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公开(公告)号：CN117820463B
公开(公告)日：2024-10-01
申请号：CN202311872473.6
申请日：2023-12-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种稳定性和可溶性提高的胶原蛋白，属于基因工程技术领域。本发明将重复序列(GPP)10中部分脯氨酸改造为天冬氨酸和赖氨酸。本发明构建得到的胶原蛋白纯度达到90％以上，较未改造、由重复序列(GPP)10组成的胶原蛋白(V‑P10BP10)产量提高10.67％、耐热性提高2℃，同时保留较好的耐盐性。本发明提高了生产胶原蛋白的产量，在生物材料领域有着广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN112521491B
公开(公告)日：2022-06-10
申请号：CN202011491036.6
申请日：2020-12-17
Applicant: 江南大学 , 江苏省血吸虫病防治研究所
Abstract: 本发明涉及一种用于制备水凝胶的胶原蛋白及其制备方法，设计了含有生物活性结构GFPGER区域的胶原蛋白序列，并在胶原蛋白序列的若干位点引入具有氧化交联特性的半胱氨酸，通过大肠杆菌异源表达获得四种纯度较高的含半胱氨酸胶原蛋白。采用双氧水为交联剂对胶原蛋白进行交联制备得到水凝胶。本发明制备得到的胶原蛋白具有较好的温敏性，在氧化环境中能够形成稳定的水凝胶构筑，并对细胞无毒性，为药物控释载体的应用提供了较好的基础。
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公开(公告)号：CN109651453B
公开(公告)日：2020-08-04
申请号：CN201811472667.6
申请日：2018-12-04
Applicant: 江南大学
IPC: C07H1/06 , C07H15/256 , C12P19/56 , C12P19/14
Abstract: 本发明公开了一种高值化甜菊糖母液糖的方法，属于天然化合物的改性和提取领域。本发明采用乳糖酶来高度专一性催化水解斯替夫苷，使斯替夫苷转化为通常只能从甜茶叶中获得的甜茶苷；同时，将母液糖中的斯替夫苷转化后，由于甜茶苷和莱鲍迪苷A的极性差异远远超过斯替夫苷和莱鲍迪苷A的极性差异，从而更易于从母液糖中分离莱鲍迪苷A。本发明提供的技术同样适用于含有斯替夫苷的混合甜菊糖苷的高值化，并有助于从中分离莱鲍迪苷A。
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公开(公告)号：CN109651453A
公开(公告)日：2019-04-19
申请号：CN201811472667.6
申请日：2018-12-04
Applicant: 江南大学
IPC: C07H1/06 , C07H15/256 , C12P19/56 , C12P19/14
Abstract: 本发明公开了一种高值化甜菊糖母液糖的方法，属于天然化合物的改性和提取领域。本发明采用乳糖酶来高度专一性催化水解斯替夫苷，使斯替夫苷转化为通常只能从甜茶叶中获得的甜茶苷；同时，将母液糖中的斯替夫苷转化后，由于甜茶苷和莱鲍迪苷A的极性差异远远超过斯替夫苷和莱鲍迪苷A的极性差异，从而更易于从母液糖中分离莱鲍迪苷A。本发明提供的技术同样适用于含有斯替夫苷的混合甜菊糖苷的高值化，并有助于从中分离莱鲍迪苷A。
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公开(公告)号：CN108410845A
公开(公告)日：2018-08-17
申请号：CN201810311758.5
申请日：2018-04-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的D,D-羧肽酶DacA突变体及其制备方法，属于遗传工程和酶工程领域。本发明公开了由大肠杆菌(Escherichia coli)BL21来源的D,D-羧肽酶DacA为母本，基于酶结构解析确定关键位点及突变方式，经分子生物学技术进行定点突变而获得催化效率提高的DacA突变体。在此改造条件下，E.coli D,D-羧肽酶DacA的突变体K113G催化效率常数kcat值提高最多，由6543.4s-1提高至9428.1s-1。利用此策略可以显著提高D,D-羧肽酶DacA的催化效率，为其在代谢改造E.coli提高其胞外分泌水平等方面的应用提供了基础。此策略对其它酶的性质改造具有重要的指导意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105779485A
公开(公告)日：2016-07-20
申请号：CN201610219101.7
申请日：2016-04-08
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N15/70 , C12N9/2411 , C12N9/485 , C12N2800/101 , C12P21/005 , C12Y304/16004
