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公开(公告)号:CN111848749A
公开(公告)日:2020-10-30
申请号:CN202010754353.6
申请日:2018-05-23
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/015 , C12N15/35 , C12N15/70 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/535
Abstract: 本发明公开了猪细小病毒VLPs抗体检测试剂盒及其制备方法、应用,其检测试剂盒包括预包被猪细小病毒VLPs的酶标板、封闭液、样品稀释液、酶结合物、浓缩洗涤液、酶底物溶液和终止液。本发明是首次采用猪细小病毒的病毒样颗粒作为包被抗原,建立了可检测猪细小病毒的试剂盒,还试剂盒可对血清中的猪细小病毒的抗体水平进行快速检测;本发明试剂盒检测敏感性高、特异性和可重复性好,结果稳定。同时所采用的病毒样颗粒对操作者和环境安全无害、无传染性。另外本发明试剂盒应用大肠杆菌表达系统开发,因而具有经济、廉价的优点。
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公开(公告)号:CN108776225A
公开(公告)日:2018-11-09
申请号:CN201810501998.1
申请日:2018-05-23
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了猪细小病毒VLPs抗体检测试剂盒及其制备方法、应用,其检测试剂盒包括预包被猪细小病毒VLPs的酶标板、封闭液、样品稀释液、酶结合物、浓缩洗涤液、酶底物溶液和终止液。本发明是首次采用猪细小病毒的病毒样颗粒作为包被抗原,建立了可检测猪细小病毒的试剂盒,还试剂盒可对血清中的猪细小病毒的抗体水平进行快速检测;本发明试剂盒检测敏感性高、特异性和可重复性好,结果稳定。同时所采用的病毒样颗粒对操作者和环境安全无害、无传染性。另外本发明试剂盒应用大肠杆菌表达系统开发,因而具有经济、廉价的优点。
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公开(公告)号:CN105785037A
公开(公告)日:2016-07-20
申请号:CN201610190933.0
申请日:2016-03-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/558
CPC classification number: G01N33/6854 , G01N33/558 , G01N33/56983 , G01N2469/20
Abstract: 本发明涉及一种猪圆环病毒优势抗原表位肽建立快速检测层析试纸条及制备方法,可用于快速检测猪血液或血清中的抗体。试纸条包括支撑层,以及在所述支撑层上依次设置的加样层、金标蛋白释放垫、检测层和吸收层。金标抗体释放垫包埋有胶体金标记的重组G蛋白,检测层上设置有检测带和质控带,检测带固定有猪圆环病毒2型核衣壳蛋白上的优势抗原表位肽,质控带固定有ProteinG免疫兔血清纯化后的IgG。本发明的试纸条操作简单、重复性好、灵敏度高,结果快速直观、工艺简单可大量制备,成本低廉,适合基层大批量现场检测并可用于猪群PCV2感染的早期快速诊断。
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公开(公告)号:CN103409377B
公开(公告)日:2015-12-23
申请号:CN201310381323.5
申请日:2013-08-28
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开一种犬细小病毒病毒样颗粒,以及其制备方法及用途。本发明的犬细小病毒病毒样颗粒由VP2蛋白组成,其基因序列为SEQ ID №1。本发明的犬细小病毒病毒样颗粒的制备方法是以犬细小病毒DNA为模板,用SEQ ID №2和SEQ ID №3为引物扩增得到扩增产物,将扩增产物插入载体pSMK中,得重组质粒pSMK-VP2,将pSMK-VP2转化到大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIL株,在LB培养并以IPTG诱导表达重组蛋白,再将重组蛋白纯化后进行体外组装,得到犬细小病毒病毒样颗粒。
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公开(公告)号:CN104689340B
公开(公告)日:2018-07-06
申请号:CN201510128809.7
申请日:2015-03-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K47/54 , A61K31/704 , A61K47/46 , A61P35/00
Abstract: 发明公开一种抗肿瘤药物靶向载体及这种载体与抗肿瘤药物的偶联方法,以及所形成的一种抗肿瘤药物。本发明所述的这种肿瘤药物靶向载体为口蹄疫病毒样颗粒。本发明的肿瘤药物靶向载体与抗肿瘤化学药物的化学偶联方法是:用碳二亚胺(EDC)和N‑羟基琥珀酰亚胺(NHS)化学偶联试剂活化肿瘤药物载体,然后再与其它抗肿瘤药物偶联。本发明的抗肿瘤药物能够和肿瘤细胞表面过量表达的整合素受体特异性结合,且无须对其表面进行靶向修饰,可提高抗癌药物的靶向治疗作用。
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公开(公告)号:CN104560898B
公开(公告)日:2017-09-22
申请号:CN201510037803.9
