一种熊蜂生假丝酵母强组成型启动子及其应用

    公开(公告)号:CN112266914A

    公开(公告)日:2021-01-26

    申请号:CN202011156814.6

    申请日:2020-10-26

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种熊蜂生假丝酵母强组成型启动子及其应用。本发明以熊蜂生假丝酵母为研究对象,预测、克隆、筛选、评价强组成型启动子。以增强型绿色荧光蛋白为报告基因,通过上述所选启动子驱动其表达,分析绿色荧光强度差异及转录水平差异,最终获得了一个具有强转录活性的组成型启动子PX。该启动子与已知强组成型PGPD启动子相比,在以葡萄糖或油酸为唯一碳源及不同培养时期均具有最高强度的转录活性。该实验在熊蜂生假丝酵母中首次以增强型绿色荧光蛋白为报告基因,通过转录组水平分析得到一段具有转录活性强的DNA序列,具有良好的应用前景,丰富了合成生物学元件,同时也为该菌种在其基因工程改造及外源基因表达奠定了理论基础。

    一种高稳定性葡聚糖酶的制备方法

    公开(公告)号:CN111549017A

    公开(公告)日:2020-08-18

    申请号:CN202010459385.3

    申请日:2020-05-27

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种高稳定性葡聚糖酶的制备方法,属于酶工程技术领域。本发明将相同酶活的葡聚糖酶AnEglA6和BglA等体积混合,得到复配型酶液;取10×处理液BG01加入复配型酶液中混合,58-62℃保温25-35min,冰水浴冷却;加入第二种10×处理液BG02,在58-62℃保温25-35min,冰水浴冷却;继续加入10×处理液BG03,充分混合,即得高稳定性葡聚糖酶。采用本发明方法获得的葡聚糖酶SL04在pH4~6.5范围内活性稳定在60%以上,在4℃环境存储7天酶活下降幅度在40%以内。本发明获得的高稳定性葡聚糖酶在酒精发酵等领域有应用前景。

    一种果糖基转移酶及其编码基因与应用

    公开(公告)号:CN104774817B

    公开(公告)日:2020-06-09

    申请号:CN201510179542.4

    申请日:2015-04-15

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及基因工程领域,具体地,一种果糖基转移酶FWT01及其编码基因与应用。本发明提供了一种来源于黑曲霉(Aspergillus niger)的果糖基转移酶FWT01,其氨基酸序列如序列1所示,且本发明提供了编码上述果糖基转移酶的编码基因FWT‑01。本发明的果糖基转移酶具有以下性质:1)可在毕赤酵母(Pichia pastoris)、大肠杆菌(Escherichia coli)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)等宿主中异源表达;2)具有较宽的温度稳定性性,在50以下酶稳定;3)具有较宽的pH稳定范围:在pH4.0‑9.0条件下稳定(酶活力残留>90%);4)具有高低聚果糖转化率,其浓度为57.3%(w/w)。

    生产低聚果糖的方法
    46.
    发明公开

    公开(公告)号:CN107012186A

    公开(公告)日:2017-08-04

    申请号:CN201710196964.1

    申请日:2017-03-29

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: C12P19/18 C12P19/12

    Abstract: 本发明涉及一种生产低聚果糖的方法,包括以下步骤:采用连接肽连接果糖基转移酶和葡萄糖氧化酶,然后在宿主菌中进行融合表达,得到融合蛋白;将融合蛋白和过氧化氢酶加入蔗糖水溶液中混匀,进行催化反应,得到低聚果糖。本发明还提供了一种上述方法在制备低聚果糖中的应用。采用本发明的方法可以显著提高低聚果糖的纯度,对其工业化生产及应用具有重要意义。

    一种提高米曲霉曲酸产量的方法

    公开(公告)号:CN106755164A

    公开(公告)日:2017-05-31

    申请号:CN201611203962.2

    申请日:2016-12-23

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: C12P17/06

    Abstract: 本发明公开了本发明涉及一种提高米曲霉曲酸产量的方法,属于微生物发酵领域。本发明以CCTCC No:M 2014436为发酵菌株,对发酵培养基的成分及其浓度进行优化,并提供了一种应用该菌株提高曲酸产量的培养方法,所述方法是培养基pH为5.0~8.0、培养温度为27~34℃、接种量为6~12%(v/v),经验证,该方法可使发酵液曲酸产量达37.27g/L,与对照相比提高了142.41%。利用此策略可以大大提高曲酸产量,为其工业化生产提供了基础。

    一种热稳定性提高的淀粉酶突变体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN104263708B

    公开(公告)日:2017-02-15

    申请号:CN201410461796.0

    申请日:2013-09-17

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的淀粉酶突变体及其制备方法和应用,属于酶工程领域。本发明利用分子生物学技术进行多轮定点突变获得了热稳定性提高的淀粉酶突变体,所得淀粉酶在60℃的半衰期由对照(突变前)例的3.2min提高到23.9min。利用此策略可以显著提高淀粉酶的热稳定性,为其工业化生产提供了基础。此策略对其它酶的性质改造具有重要的指导意义。

    一株表达植酸酶的酿酒酵母工程菌及其应用

    公开(公告)号:CN104805025A

    公开(公告)日:2015-07-29

    申请号:CN201510189521.0

    申请日:2015-04-20

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: Y02E50/17 C12N9/16 C07K14/395 C12P7/06 C12Y301/03008

    Abstract: 本发明公开了一株表达植酸酶的酿酒酵母工程菌及应用,属于发酵工程领域。本发明所提供的酿酒酵母工程菌,是将植酸酶的编码基因与α-凝集素的编码基因融合后转化酿酒酵母CICIMY0086中,重组质粒整合到宿主的染色体DNA上,得到在细胞表面锚定表达植酸酶的菌株,植酸酶酶活达到6.4U/g(菌体湿重)。所述菌株用于玉米和木薯等原料的酒精发酵生产,不仅能够提高酒精发酵效率,而且能明显降低酒糟中的植酸含量,与宿主酿酒酵母CICIMY0086相比植酸含量降低了90%以上。本发明对于提高酒糟的利用价值,减少磷排放,以及燃料酒精的环境友好生产具有重要意义。

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