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公开(公告)号：CN104862299A
公开(公告)日：2015-08-26
申请号：CN201510200528.8
申请日：2015-04-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种提高枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)外源蛋白表达量的方法。采用ARTP直接诱变含重组质粒的B.subtilis，经淀粉-台盼蓝平板预筛、96孔板高通量筛选及摇瓶发酵验证，获得一酶活力高的突变株，其酶活力提高了31.4％。本发明所用的ARTP技术是一种应用范围很广的生物诱变技术；在诱变时采用含有重组质粒的B.subtilis菌株直接诱变，省去了诱变后重组质粒的转化步骤，具有高效性；同时，结合96孔板进行高通量筛选，大大提高了筛选正突变株的效率。因此，通过该方法快速筛选外源蛋白高产B.subtilis菌株具有重要经济价值。
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公开(公告)号：CN104774817A
公开(公告)日：2015-07-15
申请号：CN201510179542.4
申请日：2015-04-15
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/1051 , C12P19/18 , C12Y204/01099
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体地，一种果糖基转移酶FWT01及其编码基因与应用。本发明提供了一种来源于黑曲霉(Aspergillus niger)的果糖基转移酶FWT01，其氨基酸序列如序列1所示，且本发明提供了编码上述果糖基转移酶的编码基因FWT-01。本发明的果糖基转移酶具有以下性质：1)可在毕赤酵母(Pichia pastoris)、大肠杆菌(Escherichia coli)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)等宿主中异源表达；2)具有较宽的温度稳定性性，在50以下酶稳定；3)具有较宽的pH稳定范围：在pH4.0-9.0条件下稳定(酶活力残留＞90％)；4)具有高低聚果糖转化率，其浓度为57.3％(w/w)。
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公开(公告)号：CN104774817B
公开(公告)日：2020-06-09
申请号：CN201510179542.4
申请日：2015-04-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体地，一种果糖基转移酶FWT01及其编码基因与应用。本发明提供了一种来源于黑曲霉(Aspergillus niger)的果糖基转移酶FWT01，其氨基酸序列如序列1所示，且本发明提供了编码上述果糖基转移酶的编码基因FWT‑01。本发明的果糖基转移酶具有以下性质：1)可在毕赤酵母(Pichia pastoris)、大肠杆菌(Escherichia coli)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)等宿主中异源表达；2)具有较宽的温度稳定性性，在50以下酶稳定；3)具有较宽的pH稳定范围：在pH4.0‑9.0条件下稳定(酶活力残留＞90％)；4)具有高低聚果糖转化率，其浓度为57.3％(w/w)。
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公开(公告)号：CN107012186A
公开(公告)日：2017-08-04
申请号：CN201710196964.1
申请日：2017-03-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种生产低聚果糖的方法，包括以下步骤：采用连接肽连接果糖基转移酶和葡萄糖氧化酶，然后在宿主菌中进行融合表达，得到融合蛋白；将融合蛋白和过氧化氢酶加入蔗糖水溶液中混匀，进行催化反应，得到低聚果糖。本发明还提供了一种上述方法在制备低聚果糖中的应用。采用本发明的方法可以显著提高低聚果糖的纯度，对其工业化生产及应用具有重要意义。
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