申请日:2015-01-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开一种用病毒样颗粒包被量子点的方法,以及用这种方法制备的物质。本发明的方法中,CdSe/ZnS油溶性量子点修饰方法为:将商品化的CdSe/ZnS正己烷溶液,加入到的无水乙醇中,超声处理后,离心弃上清后加入氯仿进行溶解,然后加入2‑巯基乙酸(MAA)或3‑巯基丙酸(MPA)混匀,经离心处理弃上清,将沉淀用氯仿洗涤,再用硼酸盐溶液溶解沉淀。本发明可降低量子点的生物毒性作用,并可选择性的侵染正常细胞,在侵染细胞的方式上具有特异性,能提高QD进入细胞的靶向性。
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公开(公告)号:CN102660546A
公开(公告)日:2012-09-12
申请号:CN201210180504.7
申请日:2012-06-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/867 , C12N15/10
Abstract: 一种用于抑制口蹄疫病毒复制的RNAi及其制备方法,所述包含siRNA序列、shRNA慢病毒表达载体构建、复制缺陷型慢病毒的获得、慢病毒感染PK-15细胞(猪肾细胞)以及抑制口蹄疫病毒复制效果的验证方法,该序列具有明显抑制口蹄疫病毒在敏感细胞上复制的作用。本发明对口蹄疫病毒体内外复制进行RNA干扰的探索,构建靶向口蹄疫病毒基因组的特定保守基因区段的慢病毒载体介导的稳定整合的RNA干扰技术,有望构建靶向口蹄疫病毒的siRNA的转基因动物。为RNAi应用于口蹄疫病毒的基因功能研究以及口蹄疫的防治积累了必要的实验数据,为动物的抗病育种提供前期准备。
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公开(公告)号:CN106801041A
公开(公告)日:2017-06-06
申请号:CN201710029075.6
申请日:2017-01-16
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/04 , A61K39/23 , A61P31/20 , G01N33/569
CPC classification number: C12N7/00 , A61K39/12 , C12N2750/14323 , C12N2750/14334 , C12N2750/14351 , G01N33/56983
Abstract: 本发明公开一种猪细小病毒的病毒样颗粒、其制备方法及应用。本发明的猪细小病毒的病毒样颗粒的制备方法是:对猪细小病毒VP2基因进行优化,得到优化的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的猪细小病毒VP2基因,将优化的VP2基因插入到插入载体pSMK中得重组pSMK‑VP2质粒,将重组质粒转化到大肠杆菌中得重组菌,经IPTG诱导表达,收集菌体,纯化重组蛋白,再将纯化后的重组蛋白进行体外组装,得猪细小病毒病毒样颗粒。本发明的猪细小病毒病毒样颗粒可在制备用于预防猪细小病毒引起疾病的疫苗中的应用,也可在制备用于检测猪细小病毒的检测试剂中的应用。
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公开(公告)号:CN106645682A
公开(公告)日:2017-05-10
申请号:CN201611080554.2
申请日:2016-11-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/531
CPC classification number: G01N33/531
Abstract: 本发明公开了一种用于检测Asia I型口蹄疫的胶体金试纸及其制备方法,涉及血清学检测技术领域,包括底板,底板的顶部设置有检测层,检测层包括检测线和对照线,检测层的顶部靠近对照线的一侧设置有吸收层,靠近检测线的一侧设置有免疫金标垫,免疫金标垫的顶部设置有样品垫;免疫金标垫上涂覆有胶体金颗粒,该胶体金颗粒上结合有proteinG,检测线上涂覆/浸润有Asia I型口蹄疫病毒样颗粒相对应的纯化后蛋白,对照线上涂覆/浸润有兔IgG。所述免疫金标垫胶体金与proteinG的比例为2×104:1~2。本发明,能够实时快速诊断Asia I型口蹄疫,且准确度较高。
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公开(公告)号:CN106479986A
公开(公告)日:2017-03-08
申请号:CN201610929279.0
申请日:2016-10-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/04 , C12N15/42 , C12N15/70 , A61K39/135 , A61P31/14
CPC classification number: C12N7/00 , A61K39/12 , A61K2039/5258 , A61K2039/552 , C12N15/70 , C12N2770/32123 , C12N2770/32134 , C12N2800/101 , C12N2800/22
Abstract: 本发明公开了一种O型口蹄疫病毒样颗粒及其制备方法和应用。所述的O型口蹄疫病毒样颗粒是由O型口蹄疫病毒的结构蛋白VP0、VP1以及优化后的VP3结构蛋白组装而成,其中VP1的基因序列为SEQ ID NO.1所示,VP0的基因序列为SEQ ID NO.2所示,优化后的VP3的基因序列为SEQ ID NO.3所示。本发明尝试将口蹄疫病毒结构蛋白VP3的部分区段进行人工缺失,结果显示,VP3基因经人工缺失后,VP3目的蛋白的表达量较突变前提高了20%,病毒样颗粒的组装效率提高了15%左右,且动物试验结果表明其免疫原性良好,与未缺失VP3组装得到的VLPs无显著差别。本发明的提出为口蹄疫疫苗的研制提供了一种新的技术手段。
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