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公开(公告)号:CN119799529A
公开(公告)日:2025-04-11
申请号:CN202411949177.6
申请日:2024-12-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了高产(‑)‑α‑红没药醇的热带假丝酵母工程菌及其构建方法,属于微生物技术领域。本发明构建了底盘细胞热带假丝酵母DC04‑WG04‑2,并在此基础上表达了酿酒酵母来源的过氧化氢酶的基因Cat2和3‑羟基‑3‑甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶的基因ERG10,并用PEX15基序锚定在过氧化物酶体表面进行共表达;进一步敲除基因ADH1、GPD1基因与GPD2基因,减少乙醇的积累,减少甘油的产生。本发明还通过优化发酵条件,使重组热带假丝酵母的(‑)‑α‑红没药醇产量达到了461.7mg/L。本发明的制备方法具有成本低、效率高、操作简易、前景广等特点。
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公开(公告)号:CN119662500A
公开(公告)日:2025-03-21
申请号:CN202411808578.X
申请日:2024-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种从头合成羟基酪醇的菌株及其应用,属于生物技术领域。本发明提供的重组大肠杆菌E.coli HTΔ‑glk能够实现将葡萄糖和甘油转化为羟基酪醇,生产羟基酪醇的产量可高达4.27g/L,是采用YMGRH1D1发酵生产羟基酪醇的产量的3.62倍,并且在发酵过程中无需添加诱导剂;因此本发明的原材料廉价易得,无危害人体健康的添加剂、重金属和抗生素,为后期的产物提纯奠定良好的基础,更能够达到商业应用的要求。
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公开(公告)号:CN113416662B
公开(公告)日:2023-10-27
申请号:CN202110621208.5
申请日:2021-06-03
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产西柏三烯一醇的酿酒酵母及应用,属于代谢工程和微生物工程领域。本发明通过将关键酶西柏三烯醇合成酶基因、香叶基香叶基焦磷酸(GGPP)合酶基因、法尼基焦磷酸合成酶(ERG20)基因整合至酿酒酵母菌株基因组上,并利用启动子Phxt1替换角鲨烯合成酶(ERG9)原来的启动子来敲低竞争途径麦角固醇途径,还将含有关键酶基因ggpp基因和cbts基因的游离质粒转入该酿酒酵母中,进一步提高了西柏三烯一醇产量。本发明还采用线粒体区室化方法,将GGPP合酶和西柏三烯醇合成酶定位到线粒体中,使西柏三烯一醇产量提高至283.98μg/L,在5L发酵罐发酵水平,西柏三烯一醇产量可达15mg/L。
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公开(公告)号:CN116804189A
公开(公告)日:2023-09-26
申请号:CN202310066482.X
申请日:2023-01-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种新7β‑羟基类固醇脱氢酶及应用,属于酶工程和生物催化技术领域。本发明从数据库中挖掘出一种具有高转化率的7β‑羟基类固醇脱氢酶,并在大肠杆菌中实现了酶的异源表达。通过对酶学性质等参数进行测定比较,确定该酶在熊去氧胆酸生产方面具有较高的催化潜力。本发明将该7β‑羟基类固醇脱氢酶用于一锅法催化鹅去氧胆酸生产熊去氧胆酸,反应3h的转化率可达68.3%。
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公开(公告)号:CN114214208B
公开(公告)日:2023-06-09
申请号:CN202111524579.8
申请日:2021-12-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一株高耐硒灵芝突变体菌株及其应用,属于真菌育种技术领域。其在富硒地区采集灵芝菌子实体,获得菌丝体培养物,收集其孢子后进行诱变育种,在高硒浓度培养基中进行富集培养,获得耐硒能力提高的灵芝菌丝体。所获得的耐硒能力提高的灵芝突变体命名为Ganoderma sp.ML2613,该突变体的菌丝体培养物已保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号CCTCC NO:M20211217。与原菌株菌丝体培养物相比,突变体Ganoderma sp.ML2613可以在硒含量为1600mg/L的培养液中维持正常生长,而原菌株的菌丝体在同样的发酵培养液中生长极其缓慢。突变体Ganoderma sp.ML2613更适合在高硒含量环境中培养,具有获得富硒菌丝体的潜力,也有利于在高硒环境中进行灵芝的野外栽培。
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公开(公告)号:CN112266914B