Abstract: 本发明公开了一种基于dacB提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平的方法，涉及基因工程与发酵工程领域。本发明通过过量表达D?丙氨酰?D?丙氨酸羧肽酶基因，获得重组蛋白胞外分泌水平过了表达的重组大肠杆菌。本发明提供一种提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平方法。采用该方法可显著提高大肠杆菌菌株的重组蛋白分泌能力。采用淀粉酶为模式重组蛋白，通过该方法可将大肠杆菌胞外重组淀粉酶含量由对照组的8.54％提高至55.80％。该方法对重组蛋白在大肠杆菌中的高效分泌与生产具有重要指导意义。
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公开(公告)号：CN105483070A
公开(公告)日：2016-04-13
申请号：CN201510993097.5
申请日：2015-12-24
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/1051 , C12Y204/01099
Abstract: 本发明公开了一株表达果糖基转移酶的重组酿酒酵母菌株及构建方法与应用，属于基因工程技术领域。本发明采用重组DNA技术将黑曲霉(Aspergillus niger)来源的果糖基转移酶基因(fru)克隆连接到酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)表达载体pYX212，并转化S.cerevisiae W303宿主。经筛选鉴定得到一株高产果糖基转移酶的重组菌株，命名为：S.cerevisiae W303-pYX212-N1。在250mL摇瓶中，重组S.cerevisiae菌株表达的果糖基转移酶酶活力可达(39.79U/mL)。这为果糖基转移酶的高效表达与其在工业中应用具有重要意义与巨大的应用价值。
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公开(公告)号：CN111499729A
公开(公告)日：2020-08-07
申请号：CN202010325899.X
申请日：2020-04-23
Abstract: 本发明公开了一种调控类I型胶原蛋白纤维条纹周期长度的方法，属于基因工程技术领域。本发明以N和C端(PPG)n序列为基础，在中间插入连续的具有不同数量Gly-Xaa-Yaa三联体的胶原蛋白序列，形成三段式的嵌合胶原蛋白P-CL-P模式，通过N和C端的(PPG)n三股螺旋间的相互作用驱动自组装，形成具有不同暗条纹长度的周期性明暗相间条纹的带状纤维。本发明的方法制备工艺简单，能够大规模生产成本低的胶原蛋白纤维，在生物材料领域有着广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN105647815B
公开(公告)日：2019-08-06
申请号：CN201510942917.8
申请日：2015-12-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种提高米曲霉曲酸产量的方法，属于发酵工程技术领域。具体地，通过改变培养基关键组分的浓度与接种条件控制米曲霉的菌落形态为球形(菌体处于最佳产酸形态)，进而提高曲酸产量。当菌体形态为菌球时，米曲霉(A.oryzae)的产酸能力比菌丝时明显提高，曲酸产量可达15.11g/L。同时，菌球直径范围为0.25～0.35mm时，单位细胞曲酸积累量最高为0.778g/g。本发明优化了种子培养基中葡萄糖、酵母提取物浓度和孢子浓度，控制菌球大小，从而提高了米曲霉单位细胞曲酸产量，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN105647892A
公开(公告)日：2016-06-08
申请号：CN201610123620.3
申请日：2016-03-04
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/485 , C12N15/70 , C12N2800/101 , C12N2800/60 , C12Y304/16004
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体地，一种D-丙氨酰-D-丙氨酸羧肽酶dacA基因及应用。本发明提供了一种来源于大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)的D-丙氨酰-D-丙氨酸羧肽酶dacA，其氨基酸序列如序列1所示，且本发明提供了编码上述dacA的编码基因dacA。本发明的D-丙氨酰-D-丙氨酸羧肽酶能够从肽聚糖五肽上移除最后一个末端D-丙氨酸(D-Ala)，导致转肽反应中供体不可用，从而控制肽聚糖的网状交联水平，可以提高E.coli蛋白胞外分泌水平。
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