-
公开(公告)号：CN104372110A
公开(公告)日：2015-02-25
申请号：CN201410745664.0
申请日：2014-12-09
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2561/101 , C12Q2561/113
Abstract: 本发明公开了一种用于检测小反刍兽疫病毒的TaqmanReal-timeRT-PCR试剂盒，包含扩增预混液、阴性对照、阳性对照以及序列SEQIDNO.1至SEQIDNO.2的扩增引物及SEQIDNO.3的探针引物的混合物。本发明的有益效果在于：利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化，通过Ct值和标准曲线的关系对起始模板进行定量分析，用来检测小反刍兽疫病毒的试剂盒，使得该试剂盒特异性高、稳定性好、操作简便；并且比普通PCR的灵敏度高，能够用于检测低微含量样品的小反刍兽疫病毒；不仅适用于科研单位定量分析，而且适合于各级防控单位，基层兽医站，大中型养殖场等的病原检测分析，具有良好的应用前景。
-
公开(公告)号：CN103695431A
公开(公告)日：2014-04-02
申请号：CN201410001384.9
申请日：2012-06-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/867 , C12N15/10 , A61P31/14
Abstract: 一种用于抑制猪瘟病毒复制的NS5B303shRNA，所述包含siRNA序列，shRNA慢病毒表达载体构建，复制缺陷型慢病毒的获得、慢病毒感染PK-15细胞（猪肾细胞）以及抑制猪瘟病毒复制效果的验证方法，该序列具有明显抑制猪瘟病毒在敏感细胞上复制的作用。本发明对猪瘟病毒体内外复制进行RNA干扰的探索，构建靶向猪瘟病毒基因组的特定保守基因区段的慢病毒载体介导的稳定整合的RNA干扰技术，有望构建靶向猪瘟病毒的siRNA的转基因动物。为shRNA应用于猪瘟病毒的基因功能研究以及猪瘟的防治积累了必要的实验数据，为动物的抗病育种提供前期准备。
-
公开(公告)号：CN103667297A
公开(公告)日：2014-03-26
申请号：CN201310752351.3
申请日：2012-06-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/113 , A61P31/14 , C12N15/867 , C12N15/10
Abstract: 一种用于抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的1010shRNA，所述包含siRNA序列、shRNA慢病毒表达载体构建、复制缺陷型慢病毒的获得、慢病毒感染Marc-145细胞（绿猴肾细胞）以及抑制PRRSV复制效果的验证方法，该序列具有明显抑制PRRSV在敏感细胞上复制的作用。本发明对PRRSV体内外复制进行RNA干扰的探索，构建靶向PRRSV基因组的特定保守基因区段的慢病毒载体介导的稳定整合的RNA干扰技术，有望构建靶向猪繁殖与呼吸综合征病毒的siRNA的转基因动物。为RNAi应用于猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因功能研究以及猪繁殖与呼吸综合征的防治积累了实验数据，为动物的抗病育种提供前期准备。
-
公开(公告)号：CN103436633A
公开(公告)日：2013-12-11
申请号：CN201310269949.7
申请日：2013-06-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 一种用于检测猪瘟病毒的TaqmanReal-timeRT-PCR试剂盒，包含OneStepRT-PCRbufferIII、ExTaqHS、PrimerScriptRTEnzymeMixII、阴性对照、阳性对照、以及序列SEQIDNO:1至SEQIDNO:2的扩增引物及SEQIDNO:3的探针引物的混合物。本发明将反转录和PCR扩增过程在一步反应中完成，使得检测时间缩短，有利于快速检测。本发明还使用了探针法，只有当探针引物特异的结合到扩增靶序列上时才会产生有效的结果，而且闭管操作的实时检测可以有效防止反应产物的污染，与普通PCR方法相比具有更高的准确性，有助于CSFV的防控和隐性带毒动物的剔除。
-
公开(公告)号：CN103266091A
公开(公告)日：2013-08-28
申请号：CN201310175324.4
申请日：2013-05-14
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/86 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种利用反向遗传操作技术制备的A型口蹄疫重组疫苗株及其制备方法和应用，一种是效价高、抗原匹配性和免疫保护率高的A型口蹄疫重组疫苗株，另一种是效价高、抗原匹配性、免疫保护率高且对宿主无致病性的A型口蹄疫重组无致病性疫苗株，疫苗株的抗原核苷酸序列为SEQIDNO:1所示，利用反向遗传操作系统能够拯救出病毒的真核质粒，用制备的重组疫苗株制成灭活苗，免疫猪和牛后可有效刺激机体产生免疫应答，并提供猪和牛体免疫保护作用，对A型AISA拓扑型毒株的10000倍牛半数感染剂量（BID50）攻毒实验，免疫保护率达100%，50%保护剂量（PD50）为10.81～13.59，可用于我国及其周边国家A型口蹄疫病毒的预防和控制。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102660546A
