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公开(公告)号：CN113151310A
公开(公告)日：2021-07-23
申请号：CN202110176679.X
申请日：2021-02-09
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种可用作疫苗的基因缺失减毒非洲猪瘟病毒株及其构建方法，该病毒株是亲本非洲猪瘟病毒ASFV CN/GS/2018分离株的基因缺失弱毒株。本发明发现了DP71L基因是对猪致病性致弱的新靶标基因，并发现联合丧失MGF360‑18R基因、DP71L基因和DP96R基因编码蛋白的功能，降低了亲本毒株的毒性，获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株；所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株高剂量(104HAD50)免疫猪后，对猪完全致弱，免疫猪健康，不发病，与免疫猪同居猪核酸也呈阴性，不水平传播，具有较好安全性；且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株的攻毒提供100％免疫保护，可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗，具有极大的社会价值。
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公开(公告)号：CN111996201B
公开(公告)日：2021-07-13
申请号：CN202010212907.X
申请日：2020-03-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 杨帆 , 曹伟军 , 蒋保余 , 朱紫祥 , 魏婷 , 郑敏 , 田宏 , 张克山 , 张伟 , 刘永杰 , 党文 , 马旭升 , 李丹 , 茹毅 , 何继军 , 郭建宏 , 刘湘涛
IPC: C12N15/41 , C12N15/42 , C12N7/01 , C12N15/85 , A61K39/125 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供一种重组A型口蹄疫病毒VP1基因的塞内卡重组病毒、重组疫苗株及其制备方法和应用，涉及基因工程技术领域。本发明提供了塞内卡病毒重组核酸、包含所述重组核酸的塞内卡重组病毒、包含所述塞内卡重组病毒的塞内卡重组疫苗株及其制备方法和应用。本发明对SVV/FJ/001株基因缺失突变改造，在其cDNA中融合进A型FMDV的VP1基因，得到塞内卡重组病毒，该重组病毒能够表达融合进的基因，且表达产物具有良好的反应原性；获得的疫苗株抗原产能高，致病性显著降低甚至对猪无致病性，灭活疫苗免疫动物后不仅能激发SVA的免疫应答，而且能产生针对融合基因的免疫活性，可用于塞内卡病毒及一种或多种非塞内卡病毒的防控。
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公开(公告)号：CN112076314A
公开(公告)日：2020-12-15
申请号：CN202011020241.4
申请日：2020-09-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 茹毅 , 刘华南 , 张贵财 , 杨帆 , 李丹 , 郭建宏 , 何继军 , 张娇燕 , 李亚军 , 马坤 , 伍春平 , 郝荣增 , 卢炳州 , 田宏 , 朱紫祥 , 张克山 , 曹伟军 , 刘永杰 , 靳野 , 马旭升 , 党文
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域，具体涉及一种A型口蹄疫亚单位疫苗及其制备方法和应用。本发明以我国2013年A型口蹄疫病毒流行株(A/GDMM/2013)的三种结构蛋白VP0、VP3和VP1的氨基酸序列为基础进行优化设计，并借助小泛素样融合蛋白(SUMO)，筛选出单个质粒在大肠杆菌中同时高效、均一、可溶性表达这三种结构蛋白，且三种病毒结构蛋白成功在体外自组装；最终获得的目标蛋白约占菌体总蛋白30％以上，纯化后目标蛋白产量最高可达150mg/L。用本发明方法制备的口蹄疫疫苗，对我国A型口蹄疫流行毒具有良好的保护作用，疫苗最小全保护免疫剂量可低至20μg/头份。
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公开(公告)号：CN111996203A
公开(公告)日：2020-11-27
申请号：CN202010212917.3
申请日：2020-03-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 宁建刚 , 马坤 , 郝荣增 , 张伟 , 郑敏 , 魏婷 , 蒋保余 , 田宏 , 张克山 , 党文 , 马旭升 , 李丹 , 茹毅 , 何继军 , 郭建宏 , 刘湘涛
IPC: C12N15/41 , C12N15/42 , C12N7/01 , C12N15/85 , A61K39/125 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供一种重组O型口蹄疫病毒表位基因的塞内卡重组病毒、重组疫苗及其制备方法和应用，涉及基因工程技术领域。本发明获得SVV/FJ/001株全长cDNA，并对其5'UTR进行缺失及突变改造，同时在SVA cDNA中融合进串联的O型FMDV的重组表位基因，构建得到重组口蹄疫抗原表位的塞内卡重组病毒，该重组病毒能够表达融合进的口蹄疫B细胞表位和T细胞表位，且表达产物具有良好的反应原性，重组病毒的致病性显著降低甚至对猪无致病性，显著提高了毒株的生物安全性；制备的灭活疫苗具有良好的免疫原性，在有效激发SVA中和抗体的同时还能产生针对FMDV的特异性抗体，可用于塞内卡病毒及一种或多种非塞内卡病毒的防控。
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公开(公告)号：CN111621526A
公开(公告)日：2020-09-04
申请号：CN202010522276.1