公开(公告)日:2022-12-02
申请号:CN202011156814.6
申请日:2020-10-26
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/81 , C12N1/19 , C12N15/65 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种熊蜂生假丝酵母强组成型启动子及其应用。本发明以熊蜂生假丝酵母为研究对象,预测、克隆、筛选、评价强组成型启动子。以增强型绿色荧光蛋白为报告基因,通过上述所选启动子驱动其表达,分析绿色荧光强度差异及转录水平差异,最终获得了一个具有强转录活性的组成型启动子PX。该启动子与已知强组成型PGPD启动子相比,在以葡萄糖或油酸为唯一碳源及不同培养时期均具有最高强度的转录活性。该实验在熊蜂生假丝酵母中首次以增强型绿色荧光蛋白为报告基因,通过转录组水平分析得到一段具有转录活性强的DNA序列,具有良好的应用前景,丰富了合成生物学元件,同时也为该菌种在其基因工程改造及外源基因表达奠定了理论基础。
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公开(公告)号:CN111500561B
公开(公告)日:2022-12-02
申请号:CN202010380799.7
申请日:2020-05-08
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种提高胞内普鲁兰酶提取效率的方法,属于微生物和酶工程技术领域。本发明采用两种特殊试剂对巴斯德毕赤酵母突变株处理,首先将重组巴斯德毕赤酵母突变体GS115/pPICK‑BdP5 WB138与10×试剂D反应,随后在冰水中放置,再加入10×试剂E反应。离心收集细胞后用柠檬酸缓冲液悬浮细胞进行超声波破碎。经过两种试剂处理的细胞经超声波处理6 min就将细胞全部破碎,破碎液中酶活保留在85%以上。使用本发明所提供的方法及专用处理液可以大幅度减少细胞破碎所需要消耗的电力等成本,减少设备占用时间。
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公开(公告)号:CN114107143B
公开(公告)日:2022-09-06
申请号:CN202111280840.4
申请日:2021-11-01
Applicant: 江苏香地化学有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种生产5’‑胞苷酸的方法,属于基因工程和微生物工程领域。本发明通过基因敲除技术对大肠杆菌的胞苷单磷酸焦磷酸化酶基因ushA和核苷酸5'‑单磷酸核苷酶基因ppnN进行敲除,获得可高效积累5’‑胞苷酸(5’‑CMP)的大肠杆菌突变体。进一步通过过量表达尿苷激酶基因udk,获得高效生产5’‑CMP的重组大肠杆菌,5’‑CMP的发酵水平可达31.8 g/L以上。这种高效的大肠杆菌菌株可用于实现5’‑CMP的工业化生产,利于降低其生产成本及环境污染,实现绿色生物制造。
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公开(公告)号:CN112941119B
公开(公告)日:2022-08-30
申请号:CN202110089835.9
申请日:2021-01-22
Applicant: 江南大学
IPC: C12P7/6436 , C12N15/81 , C12N15/54 , C12N15/31 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了一种提高酿酒酵母工程菌脂肪酸乙酯产量的方法,本发明通过阻断甾醇酯途径(ΔARE1、ΔARE2)、三酰基甘油途径(ΔDGA1、ΔLRO1)和β氧化途径(ΔPXA2)富集脂肪酰辅酶A作为生产脂肪酸乙酯的前体物质,在此基础上整合表达根据酿酒酵母密码子优化的外源基因WS2(蜡酯合成酶)构建一条可以利用葡萄糖为底物,经过一系列反应形成脂肪酸乙酯的代谢通路,并提供一种适用于所构建的酿酒酵母工程菌的发酵方法,酿酒酵母工程菌的FAEE最高产量为1.35g/L,是目前报道的利用酿酒酵母产FAEE产量中较高的。
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公开(公告)号:CN114196689A
公开(公告)日:2022-03-18
申请号:CN202111596810.4
申请日:2021-12-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产α‑蛇麻烯的酵母重组菌株的构建方法及其应用,属于代谢工程领域。本发明通过在热带假丝酵母的染色体DNA上整合表达植物来源的α‑蛇麻烯合酶基因构建了可以合成α‑蛇麻烯的工程菌株,在此基础上过表达内源性的涉及α‑蛇麻烯合成基因,构建高效生产α‑蛇麻烯的重组菌株,α‑蛇麻烯产量达到149.7mg·L‑1,较对照菌株提高了112倍。本发明还提供了利用上述工程菌株生产α‑蛇麻烯方法。本发明提供的α‑蛇麻烯生产菌株生产性能稳定,生产过程不需要添加抗生素,具有良好的工业应用前景。
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