公开(公告)号：CN117467617A

公开(公告)日：2024-01-30

申请号：CN202311360016.9

申请日：2023-10-20

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 张克山 ,  郑海学 ,  陈玲玲 ,  田宏 ,  朱紫祥 ,  杨帆 ,  曹伟军 ,  马旭升 ,  茹毅 ,  冯涛 ,  郭建宏

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/113 ,  C12N15/12 ,  C12N15/87 ,  A61K35/22 ,  A61K31/7105 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种敲除vimentin基因的MA‑104细胞系MA‑104‑KO‑vimentin及其构建方法和应用。细胞系MA‑104‑KO‑vimentin的保藏编号为CCTCC:C2023142或CCTCC:C2023229。细胞系MA‑104‑KO‑vimentin的构建方法，包括：（1）gRNA设计。（2）将gRNA通过瞬时转染到细胞中，通过CAT Tool分析切割效率，选择切割效率最高的gRNA用于生产KO细胞系。（3）单克隆细胞培养。（4）单克隆细胞筛选。本发明利用CRISPR‑Cas9系统构建了稳敲除vimentin基因的MA‑104细胞系。

公开(公告)号：CN117467617B

公开(公告)日：2024-08-09

申请号：CN202311360016.9

申请日：2023-10-20

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 张克山 ,  郑海学 ,  陈玲玲 ,  田宏 ,  朱紫祥 ,  杨帆 ,  曹伟军 ,  马旭升 ,  茹毅 ,  冯涛 ,  郭建宏

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/113 ,  C12N15/12 ,  C12N15/87 ,  A61K35/22 ,  A61K31/7105 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种敲除vimentin基因的MA‑104细胞系MA‑104‑KO‑vimentin及其构建方法和应用。细胞系MA‑104‑KO‑vimentin的保藏编号为CCTCC:C2023142或CCTCC:C2023229。细胞系MA‑104‑KO‑vimentin的构建方法，包括：（1）gRNA设计。（2）将gRNA通过瞬时转染到细胞中，通过CAT Tool分析切割效率，选择切割效率最高的gRNA用于生产KO细胞系。（3）单克隆细胞培养。（4）单克隆细胞筛选。本发明利用CRISPR‑Cas9系统构建了稳敲除vimentin基因的MA‑104细胞系。