申请日：2020-06-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/90 , C12N15/85 , C12N5/10 , A01K67/027 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种TOB1基因敲除单克隆细胞系的构建方法和应用。本发明发现在猪肾上皮细胞系IBRS-2中通过基因编辑技术敲除TOB1基因能够获得了一种抑制FMDV复制的单克隆细胞系细胞TOB1-KOs；细胞系TOB1-KOs经FMDV攻毒后，检测不到病毒核酸和蛋白，表明在IBRS-2中敲除TOB1基因获得的单克隆细胞系TOB1-KOs对具有FMDV抗性表型，能够完全抑制FMDV的复制，为未来预防或抑制FMDV感染提供一种可行策略。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108103078B
公开(公告)日：2019-02-19
申请号：CN201810003888.2
申请日：2018-01-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/41 , C12N7/00 , A61K39/125 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种分离的塞尼卡谷病毒核酸、一种塞尼卡谷病毒株、一种包含所述塞尼卡谷病毒株的塞尼卡谷病毒疫苗及其制备方法，以及所述塞尼卡谷病毒疫苗在制备用于预防和/或控制动物塞尼卡谷病毒引起的相关疾病的药物中的用途。
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公开(公告)号：CN108384893A
公开(公告)日：2018-08-10
申请号：CN201810415406.4
申请日：2018-05-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种用于检测口蹄疫病毒和塞尼卡谷病毒的实时荧光定量RT-PCR试剂盒及其应用。所述试剂盒包含分别用于检测口蹄疫病毒和塞尼卡谷病毒的引物以及探针，优选的，所述试剂盒中还包含核酸提取液、2×Direct qRT-PCR Mix、酶混合液、阴性对照、阳性对照。使用本发明的试剂盒检测口蹄疫病毒和塞尼卡谷病毒，具有特异性高，灵敏度高，稳定性好，操作简便等优点，用户无需额外提取病毒RNA，无需反转录，只需将待检样品加入反应管中，利用荧光信号的变化，通过Ct值和标准曲线的关系对起始模板进行定量分析，即可计算待检样品拷贝数。不仅适用于科研单位定量分析，而且适合于各级防控单位，基层兽医站，大中型养殖场等的病原检测分析，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN107741495A
公开(公告)日：2018-02-27
申请号：CN201710771922.6
申请日：2017-08-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/535
CPC classification number: G01N33/56983 , G01N33/535 , G01N2333/08
Abstract: 本发明公开了一种用于塞内卡病毒抗原检测的双抗夹心ELISA试剂盒及其应用。所述的试剂盒包括塞内卡病毒豚鼠抗IgG包被的酶标板以及HRP标记的塞内卡病毒兔抗IgG。本发明使用HRP标记兔抗IgG，替代传统ELISA中的一抗和二抗，简化了操作步骤。同时通过改变包被稳定工艺将SVV豚鼠抗IgG包被到固相载体表面，改变了酶标抗体稀释液的配制工艺，可使酶标抗体工作液稳定保存而不改变其活性和效价，建立了特异检测SVV抗原的双抗夹心ELISA试剂盒及其检测方法。本发明的提出弥补了SVV ELISA抗原检测的空缺，克服了现有病毒分离检测SVV抗原重复性和敏感性低、操作程序繁琐的问题，为SVV抗原检测提供了一种有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN101270155B
公开(公告)日：2011-04-27
申请号：CN200810105955.8
申请日：2008-05-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/09 , C12N15/42 , C12N15/63 , C12N5/10 , C12N15/866 , A61K39/135 , A61P31/14 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种通过耐酸性改造在昆虫细胞中组装口蹄疫病毒空衣壳的方法。本发明的在昆虫细胞中组装口蹄疫病毒空衣壳的方法，包括以下步骤：1)将改造后的P12A基因和口蹄疫病毒的非结构蛋白基因3C通过杆状病毒载体导入细菌内进行重组，得到重组杆状病毒A；用重组杆状病毒A的DNA转染昆虫细胞，获得口蹄疫病毒空衣壳。本发明首次在昆虫细胞中组装成了完整的FMDV空衣壳，为基因工程亚单位疫苗和新型诊断试剂的研发奠定了基础。
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公开(公告)号：CN119979606A
公开(公告)日：2025-05-13
申请号：CN202510187991.7
申请日：2025-02-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明提供了一种L蛋白突变的重组口蹄疫病毒株及在疫苗制备中的应用，属于生物医药技术领域。本发明首先发现在宿主细胞中过表达CISD2蛋白会抑制FMDV的复制，并且解析了抑制机制，具体包括CISD2通过抑制L蛋白的表达，尤其是通过蛋白酶体途径引起L蛋白的降解，进而抑制FMDV复制。本发明还鉴定出了CISD2蛋白降解L蛋白的关键位点，利用反向遗传技术，通过在L蛋白中引入关键位点氨基酸突变，成功构建并拯救得到L蛋白关键氨基酸位点突变的重组口蹄疫病毒，消除了CISD2蛋白降解L蛋白及抑制FMDV复制的能力，提升了病毒滴度，具有良好的生产性能，可用于制备重组口蹄疫病毒株及重组疫苗株。
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