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公开(公告)号：CN116589538A
公开(公告)日：2023-08-15
申请号：CN202310373357.3
申请日：2023-04-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 朱紫祥 , 毛箬青 , 郝荣增 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
IPC: C07K14/01 , C07K19/00 , A61K39/12 , A61K39/295 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合，所述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合能够产生较强的免疫反应；其次本发明制备了包含上述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合的七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗，所述七组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率，无生物安全风险，突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题，证明了非洲猪瘟亚单位疫苗研究方案的可行性。
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公开(公告)号：CN116574848A
公开(公告)日：2023-08-11
申请号：CN202310732068.8
申请日：2023-06-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q1/6806 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于LAMP‑CRISPRCas12a检测猪圆环2型病毒的引物及检测方法，包括以下操作步骤：(1)组织样品的处理；(2)病毒DNA的提取；(3)引物设计；(4)PCR产物回收及纯化；(5)标准质粒的构建；(6)重组质粒鉴定；(7)质粒DNA小量抽提；(8)LAMP引物筛选及扩增；(9)猪圆环病毒2型LAMP‑CRISPR‑Cas12a检测体系建立；本发明在CRISPR技术的基础上与LAMP技术相结合，建立了PCV2的快速检测方法，该方法敏感性高、特异性高、操作简单、检测时间短、结果分析简单、抗干扰性强、不需要复杂仪器设备。这种低价、高度敏感和特异性强、便携式和可视化的方法将是现场PCV2检测的替代方法，这可能有助于及时监测和快速制定控制PCV2的策略。
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公开(公告)号：CN114276446B
公开(公告)日：2023-04-18
申请号：CN202210011200.1
申请日：2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 杨洋 , 茹毅 , 秦晓东 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及A型口蹄疫病毒结构蛋白VP2的抗体m12、制备方法及应用。本发明筛选获得一株高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系，并获得了一种鼠单克隆抗体m12。所述单克隆抗体m12与结构蛋白VP2特异性反应，对A型谱系代表毒株具有广谱反应性，而不和O型谱系代表毒株反应。利用鼠单克隆抗体m12和A型结构蛋白兔抗血清建立A型口蹄疫病毒结构蛋白固相竞争ELISA检测试剂盒，相较于现有抗体，具有更好的灵敏度和特异性，适用于A型口蹄疫感染或灭活疫苗免疫后结构蛋白抗体的检测，同时，也是一种监测口蹄疫非免疫地区感染情况的新方法。
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公开(公告)号：CN115671127A
公开(公告)日：2023-02-03
申请号：CN202211353862.3
申请日：2022-11-01
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K31/7084 , A61K39/135 , A61P37/04
Abstract: 本发明属于兽用疫苗领域，具体涉及一种环鸟苷单磷酸腺苷单磷酸类似物在制备免疫增强剂或疫苗增效剂中的应用。首先，本发明意外发现了一种稳定的环鸟苷单磷酸腺苷单磷酸(cGAMP)类似物，可用于口蹄疫疫苗中的免疫增强剂，能够提高口蹄疫疫苗免疫抗体水平及延长免疫持续期。其次，将所述的环鸟苷单磷酸腺苷单磷酸(cGAMP)类似物添加到口蹄疫疫苗抗原中，经过乳化制备成口蹄疫疫苗，能够显著增强疫苗免疫效果，能提高口蹄疫疫苗免疫后的抗体水平及延长抗体在动物机体的持续时间，具有极高的应用前景和经济效益。
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公开(公告)号：CN114276446A
公开(公告)日：2022-04-05
申请号：CN202210011200.1
申请日：2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 杨洋 , 茹毅 , 秦晓东 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及A型口蹄疫病毒结构蛋白VP2的抗体m12、制备方法及应用。本发明筛选获得一株高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系，并获得了一种鼠单克隆抗体m12。所述单克隆抗体m12与结构蛋白VP2特异性反应，对A型谱系代表毒株具有广谱反应性，而不和O型谱系代表毒株反应。利用鼠单克隆抗体m12和A型结构蛋白兔抗血清建立A型口蹄疫病毒结构蛋白固相竞争ELISA检测试剂盒，相较于现有抗体，具有更好的灵敏度和特异性，适用于A型口蹄疫感染或灭活疫苗免疫后结构蛋白抗体的检测，同时，也是一种监测口蹄疫非免疫地区感染情况的新方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119979484A
公开(公告)日：2025-05-13
申请号：CN202510189224.X
