛋白、P72蛋白、X蛋白和Y蛋白组成的非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合,所述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合能够诱导机体产生较强的免疫反应;其次本发明制备了包含上述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合的九组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗,所述九组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率,无生物安全风险,突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题,证明了非洲猪瘟亚单位疫苗研究方案的可行性。
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公开(公告)号:CN112881710B
公开(公告)日:2022-04-22
申请号:CN202110154139.1
申请日:2021-02-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及一种用于检测口蹄疫病毒抗体的抑制ELISA方法及应用,属于生物技术技术领域,本发明利用将阴阳性血清及被检血清直接在已包被捕获抗体的ELISA板上稀释后紧接着加入等量的稀释至工作浓度的病毒抗原,同时设置至少4孔病毒抗原对照(预先加入等体积的血清稀释液),被检血清及阴阳性血清中口蹄疫型特异抗体抑制病毒抗原与ELISA板上的捕获抗体结合,判定参照液相阻断ELISA方法,以病毒抗原对照孔OD值平均值的50%作为病毒抗原被50%抑制的临界值,成功地建立起了抑制ELISA方法,可用于检测口蹄疫抗体。
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公开(公告)号:CN113215109B
公开(公告)日:2022-02-18
申请号:CN202110450549.0
申请日:2021-04-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 李丹 , 党文 , 张克山 , 刘华南 , 申超超 , 冯涛 , 李攀 , 齐晓兰 , 张敬 , 刘迎琦 , 田宏 , 茹毅 , 杨帆 , 曹伟军 , 何继军 , 刘志杰 , 张伟 , 郭建宏 , 殷宏 , 孙研 , 刘湘涛
IPC: C12N7/00 , C12N15/34 , A61K39/187 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种免疫抑制基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒及疫苗。本发明首先发现了ASFV MGF‑110‑9L基因和ASFV MGF‑505‑7R基因具有较强的免疫抑制效果,在非洲猪瘟病毒上敲除上述基因能够减弱非洲猪瘟病毒的毒力,是制备减毒猪瘟疫苗的新靶标基因;采用基因工程手段在非洲猪瘟亲本毒株ASFV CN/GS/2018中联合缺失ASFV G‑ACD‑00190基因、ASFV MGF‑110‑9L基因、ASFV G‑ACD‑00210基因和ASFV MGF‑505‑7R基因编码蛋白的功能,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株;所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪健康,且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒(100HAD50剂量)提供100%免疫保护,可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN113151310B
公开(公告)日:2022-02-18
申请号:CN202110176679.X
申请日:2021-02-09
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种可用作疫苗的基因缺失减毒非洲猪瘟病毒株及其构建方法,该病毒株是亲本非洲猪瘟病毒ASFV CN/GS/2018分离株的基因缺失弱毒株。本发明发现了DP71L基因是对猪致病性致弱的新靶标基因,并发现联合丧失MGF360‑18R基因、DP71L基因和DP96R基因编码蛋白的功能,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株;所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株高剂量(104HAD50)免疫猪后,对猪完全致弱,免疫猪健康,不发病,与免疫猪同居猪核酸也呈阴性,不水平传播,具有较好安全性;且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株的攻毒提供100%免疫保护,可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN114015660A
公开(公告)日:2022-02-08
申请号:CN202111334156.X
申请日:2021-11-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 冯涛 , 马昭 , 刘华南 , 李攀 , 石正旺 , 申超超 , 吴盼雪 , 齐晓兰 , 张克山 , 李丹 , 党文 , 杨波 , 王琦 , 曹丽艳 , 朱紫祥 , 田宏 , 郭建宏 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及缺失十个基因的减毒非洲猪瘟病毒株及作为疫苗的应用。本发明在ASFV CN/GS 2018病毒中联合缺失了I177L、MGF 360(9L、10L、11L、12L、13L、14L)、MGF 505(1R、2R、3R)基因,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株;所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪健康,且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒提供100%免疫保护,可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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