公开(公告)日：2012-09-12
申请号：CN201210180504.7
申请日：2012-06-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/867 , C12N15/10
Abstract: 一种用于抑制口蹄疫病毒复制的RNAi及其制备方法，所述包含siRNA序列、shRNA慢病毒表达载体构建、复制缺陷型慢病毒的获得、慢病毒感染PK-15细胞（猪肾细胞）以及抑制口蹄疫病毒复制效果的验证方法，该序列具有明显抑制口蹄疫病毒在敏感细胞上复制的作用。本发明对口蹄疫病毒体内外复制进行RNA干扰的探索，构建靶向口蹄疫病毒基因组的特定保守基因区段的慢病毒载体介导的稳定整合的RNA干扰技术，有望构建靶向口蹄疫病毒的siRNA的转基因动物。为RNAi应用于口蹄疫病毒的基因功能研究以及口蹄疫的防治积累了必要的实验数据，为动物的抗病育种提供前期准备。
-
公开(公告)号：CN101418303A
公开(公告)日：2009-04-29
申请号：CN200810150304.0
申请日：2008-07-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/40 , C12N15/70 , C07K14/08 , A61K39/187 , A61P31/14
Abstract: 一种猪瘟重组亚单位疫苗的制备方法，包括下述步骤：A.利用逆转录－聚合酶链式反应方法克隆猪瘟疫苗株E2蛋白的编码基因；B.构建融合E2基因：C.构建重组表达载体rE2；D.rE2的诱导表达：E.rE2纯化。F.Western blotting方法检测rE2活性。本发明创造性地以双E2基因串联表达方式使E2抗原表位的数量增加一倍，显著提高了重组E2亚单位疫苗的免疫效果；为提高双E2蛋白表达效率，在第二个E2基因 5′端起始密码子(ATG)上游增加一个大肠杆菌RBS序列(5′－AAGGAG－3′)；同时在串联的E2基因之间增加氨基酸接头5′－GSA GSAAGS GEF－3′，使获得的E2蛋白能够完整展示其抗原表位。本发明的E2蛋白重组亚单位疫苗，免疫保护效果与猪瘟兔化弱毒疫苗相当。
-
公开(公告)号：CN120060362A
公开(公告)日：2025-05-30
申请号：CN202410826564.4
申请日：2024-06-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒株、方法及应用，通过在基因Ⅱ型非洲猪瘟病毒中抑制ASFV‑G‑ACD‑01020基因表达、缺失或条件性敲除ASFV‑G‑ACD‑01020基因制备减毒非洲猪瘟病毒株的应用，所述的ASFV‑G‑ACD‑01020基因序列如SEQ ID NO.4所示；制备得到的非洲猪瘟病毒株ASFV 01020i对猪完全致弱、免疫猪无典型ASF临床症状、且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒提供100％免疫保护，可作为安全和有效的防控ASF疫情的候选疫苗，具有极大的社会价值。
-
公开(公告)号：CN119979484A
公开(公告)日：2025-05-13
申请号：CN202510189224.X
申请日：2025-02-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明提供了一种高抗原产量的重组口蹄疫病毒株及其构建方法和应用，属于生物技术领域。一种重组口蹄疫病毒株，其中L蛋白是第108位氨基酸发生突变或缺失的突变L蛋白。本发明发现宿主蛋白RAB20过表达抑制FMDV的复制，且通过蛋白酶体通路降解L蛋白，进而抑制病毒复制；本发明通过在FMDV L蛋白中对关键氨基酸位点(108)进行突变，构建了不被宿主蛋白RAB20抑制复制的重组口蹄疫病毒株，所述重组病毒能够稳定传代，且在BHK‑21细胞上具有高病毒滴度的特性，提高了病毒滴度及抗原产量，能够用于FMDV疫苗制备，具备良好的应用前景。
-
公开(公告)号：CN114895027B
公开(公告)日：2025-04-08
申请号：CN202210523485.7
申请日：2022-05-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , C07K16/10 , C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于单域抗体9‑4‑①免疫磁珠的直扩检测小反刍兽疫病毒的试剂盒及其应用。所述试剂盒包括SEQIDNO.1所示的小反刍兽疫病毒单域抗体9‑4‑①通过链霉亲和素‑生物素与磁珠进行偶联得到的单域抗体9‑4‑①免疫磁珠。本发明使用切胶纯化的单域抗体9‑4‑①蛋白与磁珠进行偶联获得免疫磁珠，免疫磁珠富集小反刍兽疫病毒后，无需提取基因组RNA，可直接对其进行扩增。本发明的提出克服了由于病毒含量低微，检出率低，容易漏检等问题；以及提取基因组RNA时费时、费财、费力，操作时污染环境等一系列难题，通过直接扩增富集产物不但节约时间、节省资源，而且高效、灵敏、特异、稳定，本发明的提出为小反刍兽疫病毒抗原的检测提供了一种高效的技术手段。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
319
records
(took 0.044 seconds)