申请日：2025-02-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明提供了一种高抗原产量的重组口蹄疫病毒株及其构建方法和应用，属于生物技术领域。一种重组口蹄疫病毒株，其中L蛋白是第108位氨基酸发生突变或缺失的突变L蛋白。本发明发现宿主蛋白RAB20过表达抑制FMDV的复制，且通过蛋白酶体通路降解L蛋白，进而抑制病毒复制；本发明通过在FMDV L蛋白中对关键氨基酸位点(108)进行突变，构建了不被宿主蛋白RAB20抑制复制的重组口蹄疫病毒株，所述重组病毒能够稳定传代，且在BHK‑21细胞上具有高病毒滴度的特性，提高了病毒滴度及抗原产量，能够用于FMDV疫苗制备，具备良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN119345361A
公开(公告)日：2025-01-24
申请号：CN202311314168.5
申请日：2023-10-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及一种RSAD1基因/蛋白为靶点在筛选抑制小核糖核酸病毒科病毒感染药物中的应用。本发明意外发现沉默RSAD1基因能够显著抑制塞内卡病毒的复制，可作为靶点用于研发针对塞内卡病毒的抗病毒药物。本发明提供了靶向RSAD1基因的sgRNA序列，结合CRISPR‑Cas9基因编辑技术，沉默RSAD1基因，获得了RSAD1基因敲除的单克隆细胞系，所述细胞系能够显著抑制塞内卡病毒的复制，为进一步筛选抵抗塞内卡病毒复制的药物和试剂提供靶点；同时本发明发现，在宿主细胞中过表达RSAD1蛋白能够显著促进塞内卡病毒的复制，可作为塞内卡病毒或疫苗的生产细胞系，用于塞内卡病毒或疫苗的生产。
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公开(公告)号：CN116672443B
公开(公告)日：2024-11-29
申请号：CN202310647769.1
申请日：2023-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 郝荣增 , 朱紫祥 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 毛箬青 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
IPC: A61K39/12 , A61K39/385 , A61K9/14 , A61K47/34 , A61K47/32 , A61K47/36 , A61K47/10 , A61K47/42 , A61K47/02 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟组合疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒抗原P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合，其中至少一种抗原与纳米颗粒载体形成含有所述抗原或其抗原表位的纳米颗粒；所述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合能够刺激机体产生较强的免疫反应；其次本发明制备了包含上述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合的疫苗，所述七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率，无生物安全风险，突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题。
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公开(公告)号：CN116747296A
公开(公告)日：2023-09-15
申请号：CN202310605961.4
申请日：2023-05-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 朱紫祥 , 毛箬青 , 郝荣增 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及一种十一组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、E165R蛋白、C129R蛋白、P72蛋白、X蛋白、Y蛋白、A蛋白和B蛋白组成的非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合，所述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合能够诱导机体产生较强的免疫反应；其次本发明制备了包含上述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合的十一组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗，所述亚单位疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率，无生物安全风险，突破了国内外现有非洲猪瘟亚单位疫苗无法为猪体提供有效免疫保护的难题，证明了非洲猪瘟亚单位疫苗研究方案的可行性。
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公开(公告)号：CN116445486A
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202310322418.3
申请日：2023-03-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/12 , C12N7/00 , C12N5/10 , A61K39/135 , A61K38/17 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12R1/91 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及KLHL34敲除细胞系的构建及作为小RNA病毒科病毒疫苗生产细胞系的应用。本发明首先发现，抑制宿主细胞中KLHL34基因表达能促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制；其次，本发明提供了一种特异性靶向KLHL34的sgRNA，所述sgRNA能够特异性靶向KLHL34基因，结合CRISPR‑Cas9技术实现了KLHL34基因的敲除，获得的单克隆细胞系能够显著促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制，提高FMDV疫苗的生产量和抗原产量，可作为小核糖核酸病毒科病毒疫苗尤其是FMDV疫苗的生产细胞系，具有广阔的应用前景。
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