公开(公告)号：CN112266914B

公开(公告)日：2022-12-02

申请号：CN202011156814.6

申请日：2020-10-26

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈献忠 ,  石依博 ,  夏媛媛 ,  杨海泉

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12N15/65 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种熊蜂生假丝酵母强组成型启动子及其应用。本发明以熊蜂生假丝酵母为研究对象，预测、克隆、筛选、评价强组成型启动子。以增强型绿色荧光蛋白为报告基因，通过上述所选启动子驱动其表达，分析绿色荧光强度差异及转录水平差异，最终获得了一个具有强转录活性的组成型启动子PX。该启动子与已知强组成型PGPD启动子相比，在以葡萄糖或油酸为唯一碳源及不同培养时期均具有最高强度的转录活性。该实验在熊蜂生假丝酵母中首次以增强型绿色荧光蛋白为报告基因，通过转录组水平分析得到一段具有转录活性强的DNA序列，具有良好的应用前景，丰富了合成生物学元件，同时也为该菌种在其基因工程改造及外源基因表达奠定了理论基础。

公开(公告)号：CN112266914A

公开(公告)日：2021-01-26

申请号：CN202011156814.6

申请日：2020-10-26

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈献忠 ,  石依博 ,  夏媛媛 ,  杨海泉

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12N15/65 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种熊蜂生假丝酵母强组成型启动子及其应用。本发明以熊蜂生假丝酵母为研究对象，预测、克隆、筛选、评价强组成型启动子。以增强型绿色荧光蛋白为报告基因，通过上述所选启动子驱动其表达，分析绿色荧光强度差异及转录水平差异，最终获得了一个具有强转录活性的组成型启动子PX。该启动子与已知强组成型PGPD启动子相比，在以葡萄糖或油酸为唯一碳源及不同培养时期均具有最高强度的转录活性。该实验在熊蜂生假丝酵母中首次以增强型绿色荧光蛋白为报告基因，通过转录组水平分析得到一段具有转录活性强的DNA序列，具有良好的应用前景，丰富了合成生物学元件，同时也为该菌种在其基因工程改造及外源基因表达奠定了理论基础。

公开(公告)号：CN115896157A

公开(公告)日：2023-04-04

申请号：CN202210936448.9

申请日：2022-08-05

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈献忠 ,  夏媛媛 ,  杨海泉 ,  石依博 ,  张疆睿 ,  沈微

IPC: C12N15/81 ,  C12N15/65 ,  C12N15/90 ,  C12N15/55 ,  C12N15/53 ,  C12N15/31 ,  C12N1/19 ,  C12P7/6409 ,  C12P19/44 ,  C12R1/72

Abstract: 本发明公开了一种产酸型槐糖脂的重组熊蜂生假丝酵母，属于代谢工程领域。所述方法包括：槐糖脂代谢途径改造；启动子工程条件关键酶的表达强度；高产酸型槐糖脂的重组熊蜂生假丝酵母的构建；菌株的发酵；酸型槐糖脂的提取分离与鉴定。本发明构建得到的重组熊蜂生假丝酵母发酵油酸能够合成单一的酸型槐糖脂，而不再合成内酯型槐糖脂，同时酸型槐糖脂的产量由20g·L‑1提高到44g·L‑1。该菌株经5L发酵罐发酵，酸型槐糖脂产量可达99.5g·L‑1。